Name: monitoring of systemic and hepatic hemodynamic parameters in mice
Uploaded: 2014-10-04T14:00:00.000+00:00
Duration: 16 min 9 s
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이 연구는 &quot;가상 간 네트워크&quot;투자 교육 및 연구를위한 독일 연방 Ministery (BMBF)에 의해 지원되었다. 나는 비디오를 생산 및 오디오를 기록하는 애니메이션과 이사벨 Jank을 만드는 그들의 도움에 대한 예나 대학 병원의 미디어 센터에서 프랭크 슈베르트 르네 Gumpert 감사드립니다.

주택 및 수행 모든 절차는 독일어 동물 복지 규정에 따라했다. 1 센서 교정 (센서 교정에 대한 제조업체의 지침에 따라) 1.1) 밀라 카테터 교정. 30 분 전에 균형을 위해 (제로) 및 교정에 대한 멸균 생리 식염수에 카테터의 끝을 미리 담가. <ol><li> 브리지 앰프의 millar1 채널에 밀라 센서를 연결하고 물 열에 밀라 센서 팁을 삽입합니다. </li><li> 0 CMH 2 O.에 물 열 값을 설정합니다 데이터 분석 소프트웨어 창에서 증폭 브리지를 선택하고 그것을 제로. 기준값 0 CMH 2 O가 설정 될 수있다. </li><li> 20 CMH 2 O.에 물 열 값을 설정합니다 데이터 분석 소프트웨어 창 진행을 실행하고 중지합니다. 증폭 브리지의 창에서 &quot;단위&quot;를 선택,이 O에 따라 0과 20 CMH의 기준을 설정합니다. &lt;CMH에 &quot;장치를&quot;조정서브&gt; 2 O. </li><li> 동일한 방식으로 CAP 측정 millar2를 보정 (베이스 라인이 90, 110 CMH이 O을 설정). </li></ol> 1.2) 혈류 프로브 교정 <ol><li> 탈 이온수로 프로브를 넣습니다. 천음속 흐름 프로브 시스템과 프로브를 연결합니다. </li><li> 데이터 분석 소프트웨어 창에서 입력이 플로우 프로브를 제로로 증폭 선택. 단위를 조정합니다. </li><li> &quot;테스트 채널&quot;신호를 수집하기 위해 버튼을 누르면 : 신호가 3-4 막대가있는 경우,이 신호가 좋은 것을 의미한다. 좋은 신호를 얻는 경우에, 절차는 계속 될 수있다. </li><li> 값이 교정되었는지의 여부를 &quot;제로 채널&quot;및 규모의 채널을보고 버튼을 누릅니다. </li><li> 나중에 측정 용 &quot;측정 채널&quot;에있는 버튼을 누릅니다. </li></ol> 2 수술을 위해 마우스를 준비합니다 <ol><li> 유도 챔버에 마우스를 넣고 2 % 이소 플루 란으로 마취하고 마우스0.3 ㎖ / 분의 산소. 마우스의 발가락 핀치 금단 휘어진이 존재하지 않는 경우는 연산이 수행 될 수있다. </li><li> 왼쪽 목과 복부를 포함 외과 영역의 털을 면도. </li><li> 작업 테이블에 마우스를 놓고 테이프를 사용하여 고정한다. 작업 기간 동안 건조를 방지하기 위해 눈에 수의사 연고를 사용합니다. </li><li> 목의 동작 필드의 최적의 노출을 목 아래에 거즈 쿠션을 배치합니다. </li><li> 작업 필드를 소독 만 열어 수술 부위를 떠나 마우스를 충당하기 위해 멸균 거즈를 배치합니다. </li></ol> 3 바이탈 파라미터 측정 <ol><li> 피하 마우스의 발에 ECG 바늘을 삽입합니다. </li><li> 마우스의 뒷면에서 호흡 센서를 놓습니다. </li><li> 마우스의 직장에 온도 프로브를 놓습니다. </li><li> 기록 온도, ECG 및 데이터 분석 소프트웨어에 마우스 호흡. </li></ol> S에 대한 4 목 운영ystemic 심장 혈관 모니터링 4.1) 선박 해부 <ol><li> 목의 중간 라인, 쇄골의 중간 점, 하악의 각도를 확인합니다. </li><li> 중간 라인의 왼쪽에 0.5cm 정도입니다 쇄골의 중간 지점에 하악의 각도에서 2cm 세로 절개를합니다. </li><li> , 악하선을 해부 뒤집 식염수 적신 거즈로 덮어. </li><li> , 경정맥을 확인을 해부하고 나중에 결찰 및 고정 용 정맥에서 세 6-0 실크 봉합사를 배치합니다. </li><li> , 