Wellcome Trust forneceu apoio financeiro (Prêmio VIP para JSY e 074128 Bolsa de Investigação para KLB). Conselho de Pesquisa Médica Studentship para RJA Leica_SP2_Stacker, um algoritmo usado para importar TIFFs para &#39;reconstrução&#39; em uma série, é baseado em Leica_tiff_sequence, um plugin para ler Leica SP2 TIFFs no ImageJ, desenvolvido por Tony Collins e usado com sua permissão. ( <a href="http://www.uhnres.utoronto.ca/facilities/wcif/software/Plugins/LeicaTIFF.html">http://www.uhnres.utoronto.ca/facilities/wcif/software/Plugins/LeicaTIFF.html</a> ) StackReg e TurboReg, algoritmos utilizados para corrigir o movimento do tecido, são baseados em Th venaz e colegas (1998) 9. Excel_writer.jar foi escrito por Kurt De Vos (http://rsb.info.nih.gov/ij/plugins/excel-writer.html). JNCT0.08JoVE.ijm, o algoritmo de detecção de partículas, é baseado em um algoritmo escrito por Cérebro KL e detalhado anteriormente 5.

Parte 1: Preparação do Ca 2 + indicador (Oregon Verde 488-BAPTA 01:00) <ol><li> Oregon Verde 488-BAPTA 01:00 vem em frascos de 500 mL de uma pequena quantidade (50 mg) de pó. Adicionar 40 mL PLURONIC F-127 solução para o pó, agitando suavemente durante 30 s, em seguida, adicione 460 mL PSS, e agitar suavemente por 30 s. A solução final, 10 mM Oregon Verde 488 BAPTA-01:00, fornece 4 x 125 mL alíquotas. Evitar a exposição à luz e armazenar a -20 C. </li></ol> Parte 2: Ca 2 + carga <ol><li> Remover o Ca 2 + indicador (Oregon Verde 488-BAPTA 01:00) a partir do freezer (-20 C) e deixar descongelar em temperatura ambiente. </li><li> Tomar 1 ml de PSS em um tubo de ensaio e coloque em banho-maria. Bolha com 95% O 2 / 5% CO 2 a uma taxa de cerca de 1 bolha aparecendo por segundo. O borbulhador precisa ser protegido em tubo de ensaio, por exemplo, com uma rolha ou com Parafilm. </li><li> Dissecar os tecidos do animal e, em uma placa de Petri Sylgard-alinhado, remova cuidadosamente tecido conjuntivo. Independentemente do tipo de músculo liso do órgão, PSS deve ser substituído a cada 10 minutos e tecidos devem ser bem lavados (por exemplo, substituindo o PSS três vezes) dissecção seguinte. Para o canal deferente: considerar cortar o órgão de comprimento maneiras de produzir uma folha de tecido. Para a bexiga urinária: aberto longitudinalmente a partir do colo da bexiga (posterior) para o topo da cúpula (anterior). Prepare quatro tiras, 6-8 mm de comprimento e 1-2 mm de largura, ao longo da superfície dorsal do detrusor, o corte na direção dos feixes musculares dominante. </li><li> Lugar dissecados tecido na &quot;pré-aquecida e com bolhas &#39;PSS. </li><li> Adicionar 125 mL de 10 mM Oregon Verde 488-BAPTA 01:00 de tubo de ensaio e dar um pouco agitação, à mão, para misturar. </li><li> Retomar a borbulhar e deixe, coberto com papel alumínio. O tempo necessário para o tecido suficiente para assumir o Ca 2 + indicador varia de acordo com o tamanho do tecido ea espessura da camada de músculo liso. Por exemplo: 70 mins (mouse detrusor, anococcygeus rato) a 120 minutos (detrusor de rato vas, deferente do rato). </li></ol> Parte 3: Preparando o &#39;Ca 2 + carregado&#39; de tecidos para microscopia Cuidado pinagem do tecido é necessário para minimizar o movimento espontâneo do tecido (a propriedade de imagem de células musculares lisas do tecido relativamente intacta) e para facilitar a localização de um local adequado para geração de imagens (como um pedaço de tecido pode ser pesquisados ​​em duas dimensões, em vez de três). <ol><li> Lave o tecido em PSS borbulhava por pelo menos 5 minutos. </li><li> Montagem em Sylgard alinhadas prato preparação, alongamento do tecido (um pouco) para formar uma folha plana. Evite a utilização de &#39;pins&#39; que podem riscar o objetivo, uso comprimentos curtos, em vez de 25-50 fio de prata mM diâmetro como &#39;pinos&#39; e inserir em um ângulo. </li><li> Posicione o prato preparação no estágio do microscópio, tomando cuidado para assegurar que o PSS não escapa da área Sylgard-alinhados do prato (como isso pode levar a uma grande área a ser coberta no PSS, quando o superfusão começa). </li><li> Ligue a bomba, a fim de superfuse a preparação com PSS. A taxa de 100 ml por hora é freqüentemente empregada. </li><li> Ligar o aparelho aquecedor. </li><li> Coloque os tubos de entrada e