著者
お問い合わせ

サインイン

このコンテンツを視聴するには、JoVE 購読が必要です。 サインイン又は無料トライアルを申し込む。

この記事について

  • 要約
  • 要約
  • 概要
  • プロトコル
  • 代表的な結果
  • ディスカッション
  • 開示事項
  • 謝辞
  • 資料
  • 参考文献
  • 転載および許可

要約

閉経後の骨粗鬆症は、世界的な公衆衛生問題となっています。この研究の目的は、この状態に対する伝統的な漢方薬 Xiaoyao 錠剤の治療効果と関連メカニズムを調査することです。

要約

骨粗鬆症は、高齢者や閉経後の女性によく見られる代謝性疾患で、初期段階では明らかな症状はありません。この状態の後期では、患者は骨折しやすく、これは彼らの健康と生活の質に深刻な影響を与える可能性があります。平均寿命の世界的な増加により、骨粗鬆症は世界的な懸念事項となっています。Xiaoyaoの丸薬は以前、
うつ病の治療に使用されます。さらに、この薬剤はエストロゲン様活性を有すると考えられ、初期の骨芽細胞特異的マーカーであるALPと骨細胞外マトリックスの主成分であるCOL-1の発現に影響を与えました。Xiaoyaoピルは、マウスの閉経後骨粗鬆症(PMOM)への影響について評価されました。.Xiaoyao錠剤の各ハーブ成分のターゲット情報は、Traditional Chinese Medicine Systems Pharmacology(TCMSP)データベースを通じてアクセスされました。GeneCards、OMIM、PharmGkb、TTD、DrugBankなどのウェブサイトからの情報を使用して、CytoscapeおよびStringネットワークを通じてハーブ複合体の制御ネットワークを構築し、タンパク質相互作用を評価しました。マウスを卵巣摘出し、高用量と低用量のXiaoyao錠剤で治療し、これらを対照と比較しました。彼らの症状は、骨組織の免疫細胞化学によって評価されました。その結果、Xiaoyaoピルは、IL-17シグナル伝達経路を通じて卵巣摘出マウスのPMOMの症状を緩和する能力があることが示唆されました。この薬剤は、骨粗鬆症の治療のための新しい治療薬になる可能性を秘めています。

概要

世界保健機関(WHO)は、骨粗鬆症(OP)を骨量の減少と骨組織の微細構造の悪化を特徴とする疾患と定義しており、骨の脆性が増大し、骨折リスクが増加します1。骨粗鬆症の臨床的意義は、骨折を引き起こす可能性があることであり、これは高い死亡率、罹患率、および経済的コストに関連しています2。閉経後骨粗鬆症(PMOP)は、閉経後の女性のエストロゲンレベルの低下によって引き起こされ、破骨細胞の活性が増加し、骨量の減少と骨の微細構造の破壊をもたらします。これはしばしば骨粗鬆症を引き起こし、健康に深刻な影響を及ぼします3。PMOP の現在の治療法には、エストロゲン補充療法、ビスフォスフォネート、副甲状腺ホルモンなどがありますが、さまざまな程度の副作用、不十分な長期コンプライアンス、および高コストが発生する可能性があります4。したがって、手頃な価格の漢方薬は、人口の大部分にとって実行可能な代替手段です。

Xiaoyaoの丸薬は中国の薬局方5に含まれており、これらはChai Hu、 Angelica sinensis、 White paeonia lactiflora、 Atractylodes macrocephal....

プロトコル

Youjiang Medical University for Nationalitiesの実験動物倫理委員会は、研究プロトコルを承認しました(承認番号:2022101502)。雌のC57BL/6マウス、10-12週齢、SPFクラスおよび体重(22 ± 2)gを、Youjiang Medical University for NationalitiesのSPFクラス動物実験センターに収容しました。実験動物は、温度24〜26°C、相対湿度55〜60%に維持されました。

1. 伝統的な漢方薬システム薬理学データベースと分析プラットフォーム

注:Traditional Chinese Medicine Systems Pharmacology Database and Analysis Platform(TCMSP;https://old.tcmsp-e.com/tcmsp.php)は、TCM成分、ADME関連の特性、標的、および疾患に関する情報を含む漢方薬理学プラットフォームです16,17。