목 빗근 근육을 확인 digastric 근육의 omohyoid 후방 배의 우수한 배에서 분리하고, 경동맥 쉽게 노출 트랙터로 당깁니다. </li><li> 경동맥을 해부하고 나중에 결찰 및 고정 용 동맥에서 세 6-0 실크 봉합사를 배치합니다. </li></ol> 4.2) 경동맥 혈류 측정 <ol><li> 천음속 배치, 경동맥 주위 프로빙 안정을 유지하고, 초음파 겔 또는 식염수를 사용하여 접촉을 최적화. </li><li> 데이터 분석 소프트웨어를 사용 천음속 장치의 작은 스크린에 표시된 바와 경동맥 기록 혈류 속도 </li><li> 측정을 마친 후 프로브를 제거 </li></ol> 4.3) 경동맥 압력 측정 (CAP) <ol><li> 경동맥을 결찰 말단부 및 근위 단부 클램프. </li><li> 경동맥 주변이 고정 봉합을 놓습니다. 숙박 봉합에 10-0 prolene을 사용합니다. </li><li> 선박의 앞쪽 벽에 작은 절개를합니다. </li><li> 밀라 카테터를 삽입하고 사전 배치 봉합사로 고정한다. </li><li> 데이터 분석 소프트웨어의 CAP를 기록합니다. </li></ol> 4.4) 경정맥 혈류 측정 <ol><li> 경정맥 리프트 및 유량을 측정하는 유량 천음속 프로브를 배치했다. </li><li> 데이터 분석 소프트웨어의 유량을 기록한다. </li></ol> 4.5) 중심 정맥 압력 측정 (CVP) <ol><li> 경정맥의 근위 단부 클램프와 선단부를 결찰. </li><li> 선박의 앞쪽 벽에 microscissors를 사용하여 작은 절개를 잘라. </li><li> 유체 가득한 카테터를 삽입하고 사전 배치 봉합 라인을 수정합니다. </li><li> 데이터 분석 소프트웨어의 CVP를 기록합니다. </li></ol> 간 혈류 역학의 취득을위한 5 복부 운영 5.1) 선박 식별 <ol><li> 복부에 횡 절개를합니다. </li><li> 왼쪽으로 장을 Eventerate 젖은 거즈 커버. </li><li> 하대 정맥, 문맥, 간동맥 적절한 간동맥을 확인합니다. </li><li> 전체 모니터링 절차를 수행하는 동안 복부와 장마다 5 분의 표면에 약간의 따뜻한 식염수를 삭제합니다. </li></ol> 포털 혈류 5.2) 측정 <ol><li> 문맥을 해부하다. </li><li> 플로우 프로브를 배치 할 때 용기의 승강을 용이하게하기 위해 문맥 하에서 6-0 실크를 배치했다. </li><li> 문맥 주위 천음속 유동 탐침을 놓고 그 혈류 속도를 측정한다. </li><li> 문맥의 혈류 속도를 기록한다. </li></ol> 일반적인 간동맥의 흐름 5.3) 측정 <ol><li> 조심스럽게 간동맥을 해부하다. </li><li> 선박의 해제를 용이하게하기 위해 혈관 주위에 한 6-0 실크 봉합사를 놓습니다. </li><li> 동맥 주위의 흐름 프로브를 놓습니다. </li><li> 그것의 혈류량을 측정하고 데이터를 획득. </li></ol> 문맥 압력 5.4) 측정 (PVP) <ol><li> 바로 포털 정맥에 배수 몇 가지 측면 분기 장간막 정맥의 한 지점을 선택합니다. </li><li> 선택된 장간막 정맥의 선단부를 결찰. 결찰이 장 관에 가까운 있는지 확인합니다. 작은 가지를 결찰 </li><li> 이 F를 배치정맥 주위에 6-0 prolene을을 사용하여 봉합을 ixing. 이 절차의 핵심은 혈관을 결찰 할 때 장간막 동맥에 손이 닿지 않도록하는 것입니다. </li><li> 문맥의 근위 단부 클램프. </li><li> 10-0 prolene을을 사용하여이 숙박 봉합을 놓습니다. 숙박 봉합이 잘 장간막 정맥의 혈관 벽을 통과해야하기 때문에 약간의 출혈이 발생합니다. </li><li> 45도 각도로 비스듬하게 microscissor를 사용하여 정맥에 작은 절개를합니다. </li><li> 포털 정맥에 장간막 정맥을 통해 밀라 카테터를 삽입하고 그것을 해결 </li><li> 간문맥의 압력을 기록한다. 프로 시저의 끝에서, 마취 하에서 일어난 과다 출혈로 생쥐를 희생. </li></ol>

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저자는 그들이 더 경쟁 금전적 이해 관계가 없다고 선언합니다.

