이것은 경제적이고 재현 가능한 심장 이식 모델입니다. 미세 수술 기술을 향상시키고 유전자 변형 마우스 균주를 기증자 또는 수혜자로 사용할 수 있도록 하는 데 사용할 수 있습니다. 이 기술은 수술 후 이환율을 제한하기 위해 정상적인 인간 수술의 모든 통증 관리 및 마취 복잡성을 광범위하게 포함합니다.
이 모델은 외과적 유도 면역, 불일치가 이식 거부에 미치는 영향 및 이식 수명을 연구하는 데 중요합니다. 이 모델의 일반적인 외과적 접근법은 변형된 형태로 다른 마우스 고형 장기 이식에 적용될 수 있습니다. 미세한 규모와 관련 시간 제약으로 인해 약간의 오차 범위가 남습니다.
성공의 열쇠는 전문적인 감독하에 정기적으로 연습하여 어려운 영역에 대한 구체적인 피드백을 제공하는 것입니다. 절차를 시연하는 것은 제 연구실의 연구 조교인 Ms. Liu Liu가 될 것입니다. 수술 절차를 지원하는 것은 Dr.Wen Hua Huang, Ms.Jas Kaur 및 Ms.Xiao Zhang입니다.
마우스를 마취시키고 유도실에서 꺼낸 후, 클리퍼를 이용하여 복부를 밀착시켜 제모를 제거한다. 기증자의 경우 생식기에서 복부 흉부의 위쪽 가장자리까지 이어지는 부위를 면도하십시오. 면도한 부위가 측면으로 겨드랑이 중앙선에 도달하는지 확인하십시오.
윤활 처리된 깨끗한 직장 프로브를 동물의 직장에 삽입한 다음 미세 기공 테이프를 사용하여 수술판에 고정하여 온도를 모니터링합니다. 외상성 겸자, 안검 반사 및 근긴장도에 의해 가해지는 압력으로 인한 발 또는 꼬리의 자극에 대한 반응을 관찰하여 마취 깊이를 평가합니다. 호흡 노력을 관찰하면서 흉벽의 움직임을 관찰하여 호흡수를 측정하여 일회 호흡량을 평가한 다음 원고에 설명된 대로 호흡수를 계산합니다.
멸균 면봉 어플리케이터를 사용하여 수술 부위를 소독한 후 클로르헥시딘을 수술 부위 중앙에서 가장자리까지 원을 그리며 세 번 도포한 다음 클로르헥시딘과 에탄올을 동일한 패턴으로 혼합하여 도포합니다. 멸균 기구를 배치할 부위로 수술판의 양쪽에 멸균 수술용 드레이프를 배치하여 수술 부위를 준비합니다. 드레이프에 작은 타원형의 구멍을 만든 후 제안된 절개 부위에 천공 드레이프를 놓습니다.
앞에서 설명한대로 동물을 준비한 후 눈 윤활제를 바르십시오. 계획된 절개 부위를 따라 29게이지 인슐린 주사기를 사용하여 복부 복부에 중량 기반 용량의 부피바카인을 피하 주사하고 계획된 절개 범위를 덮는 가시적인 출혈의 직선을 찾습니다. 그런 다음 멸균 수술용 메스 칼날을 사용하여 복부 정중선 피부를 8배 배율로 절개합니다.
개복술이 하복부에서 늑골 가장자리까지 뻗어 있는지 확인하십시오. 그리고 견인기를 삽입하여 수술 부위를 최대화합니다. 멸균 거즈 부분을 따뜻한 0.9% 염화나트륨 용액으로 적셔 수술 부위의 위쪽에 배치합니다.
이제 축축한 멸균 면봉을 사용하여 내장을 부드럽게 내장을 제거합니다. 이 거즈 위에 놓고 거즈를 오르간으로 감싼다. 면봉 어플리케이터와 둥근 몸체 봉합사 겸자의 조합을 사용하여 둔기 해부 기술로 주변 조직에서 복부 대동맥과 하대정맥을 제거하고 동원합니다.
여유 공간이 혈관의 신장 하부 측면 사이와 대동맥의 분기점 위에 있는지 확인하십시오. 후방 복부 혈관을 확인한 후 집게를 사용하여 척추에서 멀어지는 방향으로 대동맥을 부드럽게 당깁니다. 복부 혈관 뒤쪽에 구부러진 집게를 통과시켜 이 혈관의 양쪽에 두부로 채널을 만듭니다.
기구로 묶인 10-O 나일론 길이를 사용하여 계획된 문합 구역에서 식별 및 동원된 각 용기를 한 번 더 던지면 외과의의 매듭에 연결합니다. 복부 혈관의 머리와 코들 끝에 수술용 클램프를 설치하여 문합 부위를 순환에서 격리합니다. 클램프가 완전한 폐색을 보장하기에 충분한 정도로 두 용기를 가로지는지 확인하십시오.
주로 사용하지 않는 손에 집게를 사용하여 대동맥을 안정시킵니다. 대동맥의 앞쪽에 30게이지 바늘을 사용하여 대동맥 절개술을 시행합니다. 끝이 곧은 미세 수술 가위를 사용하여 대동맥 절개술을 확장합니다.
