我々は、技術支援のためのバージニアドハーティとJunmei八尾に感謝します。この研究は、KAGにNIMH（R01 MH084966）、および米国陸軍研究室と米国防総省の国防高等研究計画庁（グラントW911NF-10-1-0059）によって資金を供給されました。

全ての実験は、成体雄ロングエバンスラットを用いて行きました。すべての手順は、米国国立衛生研究所に応じて、実験動物の管理と使用に関する（NIH）ガイドであり、マサチューセッツ工科大学の施設内動物管理使用委員会との動物管理使用レビュー庁によって承認されましたUSAMRMC。 1.準備<ol><li>ヘパリン（千USP単位/ ml）を含む500μlのチューブでシールド針を配置した後、針を介してヘパリン溶液を吸引して排出することによりHepariniseカテーテルとシリンジ。 <ol><li>シリンジに蝶カテーテルを取り付けます。損傷から鋭い先端を保護するために、カテーテルの針の上にシールドしてください。 </li><li>収集される血液の量よりもわずかに大きいヘパリンの量を撤回。注射器を外し、空気でそれを埋めます。 </li><li>再アタッチカテーテルに注射器を使用し、空気は、過剰なヘパリン溶液を排出します。確実に微量のみ、チューブ、針、シリンジに残ります。 </li><li>滅菌表面に、ついたまま注射器で、滅菌カテーテルを配置します。 </li></ol></li><li>すぐに前足と後足が快適な位置にあり、呼吸が制限されていないことを保証きれいな布でラットを固定します。 <ol><li>フックとループテープでラップを固定し、外性器がくびれていないことを確認してください。 </li><li>優しくアシスタントを持ち、しっかりと尾はカウンターの端にぶら下がっで堅実な仕事の表面上にラット（腹部と尾の付け根）を抑制する。 </li></ol></li></ol> 2.採血<ol><li> 40〜50秒の血管を拡張し、ペーパータオルで尾を乾燥させるために42℃の水に尾を浸し。 （尾をねじる防止するために、尾と体全体を回転させる）から採血する尾静脈の位置を確認します。 注：尾の十分な温暖化が急速collectioのために重要です血液サンプルのN。血管系の狭窄された場合、カテーテルの適切な配置が困難であり、血流が大幅に低減されます。加熱パッドは、水浸漬の代わりに使用することができます。 </li><li>サンプリング点を特定します。 注：動脈は尾の半ば背側面に沿って位置します。サンプリングのためにこれを使用しないでください。 <ol><li>動脈への側方に位置する左右の尾静脈のいずれかをターゲットにしています。菌株によって異なり、年齢とともに増加する尾の色素沈着は、血管系の一部を覆い隠すことができます。尾の下部に静脈の一部を対象としています。 </li><li> 2％クロルヘキシジン消毒液でターゲット領域を拭いてください。 </li></ol></li><li>約50μlにゼロからプランジャーを引き出すことによって、注射器やカテーテル内の負圧を作成します。 </li><li>ストレートサンプル収集を通じて尾を維持するために先端付近優しく、しっかりと尾を持ちます。血流が過度にタイトなグリップによって閉塞されていないことを確認してください。</li><li>ゆっくりと約5cm、尾の先端から浅い角度で静脈にカテーテルを挿入します。静脈が貫通されると、血液がカテーテル内に流れます。ゆっくりと一定の速度（毎秒〜20μL）で所望の体積を収集するために、注射器のプランジャーを撤回。 <ol><li>収集することができる最大の血液量については、獣医のスタッフにご相談ください。収集する必要があります血液の最大量は、ラットの体重と健康状態に依存します。 14日の期間中の総血液量の15％以上を撤回しないでください。 注：血液は急性ストレスホルモンが血管系を収縮するので、コレクションをサンプリングする前に数分で強調された動物から収集するためにはるかに困難です。例えば、動物をラップするのに数分を取って、新規の部屋にラットのホームケージを移動、または静脈にカテーテルの挿入を繰り返し、すべての急性ストレス反応を引き起こす可能性があります。 </li><li> blooを促進「搾乳」静脈からdフロー。尾の先端に向かってベースから、静脈の長さに沿って指を実行しますが、挿入された針やカテーテルの先端から2cm以上が静脈から除去になる可能性が残っています。 </li><li>血液が正常にカテーテルの浸透の最初のサイトから収集することができない場合は、静脈までさらに針を再挿入します。血液は最初のサイトで収集された場合は、切断した後、静脈に先立って再挿入するカテーテルと注射器を再接続することにより、針を再加圧します。一般的には、追加の貫通を避けます。 </li><li>複数の貫通は、尾への血液供給が遮断され、柔らかい尾組織を壊死されるようになる中で、尾静脈の崩壊を引き起こす可能性がありますように尾静脈の崩壊がある場合に、ラットを安楽死させます。 </li></ol></li><li>十分な試料体積が収集されると、切断したカテーテルを再接続することによって、注射器内の圧力を解放します。吸引液がわずかにシリンジプランジャを使用して（〜50＆＃181; L）、および静脈から針を撤回。 注意：針が第1のシリンジ内の圧力を解放することなく撤回された場合、血液が針から滴下します。 </li><li>簡単に説明すると出血を止めるために挿入部位に圧力を適用し、消毒液で拭きます。そのホームケージにラットを返します。 </li></ol> 3.血液サンプルを処理<ol><li>吸引した空気には血液がカテーテル針の内部に残っていないことを確認し、ちょうど針の上にカテーテルチューブをカットするはさみを使用しています。滅菌1.5ミリリットルのマイクロチューブに血液を放出します。 注：血液が針を通して押された場合、剪断力は、多くの下流のアッセイを妨害し得る破裂する赤血球を引き起こす可能性があります。溶血を回避するために、針を外します。 <ol><li>血漿、ここで（抗凝固剤としてEDTAが含まれている血液の200〜400μlの0.1 M EDTA10μlのを使用し、使用チューブを収集するには、使用されるEDTAの濃度は、Wに干渉しないよう下流アッセイ番目）、氷上に置きます。 <ol><li>回収の10分以内に10分間冷却遠心機（4℃）で2,100×gでの全血サンプルをスピン。赤および白血球層を乱す避け、プラズマを溶出します。 </li></ol></li><li>凝固を可能にするために最大30分間、室温で（抗凝固剤を含まない）は、血液、血清、場所のサンプルを収集します。 2,000×gで冷却遠心機（4℃）で回収チューブをスピン。血清は、その後、溶出され得ます。 </li></ol></li><li>使用直ちに試料、または1年まで-80℃で保存。 </li></ol>