saída e sonda de temperatura no prato preparação (aposição cada um para a tira de metal pelo ímã em sua base). A altura da ponta do tubo de saída irá determinar a profundidade do PSS. Tenha cuidado para garantir que a saída é realmente remover PSS (como às vezes não inicialmente). </li><li> Regule a temperatura do aquecedor na unidade para atingir a temperatura desejada, por exemplo, 33-35 C. </li><li> Permitir que o tecido a estabilizar durante pelo menos 10 minutos. </li></ol> Parte 4: Selecção do local para a imagem Exposição à iluminação de excitação vai photobleach o indicador, portanto evite usar por mais de alguns segundos de cada vez. <ol><li> Com um objectivo de baixa potência (10x ou 20x) uso de epifluorescência, emocionante, com uma luz azul, para ver o músculo liso e identificar uma região adequada para monitor. Tente escolher um site baseado em: movimento (que deve ser mínima) eo número de células musculares lisas no campo. &quot;Estruturas&quot; brilhante pode causar um elevado número de &quot;falsos positivos&quot; no algoritmo de detecção de imagem, de modo a evitar sites com grande número de (ex) intercaladas células epiteliais ou fibroblastos. </li><li> Mudar para um objetivo maior potência (40x). </li><li> Gire o palco ou o eixo óptico para que a célula muscular lisa (s) está horizontal (paralela ao eixo ie varredura rápida). </li></ol> Parte 5: A microscopia confocal Os detalhes de como o microscópio confocal é &#39;set up&#39; são específicos para cada tipo de microscópio, masas principais considerações são: velocidade (mínimo de 5 Hz é necessária para a maioria dos transientes de Ca 2 +), a resolução e tamanho de campo (os quais são negociados-off com a velocidade). Alguns dos seguinte protocolo é específico para um SP2 Leica microscópio confocal ereta. Um protocolo típico é: 100 séries de quadros, adquiridos a 5 Hz (256 x 256 pixels; aproximadamente 100 x 100 mm.) Ou 13,5 Hz (256 x 64 pixels; aprox 100 x 25 mm.). A cabeça de leitura definido para mover bi-direcional (para maximizar a velocidade de aquisição) e adquirir a 1000 Hz por linha. <ol><li> Fechar o pinhole para um &quot;disco arejado. </li><li> Definir a potência do laser (488 nm) entre 25 e 35% sobre o AOTF; este valor é um trade-off entre o brilho eo fotobranqueamento. (O último a ser um problema em particular durante as gravações de comprimento.) </li><li> Adquirir seis séries por site, e 4-6 sítios por &#39;tratamento&#39;. É comum a finalidade de monitorar os mesmos seis sítios pré-droga (&quot;controle&quot;, por exemplo) e pós-droga, embora fotobranqueamento significativas pode causar o experimentador a desviar-se disso. </li><li> É essencial com Ca 2 + imagem que &quot;controla o tempo&quot; são executadas. </li></ol> Parte 6: Preparação para a análise <ol><li> Baixe e instale J Imagem de: http://rsb.info.nih.gov/ij/download.html. Baixe a versão específica da plataforma, e então atualizar para a versão mais recente baixando o arquivo mais recente imageJ.jar de http://rsb.info.nih.gov/ij/upgrade/ij.jar, substituindo o arquivo antigo. Utilizadores da Apple Mac: se ele é executado lentamente, certifique-se que você está usando a versão mais recente do Java Virtual Machine (JVM) disponível a partir de Apple (http://www.apple.com/macosx/features/java/). </li><li> Download Excel_writer.jar de: http://rsb.info.nih.gov/ij/plugins/excel-writer.html e instalar na Plugins [diretório] diretório jar&gt;. </li><li> Copie os seguintes arquivos no diretório Plugins: Leica_SP2_Stacker.class; JNCT0.08Release.ijm. Instalar cada um desses scripts usando o Plugins [Menu]&gt; Macros&gt; Instale ... função do ImageJ. </li><li> Nós usamos uma Leica SP2 microscópio confocal, o software (Leica LCS) para que gera cada série como um único &quot;filme&quot; visível dentro do software, mas economiza como quadros individuais. Para reconstruir quadros em série: (i) Certifique-se que todos os &#39;frames&#39; de ser reconstruído estão em uma única pasta (por exemplo &#39;DataFolder&gt; Tiffs&#39;). (Ii) Selecione Plugins [Menu]&gt; Macros&gt; Leica_SP2_Stacker. Selecione o diretório raiz (por exemplo &#39;DataFolder&#39;). Selecione a pasta desejada na lista drop-down (&quot;Tiffs / &#39;, por exemplo). Selecione um diretório de saída ou gerar uma nova (&quot;DataFolder&gt; Stacks &#39;, por exemplo). O script será então reconstruir série de quadros individuais. </li></ol> Parte 7: Correção para o movimento Embora o movimento do site com imagens podem ser minimizados com a fixação boa e tecido uniformemente esticada, alguns órgãos do músculo liso apresentam contrações espontâneas que não pode ser abolido pelo cuidado pinagem sozinho. Aqui nós descrevemos o uso de um algoritmo livremente disponível que alinha ou fósforos frames dentro de uma série. <ol><li> Download &#39;StackReg &quot;(http://bigwww.epfl.ch/thevenaz/stackreg/) e&#39; TurboReg&quot; (http://bigwww.epfl.ch/thevenaz/turboreg/). </li><li> Instale cada um para o diretório Plugins utilizando o Plugins&gt; Macros&gt; Instale ... </li><li> Coloque uma pilha para ser processado (File&gt; Open ...) e depois passar para um quadro que mostra claramente o campo de interesse. Outros quadros serão alinhados a este quadro de referência. </li><li> Plugins&gt; Pilhas&gt; StackReg. Tente cada um dos diferentes &quot;Transformações&quot; (tradução, corpo rígido, rotação Scaled, Affine) para determinar o que é mais eficaz. (Mais detalhes: http://bigwww.epfl.ch/thevenaz/stackreg/) </li></ol> Parte 8: algoritmo de detecção de partículas Para cada &#39;site&#39; com imagens, os fatores variarão que afetam a detecção de transientes de Ca 2 +. Ao medir certas propriedades de cada site (&quot;parâmetros de partículas&quot; - abaixo detalhada), o processo de detecção é facilitada. Assim, para cada local, calcula-se &quot;limite para subtraído&quot;, &quot;limite para a relação&quot; e &quot;limiar limite da célula. <ol><li> Plugins [Menu]&gt; Macros&gt; Instalar ... e selecione &#39;JNCT0.08Release.ijm&#39;. </li><li> Plugins [Menu]&gt; Macros pilha de carga&gt; (atalho: l). Selecionar uma série de partículas e calcular parâmetros: <ol style="list-style:none;"><li> a. Limiar para subtraído (fundo =) </li></ol></li><li> Selecione um ROI retangular sobre o que você acredita ser &#39;background&#39;. </li><li> Medida (atalho: m). Anote MEAN. <ol style="list-style:none;"><li> b. Limite de cálculo para o rácio </li></ol></li><li> Selecione um retangularROI em torno de uma área plana opticamente da célula (s). </li><li> Medida (atalho: m). Nota DESVIO baixo médio e padrão. </li><li> Repita mais duas vezes, ou você pode desenhar três caixas de uma vez pressionando &#39;Shift&#39;. </li><li> Calcular e anotar limite para a relação = (1 + SD / média) x 32, com média de valores das três repetições / sites. <ol style="list-style:none"><li> c. Limiar limite da célula </li></ol></li><li> Image&gt; Pilhas&gt; Z projeto ... Escolha o tipo de projeção: &#39;intensidade média&#39; </li><li> Image&gt; Adjust&gt; Limiar. </li><li> Selecione em preto e branco. </li><li> Definir &quot;em&quot; (barra superior) limite e anotar o valor correspondente (à direita da barra). Apenas os eventos que ocorrem nas regiões negras serão contadas. </li><li> Clique em &#39;reset&#39;. </li><li> Analisar stacks (atalho: 2) </li><li> Selecionar apenas uma série nesta fase, ou seja, o arquivo &#39;primeiro&#39; e &#39;último arquivo &quot;deve ser o mesmo. </li><li> Digite os valores de &#39;limiar para subtraído &quot;,&quot; limite para a relação &quot;e&quot; limiar limite da célula. Deixe as outras configurações em seus valores padrão. </li><li> O algoritmo produz uma vidraça dupla em que a série processada é mostrado à esquerda eo original do lado direito. Cuidado passar por isso para avaliar o número de falsos positivos e as ocasiões em que os eventos, visível a olho nu, não foram detectados. Para obter uma maior precisão na detecção de transientes de Ca 2 +, pode ser necessário ajustar ligeiramente alguns dos &quot;parâmetros de partículas&quot;. Embora o processo pode parecer um pouco &#39;bater e perder &quot;na primeira tentativa, rapidamente fica uma sensação como a que parâmetros são fundamentais. </li><li> Para cada série, o algoritmo produz um arquivo de Excel que detalha características do evento detectado (como área de amplitude, e posição). &quot;Falsos positivos&quot; - identificado por revisar os arquivos de imagem que as saídas de algoritmo (por exemplo, passo 8.17) - pode ser afastado, à mão, a partir deste ficheiro Excel. </li></ol>