간 혈류 역학의 모니터링은 간 장학 및 간담도 수술에서 중요한 연구 도구입니다. 간 혈역학 데이터 취득 순환계에 간담 절차의 효과를 특성화하는 데 도움. 혈관 활성 약물을 평가하는 연구에서 필요에 따라 간 혈역학 데이터의 수집은, 예를 들면 포털 압력과 포털 흐름에 영향을 미치는 약물의 효과를 연구 할 필요가있다. 작은 크기에도 불구하고, 전신 중요한 매개 ...

이 동영상의 전반적인 목적은 전신 및 간 혈역학 파라미터를 획득하기위한 실시간 모니터링 절차를 입증하는 것이었다. 이 절차를 개발하기위한 이론적 근거는 체계적이고 간 혈류 역학적 매개 변수를 얻는 필요로 쥐 실험 개입에 대한 가장 큰 값입니다. 절차는 부분 간 절제술, 포털 정맥 결찰 및 간 이식으로, 순진한 동물과 중 또는 주어진 간담 담도 실험적인 수술 적 치료 후 적용 할 수 있습니다. 설치류 간 혈역학 데이터의 수집은 제안 침략 절차가 필요합니다. 간 관류 비 침습적으로 얻을 수 없다. 그러나, 전신 혈압의 획득을위한 대안이있다. 이러한 꼬리 커프 기법 8로서 모니터링 기술은 래트 및 마우스 모두에서 혈압을 획득에 이용되어왔다. 꼬리 커프 기술은 consci에 적용 할 수 있습니다OU에 동물. 혈압을 측정 할 때, 동물은 특정 불편한 위치에 배치되어 고정 될 필요가있다. 꼬리 즉석 기기의 사용 설명서에서, 제조자는 마우스 긴장되고 꼬리의 순환을 감소 할 수있는 스트레스를 수 있다는 것을 말한다. 그 상황에서, 꼬리에서 취득한 말초 혈압 중앙 혈압보다 훨씬 낮을 수있다. 전체 모니터링 절차는 데이터 수집을위한 일련의 센서를 이용하여 통합 된 다중 - 채널 모니터를 수행 하였다. 혈압 현미경 조심 미세 해부 및 노출 후 각 용기 내에 카테터를 삽입하여 얻었다. 유량은 각 용기 주위 천음속 유동 탐침을 배치하여 측정 하였다. 우리는 이미 자장에 비교 생리 학적 혈역학 데이터의 포괄적 인 일련의 결과로 쥐를 위해 유사한 수술 모니터링 절차를보고다른 그룹 7에서보고 된 전자 데이터입니다. 따라서 우리는 마우스, 쥐보다 작은 10 배 종에 적응하기위한 좋은 기초를 표현하기 위해이 절차를 고려했다. 쥐 절차 주요 차이점은 혈압 데이터 대신에 유체 도관 기반 시스템을 취득 밀라 카테터의 사용이다. 데이터 흐름은 또한 천음속 유동 프로브 대응 쥐 혈관보다 단지 더 작은 것들로 획득 하였다. 때문에 동물의 작은 크기로, 마우스의 계측 기술적 도전하지만 가능하다. 계측이 완료되면 미리 정의 된 설정 파일이 사용될 수 있기 때문에, 데이터 수집 및 기본 수명 데이터의 분석은 간단하다. 설정 파일은 일련의 실험의 시작시에 한 번만 정의 될 저장 및 모든 후속 실험에 사용될 수있다. 지금까지 우리는 급성 실험에서 간 혈류 역학적 효과를 평가하기 위해이 절차를 적용했다. 우리는 CA를 측정P와 PVP 전에 즉시 70 % 부분 간 절제술 (PH) 후 및 / 드 클램핑 실험을 클램핑한다. 우리는 간 질량의 완전히 90 %를 나타내는 질량 중간의 개요 (5 분) 클램핑과 왼쪽 측면 엽 다음에 간 20 %를 나타내는 우엽의 간담 - 십이지장 인대를 고정. 드 - 클램핑은 중간과 왼쪽 측면 로브를 해제 한 다음 오른쪽 엽에서 클램프를 해제와 함께 시작했다. 클램핑 최대 시간은 10 분 미만이었다.