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著者らは、開示することは何もありません。

ここでは、他の一般的に使用される技術上の重要な利点がありますラットから血液サンプルを得るための迅速かつ簡単な手順について説明します。まず、頚静脈または眼窩後洞からのサンプリングとは対照的に、麻酔を必要としません。血液サンプルは、行動手順を取り巻く収集された場合には、学習および記憶4,5と干渉することができるので、麻酔薬の投与は望ましくありません。第二に、そのような伏在や背ペダル静脈から収集などの他の静脈穿刺技術、より大きな血液容量を収集する機能を提供しています。血液1.5 mlまでの、ここに記載の技術を使用して、単一の時点でラットから回収することができる、容易に複数のアッセイを並行して実行されることを可能にする量。最後に、この手順では、尾の先端切断または眼窩後出血と比較して、組織の損傷の可能性を最小限に抑えることができます。この手順の使用は、動物Wの遵守を促進します動物で実施される実験方法から生じる痛みや苦痛を最小限に抑える必要が法および実験動物の管理と使用に関する指針は 、elfare。 それは、この方法に新しい研究者は、実験動物が抑制されている時間を最小限に抑えるために拘束し、尾の出血技術を練習することをお勧めします。拘束の開始から3分未満で採取した血液は、最適な結果を提供します。 ここで説明するプロトコルは、週に1〜4回のサンプリングに使用されないが、一日二回よりも多くすることができます。繰り返し血液収集を行うことができるが、尾の基部から上方に移動する別のサンプリング部位を使用する必要があり、左右の尾静脈サンプリング部位として交互にされるべきです。げっ歯類の総血液量は、その体重の6〜7％であり、全血液量の15％以下は、2週間の期間内に収集されるべきではありません。血清または血漿を採取したサンプルの体積の約40〜60％を含みます。 いくつかの小さな変更を加えてここで説明したように外側尾静脈を介して血液採取は、マウスで実行されてもよいです。まず、わずかなゲージ（27 G）カテーテルを使用することができます。第二に、それは、マウスを固定化するために、むしろラップよりも、チューブ拘束具を使用することをお勧めします。顎下維管束（200〜500μL）の静脈穿刺を用いて、マウスから得ることができる血液の量を安全に尾静脈（200μlの最大値）から採取することができるよりも大きいです。顎下維管束からのサンプリング血液が最小限の拘束を必要とし、より多くの血液をもたらす可能性があるため、これは、マウスでのサンプリングのための好ましい経路です。 この手順は、その低侵襲性の性質と共に、実行することができるこれで迅速に、また、急性ストレス反応6によって血液ベース措置の潜在的な摂動を最小限に抑えることができます。ザ急性ストレス反応は、インターロイキンおよび他の免疫活性因子7を含む多くの分子の循環レベル、視床下部-下垂体-副腎軸8のホルモン、交感神経系9、グレリン10、内因性オピオイド11、ドーパミンでホルモンを変えることができ、セロトニン12。これらの分子によって調節されるこれらの分子または他の静止循環対策が望まれる場合には、ストレッサ露光開始の分だけ少なく内でトリガされるストレス応答を最小限にすることが重要です。 ストレス反応は、血液の組成を変化させるだけでなく、交感神経系から増加したドライブを介しているため、血管系の収縮の血液採取のための技術的な障害を表すだけではなく。これは、急性のストレス応答をマウントされたラットからの安定した血流量を得ることが困難になる大きくします。したがって、動物の苦痛はミニムでなければなりません急速に関心のある生理的状態を反映し、サンプルを得るために化さ。

