この技術は、デンプン顆粒サイズの再現性と統計的に有効な決定を可能にし、統計的に分布した顆粒サイズの適切な説明を提供します。この技術は、形状に依存しないデンプン顆粒体積を決定し、サイズ分布に統計的に有効な顆粒サンプルサイズを使用し、顆粒サイズ分布の改善された仕様を提供します。この方法は、顆粒サイズ情報を必要とする他のデンプン用途に加えて、デンプン顆粒サイズを含む植物および食品科学の研究に適用可能です。
分析を開始する前に、500ミリリットルのメタノールに塩化リチウム25グラムを溶解し、分析するデンプンサンプルの既知の顆粒径範囲を覆う粒子径範囲を有する開口チューブを選択する。標準の操作方法を設定するには、アナライザー ソフトウェアを起動し、メイン メニューで [SOP] をクリックして SOM ウィザードを作成し、適切な設定を選択し、[SOM の編集] をクリックして適切な設定を選択します。環境設定ファイルを選択するには、[SOP] で[環境設定の作成]ウィザードをクリックし、適切な環境設定を選択してから、[SOPの作成]ウィザードをクリックし、説明と著者を入力して、SOP を作成して保存する SOM および設定ファイルを選択します。
分析用のアナライザーをセットアップするには、アナライザーをオンにして、アナライザー ソフトウェアで準備完了状態を確認します。あらかじめ準備した電解液で電解液瓶を満たし、必要に応じて廃棄物瓶を空にします。ユーザーズマニュアルのガイドに従って選択した絞りチューブを取り付けて固定し、ロック解除クリップを押してアッセイプラットフォームのロックを解除します。
手動で底にプラットフォームを下げ、プラットフォーム上に電解質の100ミリリットルを含む分析ビーカーを置きます.攪拌位置に攪拌機を移動し、手動でプラットフォームをセルフロックの上の位置に上げ、開口チューブと攪拌機を電解質に浸します。下部の計器ツールバーの [充填] をクリックしてシステムに電解液を自動的に入力し、[フラッシュ] をクリックしてシステムを自動的にフラッシュし、[SOP] をクリックして SOM をロードして標準の操作方法を読み込み、サンプルをクリックしてサンプル情報を入力し、実行のサンプル情報を入力します。
デンプンメタノールサンプルサイズの懸濁液を調製するには、2つまたは3つの複製デンプン抽出物から1つまたは2つの0.5グラムサンプルを計量し、各アリコートを50ミリリットルの円錐形遠心分離管に5ミリリットルのメタノールに加えます。超音波処理装置から低強度超音波のいくつかのパルスを使用してデンプン顆粒を完全に分散させ、使い捨てのトランスファーピペットを使用して、ビーカーで一定の攪拌下にある塩化リチウムメタノール電解質の100ミリリットルに最初のデンプンメタノール懸濁液の約200マイクロリットルを塗布し、サンプルコンパートメントドアを閉めてプレビューを開始します。ステータスパネルで、動的に表示される濃度バーが緑色で、サスペンションの5~8%の公称濃度範囲を示していることを確認します。
[停止]をクリックしてプレビューを停止し、[開始]をクリックして解析を開始します。分析装置は、実行中のステータスパネルのランタイムと共に表示されるサイズ顆粒の合計数が SOM の制御モードで設定された合計カウントに達すると、自動的に実行を完了します。同じデンプン電解質懸濁液を使用して技術的な繰り返し実行を実行するには、下部のツールバーの[開始]または[繰り返し]をクリックします。
分析の最後に、ビーカーを空にし、メタノールでリンスし、次のサンプルの分析のために100ミリリットルの新鮮な電解質溶液を補充します。実行の制御に SOM を使用した場合は、基本設定作成ウィザードを使用して、結果の表示、印刷、および統計分析に必要な設定を選択します。複数の実行の結果を単一のグラフ上にオーバーレイするには、オーバーレイ ウィンドウで、オーバーレイする結果を選択します。
[追加] をクリックしてファイルを選択したファイル ボックスに移動し、[OK] をクリックして選択した結果を 1 つのグラフに重ね合わせることができます。開いているオーバーレイにファイルを追加するには、[ファイルの実行] をクリックし、オーバーレイを開いてオーバーレイ ウィンドウにアクセスし、目的のファイルを選択して、クリックして追加します。ファイル、ファイル ツール、平均をクリックして平均ウィンドウを開き、ファイル ボックス内の目的の複数の結果ファイルに移動して選択します。
[追加] をクリックしてファイルを選択したファイル ボックスに移動し、[OK] をクリックして選択した結果を 1 つのグラフに表示します。平均分布に追加の結果ファイルを含めるには、[ファイルの実行] をクリックして [平均値に追加] ウィンドウを開き、対象のファイルを追加します。新しい平均が、実行ウィンドウのグラフに表示されます。
平均分布を指定するためのグラフィック幾何平均と標準偏差を取得するには、[計算]と[平均統計量]をクリックして統計サマリーウィンドウを開き、データの平均と標準偏差を表示します。表の 3 行目には、平均分布を指定するためのグラフィック幾何平均と標準偏差が表示されます。2 番目の列には、分布の平均化による統計が表示されます。
ここでは、代表的なサツマイモ澱粉サンプルの4つの複製サイジング分析とその平均分布に対する微分体積割合相当球径分布を示す。この図では、4つの複製サイズ分析の平均累積数および体積パーセンテージサイズ分布(平均差分体積パーセンテージ分布の変換ビュー)を観察することができます。これらのデンプン顆粒サンプルの累積数と体積パーセンテージを比較すると、体積相当の球径が小さい顆粒が総体積よりも総計数のはるかに大きな割合を占めていることが明らかになった。
デンプンサンプルおよびアッセイ懸濁液中のデンプン顆粒凝集体を最小限に抑え、デンプン電解質懸濁液に対して5~8%の公称濃度範囲を達成することが重要です。デンプンサンプルの物理的、化学的、および熱的特性を特徴付けるためのアッセイや、ソース植物における澱粉合成特性と顆粒サイズの相関性を持つアッセイも行うことができる。