<table><tbody><tr><td>PowerLab 16/30&amp;nbsp;</td><td>ADInstruments</td><td>PL3516</td><td></td></tr><tr><td>Quad Bridge Amp</td><td>ADInstruments</td><td>FE224</td><td>Bridge amplifier&amp;nbsp;</td></tr><tr><td>Animal Bio Amp</td><td>ADInstruments</td><td>FE136</td><td></td></tr><tr><td>Needle Electrodes for FE136 (3 pk)</td><td>ADInstruments</td><td>MLA1213</td><td></td></tr><tr><td>Perivascular Flowmeter Module</td><td>Transonic</td><td>TS420</td><td></td></tr><tr><td>Flowprobe MA0.5PSB/MA1PSB</td><td>Transonic</td><td>MA0.5PSB/MA1PSB</td><td></td></tr><tr><td>SPR-1000 Mouse Pressure Catheter</td><td>Millar instruments</td><td>841-0001</td><td></td></tr><tr><td>fluid filled catheter&amp;nbsp;</td><td>Terumo</td><td>SR+DU2619PX</td><td>26G, 0.64&amp;times;19mm</td></tr><tr><td>micro scissors</td><td>F&amp;middot;S&amp;middot;L</td><td>No. 14058-09</td><td></td></tr><tr><td>micro serrefine</td><td>F&amp;middot;S&amp;middot;L</td><td>No.18055-05</td><td></td></tr><tr><td>Micro clamps applicator</td><td>F&amp;middot;S&amp;middot;L</td><td>No. 18057-14</td><td></td></tr><tr><td>Straight micro forceps</td><td>F&amp;middot;S&amp;middot;L</td><td>No. 00632-11</td><td></td></tr><tr><td>Curved micro forceps</td><td>F&amp;middot;S&amp;middot;L</td><td>No. 00649-11</td><td></td></tr><tr><td>needle-holder</td><td>F&amp;middot;S&amp;middot;L</td><td>No. 12061-01</td><td></td></tr><tr><td>6-0 silk</td><td>ethicon</td><td></td><td></td></tr><tr><td>6-0 prolene</td><td>ethicon</td><td></td><td></td></tr><tr><td>7-0 prolene</td><td>ethicon</td><td></td><td></td></tr><tr><td>10-0 prolene</td><td>ethicon</td><td></td><td></td></tr><tr><td>Tail cut-off device&amp;nbsp;</td><td>Kent Scientific</td><td></td><td>www.kentscientific.com</td></tr><tr><td>LabChart7</td><td>ADInstruments</td><td></td><td>data&amp;nbsp; analysis software&amp;nbsp;</td></tr></tbody></table>

monitoring of systemic and hepatic hemodynamic parameters in mice

실험적 연구의 마우스 모델의 사용은 생리학 및 병리학 적 간 장해에 대한 막대한 연구 중요하다. 그러나, 마우스의 작은 크기로, 마우스에 적합한 수술 모니터링 절차의 기술적 상세 설명은 거의 없었다. 이전에 우리는 쥐에 대한 혈역학 적 매개 변수를 얻을 수있는 모니터링 절차를보고있다. 이제, 우리는 생쥐에서 체계적이고 간 혈역학 적 파라미터를 획득하는 절차, 쥐보다 작은 열이 배 종 적응. 이 필름은 동물의 계측뿐만 아니라 마우스에서 전신성 및 간 혈류 역학을 평가하는 데 필요한 데이터 수집 프로세스를 설명한다. 체온, 호흡과 심장 박동을 포함하여 중요한 매개 변수는 전체 과정에 걸쳐 기록되었다. 전신 혈역학은 경동맥 동맥 압력 (CAP) 및 중심 정맥압 (CVP)로 구성되어 있습니다. 간 관류 매개 포털 V를 포함EIN 압력 (PVP), 포털 유량뿐만 아니라 간동맥 (표 1)의 유량. 계측 및 데이터 수집은 일반 값은 1.5 시간 이내에 완료되었다 기록합니다. 전신 및 간 혈역학이 절차를 수행하는 동안 정상 범위 내에서 유지했다. 이 절차는 도전 만 가능하다. 우리는 이미 실험을 클램핑 정상 마우스뿐만 아니라 70 % 부분 간 절제술시 간 엽에서 간 혈류 역학을 평가하기 위해이 절차를 적용했습니다. 절제 (N = 20), 절제 (6.87 ± 2.39 CMH 2 O) 이전보다 유의하게 높았다 CMH이 O (P &lt;0.05) 11.41 ± 2.94 후 PVP를 의미한다. 실험 클램핑 간 로브의 결과는이 모니터링 절차는 포털 압력과 포털 유량의 작은 변화를 검출하기위한 민감하고 적합한 것으로 나타났다. 결론적으로,이 절차는 숙련 된 마이크로 외과 의사의 손에 신뢰할 수 있지만 특급으로 제한해야eriments 마우스는 절대적으로 어디 필요합니다.