血液から得られたバイオマーカーは有用な診断、予測を提供し、心血管疾患1、がん科学2、および精神疾患3を含む多くの臨床状況において対策を、階層化。また、飢餓、炎症、またはストレスの存在度を含む、生物の「状態」を評価するために基礎科学において使用され得ます。このような措置は、またはサンプルが得られる時刻と対象者の性別など、関心の問題に重要であってもなくてもよいの変数によって影響を受けることができます。また、血液採取手順自体の間に誘起される応力によって影響され得ます。ストレスホルモンと痛みの知覚は急速に血液の組成を変化させることができます。 げっ歯類は、最も一般的に使用される実験動物であり、そして複数の方法は、血液採取のために開発されています。採血の理想的な方法は、最小限のphysiologicaを持つ必要があります動物のLへの影響は、全く麻酔を必要とせず、迅速かつ繰り返しサンプリングを可能にし、多数の下流の適用のために十分な血液量を提供します。例えば、頸静脈または尾先端切断のカテーテルなどの血液を採取するための一般的な技術は、これらの基準を満たしていません。 このプロトコルの目的は、最小限のストレスであるラットにおける使用のための血液サンプリング技術について記述して麻酔を必要とせず、単一の被験者内で複数の血液採取を可能にし、複数のアッセイを行うことができるように、比較的大きな試料体積を提供します単一のサンプルに。この方法の目的は、最低限、急性ストレス反応に影響される血液サンプルを得ることです。

<table><tbody><tr><td>Sodium heparin (1,000 USP units/ml)</td><td>Patternson Veterinary Supply</td><td>25021040010</td><td></td></tr><tr><td>Ethylenediaminetetraacetic acid (EDTA)</td><td>JT Taylor</td><td>JT2020-01</td><td></td></tr><tr><td>Dermachlor rinse-chlorhexadine</td><td>Butler Schein</td><td>6356</td><td>Topical antiseptic solution, 2% chlorhexidine gluconate</td></tr><tr><td>SURFLO Winged Infusion Sets, Terumo, butterfly catheters</td><td>VWR Scientific</td><td>TESV25BLK</td><td></td></tr><tr><td>BD Tuberculin 1 cc syringes</td><td>VWR Scientific</td><td>BD309659</td><td></td></tr><tr><td>1.5 ml microcentrifuge tubes</td><td>VWR Scientific</td><td>89202-682</td><td></td></tr><tr><td>500 &amp;mu;l microcentrifuge tubes</td><td>VWR Scientific</td><td>21150-330</td><td></td></tr><tr><td>Scissors, stainless steel, 5&quot;</td><td>VWR Scientific</td><td>82027-586</td><td></td></tr><tr><td>500 ml plastic beaker</td><td>VWR Scientific</td><td>414004-149</td><td></td></tr><tr><td>Clean cloth wrap</td><td>Butler Schein</td><td>2993</td><td></td></tr><tr><td>Velcro tape, 0.75 in width</td><td>Monoprice</td><td>B004AF9II6</td><td>Hook and loop tape</td></tr><tr><td>Timer</td><td>VWR Scientific</td><td>62344-641</td><td></td></tr></tbody></table>