  1. TCMSP Web インターフェイスにアクセスします。ハーブの名前を検索し、漢方薬の名前を入力して、[ 検索]をクリックします。検索....

代表的な結果

Xiaoyaoの丸薬の有効成分と作用のターゲット
TCMSPデータベースを検索し、経口バイオアベイラビリティ(OB)≥30%、薬物様特性(DL)≥0.18の基準に従ってスクリーニングを行ったところ、Xiaoyaoの錠剤に125の有効成分が存在することがわかりました。その中で、成分6、4、9、13、2、6、83、および2は、それぞれWhite Paeonia lactiflora、 Atractylodes macrocephala、 Menthae herba、Chai.......

ディスカッション

統計によると、骨粗鬆症は米国で毎年150万件の骨折を引き起こし、その大部分は閉経後の女性に発生します27。高齢化の進展に伴い、世界の将来の大腿骨股関節骨折の大半はアジアで発生し、2050年には全世界で820万人に達すると予測されています28。骨折を予防する費用は、骨折を治療する費用とほぼ同じであり、薬の使用には必然的に何らかの副作用が?.......

開示事項

著者は、利益相反がないことを宣言します。

謝辞

百瀬市科学研究技術開発プログラム(20224128)は、この作業を支援しました。著者は、原稿の編集に当たっていただいたインペリアル・カレッジ・ロンドンとYMUNのDev Sooranna博士に感謝します。YYXとZYWは、この研究に等しく貢献しました。

....