이러한 호흡과 심장 박동으로 마우스의 중요한 매개 변수는 분명히 쥐보다 훨씬 더 높다. 평균 전신 혈압과 경정맥 압력은 쥐 값과 유사한 인간 데이터에도 유사하다. 간 혈류 역학 데이터는 분명히 다르다. 우리는 8 생쥐에서 정상 값을 얻을. 정상 마우스에서 포털 혈류는 1.6-2.3 ㎖ / 분 사이이었다. 간동맥에 흐름은 0.10에서 0.35 ㎖ / 분였다. 정상 동물 간문맥 압력은 8.09 ± 2.4...

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Monitoring of Systemic and Hepatic Hemodynamic Parameters in Mice

이 영화는 생쥐의 조직 및 간 혈류 역학을 취득하는 방법을 보여줍니다. 전체의 모니터링은 중요한 파라미터, 전신 혈압, 중심 정맥압, 간동맥 유량 및 포털 정맥 압력뿐만 아니라 마우스에서 포털 유량의 획득을 포함한다.

마우스의 전신과 간장 혈 역동 학적 파라미터의 모니터링

The use of mouse models in experimental research is of enormous importance for the study of hepatic physiology and pathophysiological disturbances. ...

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16.0K 조회수.  Jena University Hospital.  이 영화는 생쥐의 조직 및 간 혈류 역학을 취득하는 방법을 보여줍니다. 전체의 모니터링은 중요한 파라미터, 전신 혈압, 중심 정맥압, 간동맥 유량 및 포털 정맥 압력뿐만 아니라 마우스에서 포털 유량의 획득을 포함한다. 

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Transthoracic Echocardiography in Mice

In recent years, murine models have become the primary avenue for studying the molecular mechanisms of cardiac dysfunction resulting from changes in gene expression. Transgenic and gene targeting methods can be used to generate mice with altered cardiac size and function,1-3 and as a result, in vivo techniques are needed to evaluate their cardiac phenotype. Transthoracic echocardiography, pulse wave Doppler (PWD), and tissue Doppler imaging (TDI) can be used to provide dimensional measurements of the mouse heart and to quantify the degree of cardiac systolic and diastolic performance. Two-dimensional imaging is used to detect abnormal anatomy or movements of the left ventricle, whereas M-mode echo is used for quantification of cardiac dimensions and contractility.4,5 In addition, PWD is used to quantify localized velocity of turbulent flow,6 whereas TDI is used to measure the velocity of myocardial motion.7 Thus, transthoracic echocardiography offers a comprehensive method for the noninvasive evaluation of cardiac function in mice.

Transthoracic echocardiography offers a noninvasive method for the evaluation of cardiac function in mice. A combination of ultrasound and Doppler imaging modalities can be used to obtain dimensional measurements of the heart and intracardiac blood flow, which together provide an assessment of cardiac systolic and diastolic performance.

마우스에 Transthoracic Echocardiography

In recent years, murine models have become the primary avenue for studying the molecular mechanisms of cardiac dysfunction resulting from changes in gene ...

연구

의학

Long Term Intravital Multiphoton Microscopy Imaging of Immune Cells in Healthy and Diseased Liver Using CXCR6.Gfp Reporter Mice

Liver inflammation as a response to injury is a highly dynamic process involving the infiltration of distinct subtypes of leukocytes including monocytes, neutrophils, T cell subsets, B cells, natural killer (NK) and NKT cells. Intravital microscopy of the liver for monitoring immune cell migration is particularly challenging due to the high requirements regarding sample preparation and fixation, optical resolution and long-term animal survival. Yet, the dynamics of inflammatory processes as well as cellular interaction studies could provide critical information to better understand the initiation, progression and regression of inflammatory liver disease. Therefore, a highly sensitive and reliable method was established to study migration and cell-cell-interactions of different immune cells in mouse liver over long periods (about 6 hr) by intravital two-photon laser scanning microscopy (TPLSM) in combination with intensive care monitoring.
The method provided includes a gentle preparation and stable fixation of the liver with minimal perturbation of the organ; long term intravital imaging using multicolor multiphoton microscopy with virtually no photobleaching or phototoxic effects over a time period of up to 6 hr, allowing tracking of specific leukocyte subsets; and stable imaging conditions due to extensive monitoring of mouse vital parameters and stabilization of circulation, temperature and gas exchange.
To investigate lymphocyte migration upon liver inflammation CXCR6.gfp knock-in mice were subjected to intravital liver imaging under baseline conditions and after acute and chronic liver damage induced by intraperitoneal injection(s) of carbon tetrachloride (CCl4).
CXCR6 is a chemokine receptor expressed on lymphocytes, mainly on Natural Killer T (NKT)-, Natural Killer (NK)- and subsets of T lymphocytes such as CD4 T cells but also mucosal associated invariant (MAIT) T cells1. Following the migratory pattern and positioning of CXCR6.gfp+ immune cells allowed a detailed insight into their altered behavior upon liver injury and therefore their potential involvement in disease progression.