sampling blood from the lateral tail vein of the rat

Blood samples are commonly obtained in many experimental contexts to measure targets of interest, including hormones, immune factors, growth factors, proteins, and glucose, yet the composition of the blood is dynamically regulated and easily perturbed. One factor that can change the blood composition is the stress response triggered by the sampling procedure, which can contribute to variability in the measures of interest. Here we describe a procedure for blood sampling from the lateral tail vein in the rat. This procedure offers significant advantages over other more commonly used techniques. It permits rapid sampling with minimal pain or invasiveness, without anesthesia or analgesia. Additionally, it can be used to obtain large volume samples (upwards of 1 ml in some rats), and it may be used repeatedly across experimental days. By minimizing the stress response and pain resulting from blood sampling, measures can more accurately reflect the true basal state of the animal, with minimal influence from the sampling procedure itself.

プロトコールに記載されているように外側尾静脈から採取した血漿は、外観に半透明で淡黄色であった血漿サンプルを提供します。 図1に示すように、サンプル中の溶血は、血漿に赤い色合いを与えます。急性ストレス反応が急速に血液の組成を変化させることができます。 図2に示すように、例えば、循環コルチコステロン濃度が著しく、ストレッサー曝露の10分以内に増やすことができます。露出をストレッサーの前に、この方法で得られたコルチコステロンの低い基礎レベルは、サンプリング手順自体がストレスの大きな原因ではないことを明らかにしました。 <img alt="図1" src="/files/ftp_upload/52766/52766fig1.jpg" /> 図1：サンプルの外観（A）A溶血試料が示されています。遠心分離後、血漿または血清の層（表面黒Arで示されます行）ピンクや赤を帯び表示されます。暗い色合いは、溶血の高いレベルを示しています。 （B）遠心分離した後、適切に収集したサンプルは、非溶血血漿または血清に対応する上のバンド（黒矢印で示す面）に透明な、黄色がかった外観を持つことになります。この層を除去するとき、それは、いずれかの全血層にピペットの先端を押して、またはチップ内に全血を吸引することにより、下層の全血を乱さないことが重要です。全血で汚染された任意の血漿または血清は破棄されるべきです。 <img alt="図2" src="/files/ftp_upload/52766/52766fig2.jpg" /> 図2：血漿コルチコステロンは急速にストレスの多い経験以下に上昇する血液が前に成人女性ロングエバンスラットの外側尾静脈から得られ、10分4トーン（10秒、2 kHzの、85デシベル）への曝露後の共同終了しました。 fooでtshocks（1秒、350μA）。ベースライン（290.4±138.8 pg / mlで）における血漿コルチコステロンのレベルは、フットショックストレスの提示後10分で観察されるよりも有意に低かった（2204.8±454.5 pg / mlで、p = 0.02、n = 4） は 、対応のあるtによって決定されます-test。 *、p &lt;0.05

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Sampling Blood from the Lateral Tail Vein of the Rat

Blood samples are useful for assessing biomarkers of physiological states or disease in vivo. Here we describe the methodology to sample blood from the lateral tail vein in the rat. This method provides rapid samples with minimal pain and invasiveness.

ラットの外側尾静脈から血液をサンプリング

Blood samples are commonly obtained in many experimental contexts to measure targets of interest, including hormones, immune factors, growth factors, ...

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Research

JoVE Journal

Biology

102.4K ビュー.  Massachusetts Institute of Technology. Blood samples are useful for assessing biomarkers of physiological states or disease in vivo. Here we describe the methodology to sample blood from the lateral tail vein in the rat. This method provides rapid samples with minimal pain and invasiveness.