<ol>
	<li>Haugland, R. P., Gregory, J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Indicators+for+Ca2+,+Mg2+,+Zn2++and+other+metal+ions.">Indicators for Ca2+, Mg2+, Zn2+ and other metal ions.</a> Handbook of fluorescent probes and research products. , 771-826 (2002).</li><li>Boland, B., Himpens, B., Gillis, J. M., Casteels, R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Relationship+between+force+and+Ca2++in+anococcygeal+and+vas+deferens+smooth+muscle+cells+of+the+mouse.">Relationship between force and Ca2+ in anococcygeal and vas deferens smooth muscle cells of the mouse.</a> Pflugers Arch. 421, 43-51 (1992).</li><li>Hashitani, H., Fukuta, H., Takano, H., Klemm, M. F., Suzuki, H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Origin+and+propagation+of+spontaneous+excitation+in+smooth+muscle+of+the+guinea-pig+urinary+bladder.">Origin and propagation of spontaneous excitation in smooth muscle of the guinea-pig urinary bladder.</a> J Physiol. 150, 273-286 (2001).</li><li>Heppner, T. J., Bonev, A. D., Nelson, M. T. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Elementary+purinergic+Ca2++transients+evoked+by+nerve+stimulation+in+rat+urinary+bladder+smooth+muscle.">Elementary purinergic Ca2+ transients evoked by nerve stimulation in rat urinary bladder smooth muscle.</a> J. Physiol. 564, 201-212 (2005).</li><li>Brain, K. L., Jackson, V. M., Trout, S. J., Cunnane, T. C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Intermittent+ATP+release+from+nerve+terminals+elicits+focal+smooth+muscle+Ca2++transients+in+mouse+vas+deferens.">Intermittent ATP release from nerve terminals elicits focal smooth muscle Ca2+ transients in mouse vas deferens.</a> J. Physiol. 541, 849-862 (2002).</li><li>Fleichman, M., Schneider, T., Fetscher, C., Michel, M. C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Signal+transduction+underlying+carbachol-induced+contraction+of+rat+urinary+bladder+II.+Protein+kinases.">Signal transduction underlying carbachol-induced contraction of rat urinary bladder II. Protein kinases.</a> J. Pharmacol. Exp. Ther. 308, 54-58 (2004).</li><li>Young, J. S., Meng, E., Cunnane, T. C., Brain, K. L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Spontaneous+purinergic+neurotransmission+in+the+mouse+urinary+bladder.">Spontaneous purinergic neurotransmission in the mouse urinary bladder.</a> J. Physiol. 586, 5743-5755 (2008).</li><li>Nelson, M. T., Cheng, H., Rubart, M., Santana, L. F., Bonev, A. D., Knot, H. J., Lederer, W. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Relaxation+of+arterial+smooth+muscle+by+calcium+sparks.">Relaxation of arterial smooth muscle by calcium sparks.</a> Science. 270, 633-637 (1995).</li><li>Th&#233;venaz, P., Ruttimann, U. E., Unser, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+pyramid+approach+to+subpixel+registration+based+on+intensity.">A pyramid approach to subpixel registration based on intensity.</a> IEEE Trans. Image Process. 7, 27-41 (1998).</li></ol>