Stable intravital high-resolution imaging of immune cells in the liver is challenging. Here we provide a highly sensitive and reliable method to study migration and cell-cell-interactions of immune cells in mouse liver over long periods (about 6 hours) by intravital multiphoton laser scanning microscopy in combination with intensive care monitoring.

CXCR6.Gfp 기자 마우스를 사용하여 건강하고 병에 걸린 간에서 면역 세포의 장기 생체 내에 다중 광자 현미경 이미징

Liver inflammation as a response to injury is a highly dynamic process involving the infiltration of distinct subtypes of leukocytes including monocytes, ...

면역학 및 감염병학

Long-term Blood Pressure Measurement in Freely Moving Mice Using Telemetry

During the development of new vasoactive agents, arterial blood pressure monitoring is crucial for evaluating the efficacy of the new proposed drugs. Indeed, research focusing on the discovery of new potential therapeutic targets using genetically altered mice requires a reliable, long-term assessment of the systemic arterial pressure variation. Currently, the gold standard for obtaining long-term measurements of blood pressure in ambulatory mice uses implantable radio-transmitters, which require&#160;artery cannulation. This technique eliminates the need for tethering, restraining, or anesthetizing the animals which introduce stress and artifacts during data sampling. However, arterial blood pressure monitoring in mice via catheterization can be rather challenging due to the small size of the arteries. Here we present a step-by-step guide to illustrate the crucial key passages for a successful subcutaneous implantation of radio-transmitters and carotid artery cannulation in mice. We also include examples of long-term blood pressure activity taken from freely moving mice after a period of post-surgery recovery. Following this procedure will allow reliable direct blood pressure recordings from multiple animals simultaneously.

The goal of this protocol is to assess systemic blood pressure in conscious freely moving mice using implantable radio-telemetry devices.

텔레 메 트리를 사용하여 자유롭게 이동 마우스의 장기 혈압 측정

During the development of new vasoactive agents, arterial blood pressure monitoring is crucial for evaluating the efficacy of the new proposed drugs. ...

Novel Approach for Simultaneous Recording of Renal Sympathetic Nerve Activity and Blood Pressure with Intravenous Infusion in Conscious, Unrestrained Mice.

Renal sympathetic nerves contribute significantly to both physiological and pathophysiological phenomena. Evaluating renal sympathetic nerve activity (RSNA) is of great interest in many areas of research such as chronic kidney disease, hypertension, heart failure, diabetes and obesity. Unequivocal assessment of the role of the sympathetic nervous system is thus imperative for proper interpretation of experimental results and understanding of disease processes. RSNA has been traditionally measured in anesthetized rodents, including mice. However, mice usually exhibit very low systemic blood pressure and hemodynamic instability for several hours during anesthesia and surgery. Meaningful interpretation of RSNA is confounded by this non-physiological state, given the intimate relationship between sympathetic nervous tone and cardiovascular status. To address this limitation of traditional approaches, we developed a new method for measuring RSNA in conscious, freely-moving mice. Mice were chronically instrumented with radio-telemeters for continuous monitoring of blood pressure as well as a jugular venous infusion catheter and custom-designed bipolar electrode for direct recording of RSNA. Following a 48-72 hour recovery period, survival rate was 100% and all mice behaved normally. At this time-point, RSNA was successfully recorded in 80% of mice, with viable signals acquired up to 4 and 5 days post-surgery in 70% and 50% of mice, respectively. Physiological blood pressures were recorded in all mice (116&plusmn;2 mmHg; n=10). Recorded RSNA increased with eating and grooming, as well-established in the literature. Furthermore, RSNA was validated by ganglionic blockade and modulation of blood pressure with pharmacological agents. Herein, an effective and manageable method for clear recording of RSNA in conscious, freely-moving mice is described.

Anesthetized mice exhibit non-physiological systemic blood pressure, which precludes meaningful assessment of autonomic tone given the intimate relationship between blood pressure and the autonomic nervous system. Thus, a novel method to simultaneously record renal sympathetic nerve activity and blood pressure with intravenous infusion in conscious mice is outlined.

신장 동 정적인 신경 활동의 의식, 정 맥 주입 혈압 동시 녹음에 대 한 새로운 접근 방식을 억제 쥐.

Renal sympathetic nerves contribute significantly to both physiological and pathophysiological phenomena. Evaluating renal sympathetic nerve activity ...