ビデオ: Sampling Blood from the Lateral Tail Vein of the Rat

Drawing Blood from Rats through the Saphenous Vein and by Cardiac Puncture

Drawing blood from rodents is necessary for a large number of both in vitro and in vivo studies. Sites of blood draws are numerous in rodents: retro-orbital sinus, jugular vein, maxillary vein, saphenous vein, heart. Each technique has its advantages and disadvantages, and some are not approved any more in some countries (e.g., retro-orbital draws in Holland). A discussion of different techniques for drawing blood are available 1-3.
Here, we present two techniques for drawing blood from rats, each with its specific applications.
Blood draw from the saphenous vein, provided it is done properly, induces minimal distress in animals and does not require anesthesia. This technique allows repeated draws of small amounts of blood, such as needed for pharmacokinetic studies 4,5, determining plasma chemistry, or blood counts 6.
Cardiac puncture allows the collection of large amounts of blood from a single animal (up to 10 ml of blood can be drawn from a 150 g rat). This technique is therefore very useful as a terminal procedure when drawing blood from the saphenous would not provide a large enough sample. We use cardiac puncture when we need sufficient amounts of serum from a specific strain of rats to grow T lymphocyte lines in vitro 4-9.

Blood draws are necessary in a large number of studies, for example to study the pharmacokinetics profile of a compound. Here, we demonstrate how to draw blood from rats using two techniques: blood draw from the saphenous vein or by cardiac puncture.

伏在静脈を通って心臓穿刺によりラットから採血

Drawing blood from rodents is necessary for a large number of both in vitro and in vivo studies. Sites of blood draws are numerous in rodents: ...

生物学

Modified Blood Collection from Tail Veins of Non-anesthetized Mice with a Vacuum Blood Collection System and Eyeglass Magnifier

Blood sample collection is the basis of experimental animal research. It is of importance to obtain adequate blood samples for various research purposes. The tail veins of mice are small, and it is sometimes difficult to obtain the required blood volume by conventional puncture methods. This study investigates the superiority of repeated blood sample collection from tail veins of mice through use of a vacuum blood collection system and eyeglass magnifier (experimental group) compared to conventional blood sampling methods (conventional group), performed by beginners and experts, respectively. With the help of an eyeglass magnifier, a butterfly needle tip is inserted into the tail vein of each mouse in the experimental group. When the vein is penetrated successfully, a blood sample is collected in the vacuum collection tube by insertion of the rubber end of a butterfly needle into the vacuum blood collection tube. The plunger is then used to collect blood without the help of the eyeglass magnifier in the conventional group. Success rates of blood sample collection by the beginners and experts were shown to be 70% vs. 100% (p &#60; 0.01) in the experimental group and 35% vs. 85% (p &#60; 0.01) in the conventional group. For both beginners and experts, puncture times required for obtaining required blood sample were significantly lower in the experimental group compared to the conventional group (2.40 &#177; 0.75 vs. 2.90 &#177; 0.31, p &#60; 0.05; 1.15 &#177; 0.37 vs. 1.55 &#177; 0.76, p &#60; 0.05). In conclusion, the presented blood sampling technique is feasible and easy to practice and enables frequent sampling of adequate blood volumes from non-anesthetized mice.&#160;

This study reports blood sampling from tail vein in mice using a vacuum extraction tube system with eyeglass magnifier. Our method is easy to practice and could be used for repeat blood sampling in mice.

真空の血のコレクションのシステムと眼鏡拡大鏡非麻酔下マウスの尾静脈から変更された血のコレクション

Blood sample collection is the basis of experimental animal research. It is of importance to obtain adequate blood samples for various research purposes. ...

行動学

Repeated Blood Collection from Tail Vein of Non-Anesthetized Rats with a Vacuum Blood Collection System

Blood can be collected from rats in a number of sampling locations. For instance, the tail vein is a superior location for blood sampling. However, the tail vein is thin so that it is sometimes hard to puncture. In addition, the tail vein has low blood flow and requires a long sampling time to get sufficient blood. The present report describes a simple blood sampling method, the vacuum blood collection method, which is usually used to obtain blood samples from patients, here used for non-anesthetized rats. The 22 G butterfly needle tip was inserted into one of the lateral tail veins approximately 2-3 cm from the tip of the tail at an angle of approximately 20&#176;, and blood was collected in the vacuum collection tube by inserting the rubber end of the butterfly needle into the vacuum blood collection tube. The present experimental results show that the success rate was 95% in the experimental group and 90% in the beginner group. The success rate and puncture times were similar between two groups. The sampling duration was significantly shorter in the experimental group compared to beginner group. In conclusion, this vacuum blood collection method for sequential blood sampling from the tail vein of non- anesthetized rats is feasible and easy-to-learn, which might serve as a reliable alternative to other conventionally used blood sampling techniques for rats.