資料

NameCompanyCatalog NumberComments
1ml SamplerGuangxi Beilunhe Medical Industrial Group Co.JYQ001For anesthesia in mice
4%polyformaldehydeBeijing Solarbio Science & Technology Co.,Ltd.P1110For tissue fixation
6-0 absorbable suture (angled needle)Shanghai Pudong Jinhuan Medical Supplies Co.HZX-06For postoperative suturing
Absorbent cotton ballWinnerMIANQIU-500gFor sterilization and hemostasis
Adhesive slidesJiangsu Shitai Experimental Equipment Co.188105For tissue sectioning
AmobarbitalSigma Aldrich (Shanghai) Trading Co.A-020-1MLFor anesthesia in mice
Bluing SolutionBeijing Solarbio Science & Technology Co.,Ltd.G1866Blue coloration of the nuclei of cells after the action of hematoxylin differentiation solution
C57BL/6 miceBeijing Vital River Laboratory Animal Technology Co., Ltd.(SCXK 2033-0063)For use in animal experiments
Carbon steel surgical bladesPremier Medical Equipment Co.SP239For mouse surgery
CIKS/TRAF3IP2 Rabbit pAbBIOSS ANTIBODIESbs-6202RBinds to Act1 in tissues
Cole's Hematoxylin Solution (For Conventional Stain)Beijing Solarbio Science & Technology Co.,Ltd.G1140For staining paraffin sections
Collagen Type I Polyclonal antibodyproteintech14695-1-APBinds to COL-1 in tissues
DAB Substrate kit,20xBeijing Solarbio Science & Technology Co.,Ltd.DA1010For tissue color development
Disposable surgical sheet 50*60CMNanchang Xuhui Medical Equipment Co.SP4529777For mouse surgery
EDTA decalcification solution (pH 7.2)Beijing Solarbio Science & Technology Co.,Ltd.E1171-500mlFor tissue decalcification
Enhanced Endogenous Peroxidase Bloching BufferBeyotime BiotechnologyP0100BSequestration of tissue or cellular endogenous peroxidases
Environmentally friendly dewaxing clear liquidServicebioG1128-1LFor dewaxing paraffin sections
Ethyl AlcoholCHRON CHEMICALS64-17-5 (CAS)For dehydration of paraffin sections
General Purpose Antibody DiluentEpizyme BiotechPS119LFor antibody dilution
Hematoxylin Differentiation SolutionServicebioG1039-500MLFor differentiation after hematoxylin staining and removal of excessively bound and non-specifically adsorbed dye from tissues
Hematoxylin Eosin (HE) Staining KitBeijing Solarbio Science & Technology Co.,Ltd.G1120-3*100mlFor tissue staining
High quality stainless steel surgical knife handlePremier Medical Equipment Co.SP0088For mouse surgery
HRP-conjugated Affinipure Goat Anti-Rabbit IgG(H+L)proteintechSA00001-2Binds to primary antibody and amplifies signal
IL-17A Polyclonal antibodyproteintech13082-1-APBinds to IL-17 in tissues
IL-6 Polyclonal antibodyproteintech21865-1-APBinds to IL-6 in tissues
Immunohistochemistry penBeijing Zhongshan Jinqiao Biotechnology Co.ZLI-9305 (YA0310)For drawing circles in immunohistochemistry
Medical surgical suture Non-absorbent (ball) 5-0 3.5mYangzhou Yuanlikang Medical Equipment Co.FHX-5-2For postoperative suturing
Medical Suture Needles Angle Needles 4*10 3/8Chaohu Binxiong Medical Equipment Co.FHZ612-4For postoperative suturing
Neutral BalsamBeijing Solarbio Science & Technology Co.,Ltd.G8590As a slice sealer
PBS(1X)Shenzhen Mohong Technology Co.,LtdB0015Buffer for slide washing and partial solution dilution
Protein Free Rapid Blocking Buffer (1X)Epizyme BiotechPS108PAvoiding non-specific binding of proteins
Rabbit Anti-Bone Alkaline Phosphatase antibodyBIOSS ANTIBODIESbs-6292RBinds to alkaline phosphatase in tissues
SalineAffiliated Hospital Youjiang Medical University For NationalitiesLHN500For animals by gavage
Shaving/Electric clippersHANGZHOU HUAYUAN PET PRODUCTS CO., LTD.DTJ-002For shaving mice
Stainless Steel Medical Needle Holder 14cm Coarse NeedlePremier Medical Equipment Co.SP784For mouse surgery
Stainless Steel Ophthalmic Forceps 10.5cm Curved (No Hook)ZhuoyouyueYKNWW-10.5For mouse surgery
Stainless Steel Ophthalmic Scissors/Surgical Scissors 10CM Straight TipPremier Medical Equipment Co.ZYJD-10-ZJFor mouse surgery
Stainless Steel Tip Gastric Needle 12 Gauge 55mm ElbowGWJ-12-55WFor use in mice by gavage
Tris-EDTA Antigen Repair Fluid (50x)proteintechPR30002For antigen repair of paraffin sections
Wooden dissecting board 25*16cmJP16*24For mouse surgery
Xiaoyao pillsJiuzhitang Co.,Ltd.YPG-041For animal drug delivery
Others
R 4.3.1Data processing
Cytoscape3.9.1National Resource for Network BiologyBuilding a regulatory network for traditional Chinese medicine
ImageJ 1.54fNational Institutes of HealthImage processing for immunohistochemistry results
Adobe Photoshop 24.0.0AdobeFor image combination
GraphpadPrism 9.5GraphPad SoftwareStatistical analysis of data
cellsens DimensionOLYMPUSFor slicing and photographing
OLYMPUS BX53OLYMPUSFor HE staining and immunohistochemical section photography

参考文献

  1. Kanis, J. A., Melton, L. J., Christiansen, C., Johnston, C. C., Khaltaev, N. The diagnosis of osteoporosis. J Bone Miner Res. 9 (8), 1137-1141 (1994).
  2. Amin, U., Mcpartland, A., O'sullivan, M., Silke, C. An overview of the management of osteoporos....

転載および許可

このJoVE論文のテキスト又は図を再利用するための許可を申請します

許可を申請

さらに記事を探す

JoVE 210

This article has been published

Video Coming Soon

JoVE Logo

個人情報保護方針

利用規約

一般データ保護規則

お問い合わせ

図書館への推薦

JoVE ニュースレター

研究

教育

著者

図書館員

JoVEについて

Copyright © 2023 MyJoVE Corporation. All rights reserved