선절개술을 시행하려면 직선 집게를 사용하고 대동맥 절개술의 중간과 일치하는 지점에서 하대정맥에 부드러운 전방 견인을 가하십시오. 오목한 면이 앞쪽을 향하도록 구부러진 미세수술용 가위를 사용하여 대동맥 절개술과 동일한 길이의 하대정맥 부분을 제거합니다. 헤파린 화 된 염화나트륨 용액으로 남아있는 혈액의 열린 혈관 내부를 씻으십시오.
기증자 심장을 복부에 놓고 상행 대동맥이 복부 대동맥 절개술과 직접 나란히 있고 심장이 회전하여 두 번째 문합을 위해 폐동맥을 그릴 수 있도록 합니다. 10-O 나일론을 사용하여 대동맥 절개술의 12:00 위치와 상행 대동맥 내강의 해당 말단 사이에 스테이 봉합사를 놓습니다. 미세 수술 바늘 홀더에 끝이 곧은 집게를 사용하여 외과 의사의 매듭을 세 번 던지고 끝을 잘라 약 2mm의 봉합사를 남깁니다.
대동맥 절개술의 6:00 위치와 상행 대동맥의 해당 측면 사이에 두 번째 스테이 봉합사를 놓습니다. 이 봉합사는 후속 봉합사의 기초 역할도 하므로 궁극적인 타이 오프를 위해 꼬리의 최소 10mm를 남겨 두십시오. 대동맥 절개술의 해부학적 오른쪽 가장자리와 상행 대동맥의 해당 자유 가장자리에 반대하도록 10-O 나일론의 연속 실행 봉합사를 오름차순으로 배치합니다.
이 절차를 신중하게 수행하고 이 줄에 약 4번의 던지기를 사용합니다. 대동맥 절개술의 나머지 자유 가장자리와의 부착에 영향을 미치기 위해 해부학적 왼쪽 아래로 두 번째 연속 실행 봉합사를 배치하기 전에 원위 스테이 봉합사 주위에 봉합사의 자유 끝을 통과시킵니다. 외과 의사의 매듭을 사용하여 봉합사를 꼬리에 묶고 두 번 더 던집니다.
하대정맥의 12:00 위치, 정맥 절개술 및 폐동맥 내강의 해당 말단 사이에 스테이 봉합사를 놓습니다. 이 앵커 포인트에서 폐동맥의 해부학 적 왼쪽 가장자리와 정맥 절개술의 해당 가장자리 사이에 지속적으로 달리는 봉합사를 배치합니다. 정맥 절개술의 6:00 위치와 폐동맥 내강의 해당 말단을 통해 바늘을 통과시킵니다.
오름차순으로, 폐동맥의 나머지 자유 가장자리와 venotomy의 해부학 적 권리를 통해 바늘을 통과시킵니다. 이 선에 평균 4회 던지기를 사용한 다음 폐동맥과 정맥 절개술의 최종 자유 가장자리를 함께 그립니다. 봉합사의 자유 끝을 앵커에 묶고기구를 사용하여 외과 의사의 매듭을 두 번의 추가 던지기로 묶고 여분의 실을 자릅니다.
혈류를 방해할 수 있는 혈관이 비틀리지 않았는지 확인하십시오. 봉합사 라인 위에 젤 폼을 놓습니다. 그 주위에 약 2mm 젤 폼 두 조각을 놓고 눈에 보이는 모든 봉합선이 덮이도록 성형합니다.
혈관 cl을 풀어amps는 coddle cl로 시작합니다.amps 그리고 그 다음 cephalo clamp. 소량의 출혈이 예상되므로 문합 부위에 면봉 어플리케이터를 선제적으로 배치하여 압력을 가합니다. 눈에 보이는 누출을 고친 후 심장의 맥동을 확인하십시오.
그것이 없으면 심장 혈관이 비틀어지는지 확인한 다음 장을 심장 위와 주위로 재배치하고 건조해 보이면 따뜻한 염화나트륨 용액으로 복강을 적십니다. 연속 비 중단 기술을 사용하여 비 흡수성 6-O 프롤렌 모노 필라멘트를 사용하여 근육층을 먼저 봉합 한 다음 피부를 봉합하여 복강을 닫습니다. 수혜자가 수술판에서 제거되고 마취제에서 제거되면 1밀리리터의 따뜻한 식염수를 피하 투여하고 수술 후 회복 프로토콜에 따라 관찰을 위해 수혜자를 온난화와 함께 준비된 케이지에 넣습니다.
수술 후 100일 동안 동계성 및 선천성 이종 쥐 심장 이식의 경우 완전한 회복 및 수용이 관찰되었습니다. 그러나, 주요 불일치 이종 쥐 심장 이식의 경우 수술 후 7 일 이내에 빠른 거부가 관찰되었다. 문합 중에는 수술 부위 내에서 봉합사가 어디에 있는지 인식을 유지해야 합니다.
그렇게 하지 않으면 구조물에 심각한 손상이 발생하거나 봉합사가 엉킬 수 있습니다. 이러한 해부 및 문합의 미세 수술 기술은 이종 종양 및 동소 간 이식을 포함한 다른 작은 포유류 수술 모델에 매우 적용 가능하여 연구자들이 이식 거부를 연구할 수 있습니다.