Here, we describe a simple tail vein blood sampling method in non-anesthetized rats using a vacuum extraction tube system. This method reduces the risk of direct exposure to blood and simplifies taking multiple samples from a single venipuncture.

真空の血のコレクション システムと非麻酔下ラットの尾静脈からの採血を繰り返す

Blood can be collected from rats in a number of sampling locations. For instance, the tail vein is a superior location for blood sampling. However, the ...

医学

Subclavian Vein Puncture As an Alternative Method of Blood Sample Collection in Rats

Blood collection with enough blood volume is essential in animal experiments. Blood collection from the tail vein of rats is popular and less stressful compared to other more aggressive methods such as retro-orbital plexus sample collection. However, this blood collection method is sometimes limited by an unsatisfactory success rate. Here, we introduce a method for blood collection through the subclavian vein puncture. The subclavian vein is located just under the clavicle and this vein is large enough to fulfill the volume requirements of blood collection. Our results show that this method is safe and applicable for blood collection sampling with the required blood volume. Blood collection through the subclavian vein puncture could serve as an alternative blood collection method in case of failed tail vein blood sampling in rats.

Here, we present a protocol to collect blood samples from the rat subclavian vein.

ラットの血液サンプル コレクションの代替方法として鎖骨下静脈穿刺

Blood collection with enough blood volume is essential in animal experiments. Blood collection from the tail vein of rats is popular and less stressful ...

脳波記録の同時実施によるラットからの脳脊髄液および血液の回収

Sampling Cerebrospinal Fluid and Blood from Lateral Tail Vein in Rats During EEG Recordings

Because the composition of body fluids reflects many physiological and pathological dynamics, biological liquid samples are commonly obtained in many experimental contexts to measure molecules of interest, such as hormones, growth factors, proteins, or small non-coding RNAs. A specific example is the sampling of biological liquids in the research of biomarkers for epilepsy. In these studies, it is desirable to compare the levels of molecules in cerebrospinal fluid (CSF) and in plasma, by withdrawing CSF and plasma in parallel and considering the time distance of the sampling from and to seizures. The combined CSF and plasma sampling, coupled with video-EEG monitoring in epileptic animals, is a promising approach for the validation of putative diagnostic and prognostic biomarkers. Here, a procedure of combined CSF withdrawal from cisterna magna and blood sampling from the lateral tail vein in epileptic rats that are continuously video-EEG monitored is described. This procedure offers significant advantages over other commonly used techniques. It permits rapid sampling with minimal pain or invasiveness, and reduced time of anesthesia. Additionally, it can be used to obtain CSF and plasma samples in both tethered and telemetry EEG recorded rats, and it may be used repeatedly across multiple days of experiment. By minimizing the stress due to sampling by shortening isoflurane anesthesia, measures are expected to reflect more accurately the true levels of investigated molecules in biofluids. Depending on the availability of an appropriate analytical assay, this technique may be used to measure the levels of multiple, different molecules while performing EEG recording at the same time.

著者スポットライト:てんかんバイオマーカー探索のための高品質なCSFおよび血液サンプルの取得 

The protocol shows repeated cerebrospinal fluid and blood collections from epileptic rats performed in parallel with continuous video-electroencephalogram (EEG) monitoring. These are instrumental for exploring possible links between changes in various body fluid molecules and seizure activity.

脳波記録中のラットの側尾静脈からの脳脊髄液および血液のサンプリング

Because the composition of body fluids reflects many physiological and pathological dynamics, biological liquid samples are commonly obtained in many ...

神経科学

Repetitive Blood Sampling from the Subclavian Vein of Conscious Rat

Rats are widely used in pharmacokinetics (PK) and toxicokinetic (TK) studies that need to collect a certain amount of blood at specific time points to detect drug exposure. The rat blood sampling method determines the quality of the plasma and further affects the precision of the test results. The subclavian vein blood collection method described in this protocol collects blood samples repeatedly in the conscious state of animals to meet the needs of PK and TK tests. The skills of restraint handling and appropriate procedure of needle incision ensure the success rate of blood collection. It is easy to operate while ensuring the quality of plasma and at the same time catering to animal welfare. However, this method requires skilled operation, and an improper one may cause animal weakness, pain, lameness, and even mortality. The current method has been used in the testing facility for a 4-week oral toxicity study in Sprague Dawley (SD) rats with TK. The maximum amount of blood collected within 24 h did not exceed 20% of the animal's total blood. The animals' body weight was more than 200 g for males and females. The data showed that the animals' bodyweight increased steadily every week, and the clinical observation was normal after repetitive sample collection.