Uncontrolled Hemorrhagic Shock Modeled via Liver Laceration in Mice with Real Time Hemodynamic Monitoring

Uncontrolled hemorrhage is an important cause of preventable deaths among trauma patients. We have developed a murine model of uncontrolled hemorrhage via a liver laceration that results in consistent blood loss, hemodynamic alterations, and survival.
Mice undergo a standardized resection of the left-middle lobe of the liver. They are allowed to bleed without mechanical intervention. Hemostatic agents can be administered as pre-treatment or rescue therapy depending on the interest of the investigator. During the time of hemorrhage, real-time hemodynamic monitoring via a left femoral arterial line is performed. Mice are then sacrificed, blood loss is quantified, blood is collected for further analysis, and organs are harvested for analysis of injury. Experimental design is described to allow for simultaneous testing of multiple animals.
Liver hemorrhage as a model of uncontrolled hemorrhage exists in the literature, primarily in rat and porcine models. Some of these models utilize hemodynamic monitoring or quantify blood loss but lack consistency. The present model incorporates quantification of blood loss, real-time hemodynamic monitoring in a murine model that offers the advantage of using transgenic lines and a high-throughput mechanism to further investigate the pathophysiologic mechanisms in uncontrolled hemorrhage.

Uncontrolled hemorrhage, an important cause of mortality among trauma patients, can be modeled using a standard liver laceration in a murine model. This model results in consistent blood loss, survival, and allows for testing hemostatic agents. This article provides the step-by-step process to perform this valuable model.

실시간 혈류 역학 모니터링을 이용한 마우스의 간경화로 모델링 된 통제 할 수없는 출혈성 쇼크

Uncontrolled hemorrhage is an important cause of preventable deaths among trauma patients. We have developed a murine model of uncontrolled hemorrhage via ...

Invasive Hemodynamic Characterization of the Portal-hypertensive Syndrome in Cirrhotic Rats

This is a detailed protocol describing invasive hemodynamic measurements in cirrhotic rats for the characterization of portal hypertensive syndrome. Portal hypertension (PHT) due to cirrhosis is responsible for the most severe complications in patients with liver disease. The full picture of the portal hypertensive syndrome is characterized by increased portal pressure (PP) due to the increased intrahepatic vascular resistance (IHVR), hyperdynamic circulation, and increased splanchnic blood flow. Progressive splanchnic arterial vasodilation and increased cardiac output with elevated heart rate (HR) but low arterial pressure characterizes the portal hypertensive syndrome.
Novel therapies are currently being developed that aim to decrease PP by either targeting IHVR or increased splanchnic blood flow &#8212; but side effects on systemic hemodynamics may occur. Thus, a detailed characterization of portal venous, splanchnic, and systemic hemodynamic parameters, including measurement of PP, portal venous blood flow (PVBF), mesenteric arterial blood flow, mean arterial pressure (MAP), and HR is needed for preclinical evaluation of the efficacy of novel treatments for PHT. Our video article provides the reader with a structured protocol for performing invasive hemodynamic measurements in cirrhotic rats. In particular, we describe the catheterization of the femoral artery and the portal vein via an ileocolic vein and the measurement of portal venous and splanchnic blood flow via perivascular Doppler-ultrasound flow probes. Representative results of different rat models of PHT are shown.

Here we describe a detailed protocol for invasive measurements of hemodynamic parameters including portal pressure, splanchnic blood flow, and systemic hemodynamics in order to characterize the portal hypertensive syndrome in rats.

포털-고혈압 증후군 Cirrhotic 쥐에서의 침입 Hemodynamic 특성화

This is a detailed protocol describing invasive hemodynamic measurements in cirrhotic rats for the characterization of portal hypertensive syndrome. ...

Echocardiographic Measurement of Right Ventricular Diastolic Parameters in Mouse

Diastolic dysfunction is a prominent feature of right ventricular (RV) remodeling associated with conditions of pressure overload. However, the RV diastolic function is rarely quantified in experimental studies. This might be due to technical difficulties in the visualization of the RV in the apical four-chamber view in rodents. Here we describe two positions facilitating the visualization of the apical four-chamber view in mice to assess the RV diastolic function.
The apical four-chamber view is enabled by tilting the mouse fixation platform to the left and caudally (LeCa) or to the right and cranially (RiCr). Both positions provide images of comparable quality. The results of the RV diastolic function obtained from two positions are not significantly different. Both positions are comparably easy to perform. This protocol can be incorporated into published protocols and enables detailed investigations of the RV function.

Here we describe and compare two positions for obtaining the apical four-chamber view in mice. These positions enable the quantification of the right ventricular function, provide comparable results, and can be used interchangeably.

마우스의 우심실 확장기 매개변수의 심초음파 측정

Diastolic dysfunction is a prominent feature of right ventricular (RV) remodeling associated with conditions of pressure overload. However, the RV ...