Foram feitos esforços para minimizar o número de animais utilizados eo seu sofrimento, todos os experimentos foram realizados de acordo com os Animais do Reino Unido (Scientific Procedures) Act 1986 e Comunidades Europeias Directiva do Conselho 86/09/EEC.

Escolha de fluorescentes Ca 2 + indicador Oregon Verde 488-BAPTA 01:00 foi escolhido como o Ca 2 + indicador porque (i) é brilhante em comparação com outros indicadores (por exemplo, Fluo-4 e Verde de cálcio) 1, (ii) é sensível a mudanças fisiológicas na concentração de Ca 2 + com um d K de magnitude similar 1 para o Ca 2 + intracelular concentração [Ca 2 +] i (por exemplo, de canais deferentes 2), (iii) carrega muitas células do músculo liso, permitindo que células do músculo liso de acoplamento a ser monitorado. No entanto, Oregon Verde 488-BAPTA 01:00 é um não-ratioable Ca 2 + indicador, e como tal não pode ser facilmente utilizado para determinar o absoluto [Ca 2 +] i. Além disso, pode também buffer de Ca 2 + se presente em altas concentrações e torna-se saturado com mudanças na amplitude de alta [Ca 2 +] i. Inibição da contratilidade espontânea A contratilidade espontânea de órgãos do músculo liso podem ser reduzidos farmacologicamente, como através do bloqueio da movimentação de Ca 2 + através de L-type Ca 2 + canais (por exemplo: nifedipina 3; diltiazem 4). Note-se que estas drogas irá reduzir muito a amplitude de toda célula Ca 2 + flashes / transientes. Contração dos vasos deferentes resulta de uma combinação de neurotransmissão principalmente purinérgicos e noradrenérgicos. Focal Ca 2 + transientes neste tecido são, no entanto, insensível ao bloqueio dos receptores noradrenérgicos (por exemplo, α adrenoceptor 1, por prazosin 5) para o movimento pode ser reduzida sem afetar focal Ca 2 + transientes. Alternativamente, a contração pode ser impedido &quot;a jusante&quot; através da inibição da miosina quinase de cadeia leve por exemplo, por wortmannin 6. Conclusões Monitoramento Ca 2 + fluorescência em submicron resolução é uma técnica poderosa para estudar os efeitos pós-juncional da liberação de neurotransmissores 5,7 e liberação de Ca 2 + das lojas internas (por exemplo, &quot;faíscas&quot; 8). A análise dos transientes de Ca 2 + utilizando a metodologia descrita aqui é custo-efetiva em comparação com comercialmente disponíveis pacotes de análise de imagem e permite tailor-made análise através de plugins personalizados escritos em Java para ImageJ.