The present protocol describes a simple and efficient method for collecting blood from the subclavian vein in rats. It enables rapid, timely, and easily identifiable sampling without anesthesia and obtains high-quality blood through repetitive sample collection.

意識性ラットの鎖骨下静脈からの反復採血

Rats are widely used in pharmacokinetics (PK) and toxicokinetic (TK) studies that need to collect a certain amount of blood at specific time points to ...

ラットの採血技術の比較研究

Modified Tail Vein and Penile Vein Puncture for Blood Sampling in the Rat Model

Blood samples are required in most experimental animal designs to assess various hematological parameters. This paper presents two procedures for blood collection in rats: the lateral tail vein puncture and the dorsal penile vein puncture, which offer significant advantages over other previously described techniques. This study shows that these two procedures allow for fast sampling (under 10 min) and yield sufficient blood volumes for most assays (202 &#956;L &#177; 67.7 &#956;L). The dorsal penile vein puncture must be done under anesthesia, whereas the lateral tail vein puncture can be done on a conscious, restrained animal.
Alternating these two techniques, therefore, enables blood draw in any situation. While it is always recommended for an operator to be assisted during a procedure to ensure animal welfare, these techniques require only a single operator, unlike most blood sampling methods that require two. Moreover, whereas these previously described methods (e.g., jugular stick, subclavian vein blood draw) require extensive prior training to avoid harm to or death of the animal, tail vein and dorsal penile vein puncture are rarely fatal. For all these reasons, and according to the context (e.g., for studies including male rats, during the perioperative or immediate postoperative period, for animals with thin tail veins), both techniques can be used alternately to enable repeated blood draws.

著者スポットライト:ラットにおける状況依存性の採血方法 

Here, we present a protocol to offer rapid, easy, and reliable blood collection alternatives for the rat model. We describe three different blood sampling methods according to the context: tail vein puncture under anesthesia or on a conscious animal, and dorsal penile vein puncture under anesthesia.

ラットモデルにおける採血のための修正尾静脈および陰茎静脈穿刺

Blood samples are required in most experimental animal designs to assess various hematological parameters. This paper presents two procedures for blood ...

ラットの外側尾静脈から血液をサンプリング

要約

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伏在静脈を通って心臓穿刺によりラットから採血

真空の血のコレクションのシステムと眼鏡拡大鏡非麻酔下マウスの尾静脈から変更された血のコレクション

真空の血のコレクションシステムと非麻酔下ラットの尾静脈からの採血を繰り返す

ラットの血液サンプルコレクションの代替方法として鎖骨下静脈穿刺

脳波記録中のラットの側尾静脈からの脳脊髄液および血液のサンプリング

脳波記録中のラットの側尾静脈からの脳脊髄液および血液のサンプリング

脳波記録中のラットの側尾静脈からの脳脊髄液および血液のサンプリング

意識性ラットの鎖骨下静脈からの反復採血

ラットモデルにおける採血のための修正尾静脈および陰茎静脈穿刺

ラットモデルにおける採血のための修正尾静脈および陰茎静脈穿刺

ラットの外側尾静脈から血液をサンプリング

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伏在静脈を通って心臓穿刺によりラットから採血

真空の血のコレクションのシステムと眼鏡拡大鏡非麻酔下マウスの尾静脈から変更された血のコレクション

真空の血のコレクション システムと非麻酔下ラットの尾静脈からの採血を繰り返す

ラットの血液サンプル コレクションの代替方法として鎖骨下静脈穿刺

脳波記録中のラットの側尾静脈からの脳脊髄液および血液のサンプリング

脳波記録中のラットの側尾静脈からの脳脊髄液および血液のサンプリング

脳波記録中のラットの側尾静脈からの脳脊髄液および血液のサンプリング

意識性ラットの鎖骨下静脈からの反復採血

ラットモデルにおける採血のための修正尾静脈および陰茎静脈穿刺

ラットモデルにおける採血のための修正尾静脈および陰茎静脈穿刺

真空の血のコレクションシステムと非麻酔下ラットの尾静脈からの採血を繰り返す

ラットの血液サンプルコレクションの代替方法として鎖骨下静脈穿刺