Invasive Hemodynamic Assessment for the Right Ventricular System and Hypoxia-Induced Pulmonary Arterial Hypertension in Mice

Pulmonary arterial hypertension (PAH) is a chronic and severe cardiopulmonary disorder. Mice are a popular animal model used to mimic this disease. However, the evaluation of right ventricular pressure (RVP) and pulmonary artery pressure (PAP) remains technically challenging in mice. RVP and PAP are more difficult to measure than left ventricular pressure because of the anatomical differences between the left and right heart systems. In this paper, we describe a stable right heart hemodynamic measurement method and its validation using healthy and PAH mice. This method is based on open-chest surgery and mechanical ventilation support. It is a complicated procedure compared to closed chest procedures. While a well-trained surgeon is required for this surgery, the advantage of this procedure is that it can generate both RVP and PAP parameters at the same time, so it is a preferable procedure for the evaluation of PAH models.

Here, we present a protocol to perform an invasive hemodynamic assessment of the right ventricle and pulmonary artery in mice using an open-chest surgery approach.

마우스에 있는 우심실 시스템 및 저산소증 유도된 폐 동맥 고혈압을 위한 침략적인 혈역학 평가

Pulmonary arterial hypertension (PAH) is a chronic and severe cardiopulmonary disorder. Mice are a popular animal model used to mimic this disease. ...

DDREADDs 기술 및 자동 혈액 샘플링

Remote Neuronal Activation Coupled with Automated Blood Sampling to Induce and Measure Circulating Luteinizing Hormone in Mice

Circulating luteinizing hormone (LH) levels are an essential index of the functioning of the hypothalamic-pituitary control of reproduction. The role of numerous inputs and neuronal populations in the modulation of LH release is still unknown. Measuring changes in LH levels in mice is often a challenge since they are easily disrupted by environmental stress. Current techniques to measure LH release and pulsatility require long-term training for mice to adapt to manipulation stress, certain restraint, the presence of the investigator, and working on individual animals, reducing its usefulness for many research questions.
This paper presents a technique to remotely activate specific neuronal populations using Designer Receptor Exclusively Activated by Designer Drugs (DREADDs) technology coupled with automated sequential blood sampling in conscious, freely moving, and undisturbed mice. We first describe the stereotaxic surgery protocol to deliver adeno-associated virus (AAV) vectors expressing DREADDs to specific neuronal populations. Next, we describe the protocol for carotid artery and jugular vein cannulation and postsurgical connection to the CULEX automated blood sampling system. Finally, we describe the protocol for clozapine-N-oxide intravenous injection for remote neuronal activation and automated blood collection. This technique allows for programmed automated sampling every 5 min or longer for a given period, coupled with intravenous substance injection at a desired time point or duration. Overall, we found this technique to be a powerful approach for research on neuroendocrine control.

저자 스포트라이트: 의식이 있는 마우스의 정확한 호르몬 분석을 위한 자동 주입 및 혈액 샘플링

Luteinizing hormone (LH) pulsatility is a hallmark of reproductive function. We describe a protocol for remote activation of specific neuronal populations linked to serial automated blood collection. This technique allows timed hormonal modulation, multiplexing, and minimizing manipulation effects on LH levels in conscious freely moving, and undisturbed animals.

생쥐의 순환 황체 형성 호르몬을 유도하고 측정하기 위한 자동 혈액 샘플링과 결합된 원격 신경 세포 활성화

Circulating luteinizing hormone (LH) levels are an essential index of the functioning of the hypothalamic-pituitary control of reproduction. The role of ...

마우스의 전신과 간장 혈 역동 학적 파라미터의 모니터링

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마우스에 Transthoracic Echocardiography

CXCR6.Gfp 기자 마우스를 사용하여 건강하고 병에 걸린 간에서 면역 세포의 장기 생체 내에 다중 광자 현미경 이미징

텔레 메 트리를 사용하여 자유롭게 이동 마우스의 장기 혈압 측정

신장 동 정적인 신경 활동의 의식, 정 맥 주입 혈압 동시 녹음에 대 한 새로운 접근 방식을 억제 쥐.

실시간 혈류 역학 모니터링을 이용한 마우스의 간경화로 모델링 된 통제 할 수없는 출혈성 쇼크

포털-고혈압 증후군 Cirrhotic 쥐에서의 침입 Hemodynamic 특성화

마우스의 우심실 확장기 매개변수의 심초음파 측정

마우스에 있는 우심실 시스템 및 저산소증 유도된 폐 동맥 고혈압을 위한 침략적인 혈역학 평가

생쥐의 순환 황체 형성 호르몬을 유도하고 측정하기 위한 자동 혈액 샘플링과 결합된 원격 신경 세포 활성화

생쥐의 순환 황체 형성 호르몬을 유도하고 측정하기 위한 자동 혈액 샘플링과 결합된 원격 신경 세포 활성화