<!DOCTYPE html PUBLIC "-//W3C//DTD XHTML 1.0 Transitional//EN" "http://www.w3.org/TR/xhtml1/DTD/xhtml1-transitional.dtd">
<html xmlns="http://www.w3.org/1999/xhtml" xml:lang="en" lang="en">	
		
		<div>
		<table border="1">
		<thead>
		<tr>
		<th>Material Name</th>
		<th>Type</th>
		<th>Company</th>
		<th>Catalogue Number</th>
		<th>Comment</th>
		</tr>
		</thead>
		<tbody>
		
<tr>
<td>Oregon Green 488 BAPTA-1 AM</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>Invitrogen</td>
<td>O6807</td>
<td>10 x 50 &mu;g</td>
</tr>
<tr>
<td>Pluronic F-127 solution</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>Invitrogen</td>
<td>P3000MP</td>
<td>20% solution in DMSO</td>
</tr>
<tr>
<td>Leica SP2 upright confocal microscope</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>Leica</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>&nbsp;</td>
<tr>
<td>Air table (&#x2018;vibration isolated workstation&#x2019;)</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>Newport</td>
<td>M-VW-3046-OPT-012140</td>
<td>&nbsp;</td>
<tr>
<td>Sylgard 184 elastomer</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>Dow Corning</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>&nbsp;</td>		</tbody>
		</table>
		</div>

focal ca2+ transient detection in smooth muscle

Ca 2 + imagens do músculo liso fornece insights sobre os mecanismos celulares que podem não resultar em mudanças de potencial de membrana, como a liberação de Ca 2 + das lojas internas, e permite que várias células para ser monitorados simultaneamente para avaliar, por exemplo, o acoplamento em tecido sincicial. Subcelulares Ca 2 + transientes são comuns no músculo liso, mas são difíceis de medir com precisão, devido aos problemas causados ​​pela sua ocorrência estocástica, sobre um campo de visão amplo, muitas vezes, em um órgão que propensos a contrair. Para ultrapassar este problema, temos desenvolvido uma série de protocolos de imagem e rotinas de análise de adquirir e, em seguida, analisar, de forma automatizada, a localização, freqüência e amplitude de tais eventos. Embora essa abordagem pode ser aplicada em outros contextos, o nosso próprio trabalho envolve a detecção de locais purinérgicos Ca 2 + transitórios para a localização de liberação do transmissor com resolução submicron. ATP é liberado como um cotransmitter de nervos autônomos, onde se liga a receptores P2X1 sobre o músculo liso do detrusor e canal deferente. Ca 2 + entra no músculo liso, resultando em purinérgicos Neuroefetora Ca 2 + transientes (NSTI). A focal Ca 2 + transientes permitam o monitoramento óptico da liberação de neurotransmissores de uma forma que tem muitas vantagens sobre eletrofisiologia. Além da resolução espacial muito melhorada, a gravação óptica tem a vantagem adicional de permitir a gravação da liberação do transmissor de muitos locais distintos simultaneamente. Além disso, o plano óptico de foco é mais fácil de manter ou corrigir durante a gravação longa série que é o reposicionamento de um microeletrodo intracelular afiada. Em resumo, um método para geração de imagens de Ca 2 + fluorescência é descrito que detalha a preparação do tecido, e na aquisição e análise de dados. Destacamos o uso de vários scripts para a análise de Ca 2 +, tais transientes.

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Focal Ca2+ Transient Detection in Smooth Muscle

Detalhes métodos de alta resolução Ca<sup&gt; 2 +</sup&gt; Imagem do músculo liso dentro órgãos isolados, incluindo: preparação do tecido de aquisição de imagem e análise de dados.

Focal Ca 2 + Detecção de transitórios no músculo liso

Ca2+ imaging of smooth muscle provides insight into cellular mechanisms that may not result in changes of membrane potential, such as the release of Ca2+ ...

focal-ca2-transient-detection-in-smooth-muscle

Research

JoVE Journal

Biology

Focal Ca2+ Transient Detection in Smooth Muscle

11.1K visualizações.  University of Oxford. Detalhes métodos de alta resolução Ca 2 + Imagem do músculo liso dentro órgãos isolados, incluindo: preparação do tecido de aquisição de imagem e análise de dados.