Для просмотра этого контента требуется подписка на Jove Войдите в систему или начните бесплатную пробную версию.

В этой статье

  • Резюме
  • Аннотация
  • Введение
  • протокол
  • Результаты
  • Обсуждение
  • Раскрытие информации
  • Благодарности
  • Материалы
  • Ссылки
  • Перепечатки и разрешения

Резюме

Преподавание биологических наук может быть более стимулирующим для студентов за счет использования экспериментов. В этой рукописи представлены два различных, но взаимодополняющих протокола, которые могут быть использованы в классе, чтобы побудить студентов формулировать и проверять гипотезы, связанные с высококалорийными диетами, голоданием и старением.

Аннотация

Caenorhabditis elegans (C. elegans) - это прозрачная, непаразитическая нематода с простой биологией, что делает ее отличным инструментом для преподавания биологических наук путем окрашивания клеток или их молекулярного содержимого. Краситель Люголя (раствор йода-йодида калия) широко используется в биохимии для окрашивания запасов гликогена. В этом контексте можно наблюдать различия между кормящими и голодными животными, помимо эффектов различных условий, таких как разный рацион и уровень кислорода. Эриоглауцин – это синий краситель, который указывает на потерю кишечного барьера. Когда кишечный барьер не поврежден, синий краситель окрашивается внутри просвета; Однако, когда эта целостность нарушается, краситель просачивается в полость тела. Используя стереомикроскоп или микроскоп, учителя могут продемонстрировать физиологические и биохимические изменения или побудить учащихся задать научный вопрос, выдвинуть гипотезу и проверить свою гипотезу с помощью этих анализов. В настоящем протоколе описаны два метода окрашивания у C. elegans , которые могут быть легко выполнены студентами.

Введение

Преподавание биологических наук в старших классах – это постоянная задача. Примечательно, что доступ к технологиям и их использование привели к важным достижениям в процессе преподавания и обучения, однако такие инструменты, как чат-боты с искусственным интеллектом, затрудняют рационализацию и поиск доказательств из-за простых (и иногда неправильных) полученных ответов. В связи с этим использование научного метода с практическими экспериментами в рамках исследовательского подхода в классе является важной стратегией для развития или стимулирования критического мышления, творчества и технических навыков

протокол

ПРИМЕЧАНИЕ: Бактерии Escherichia coli OP50 (E. coli OP50) и штаммы дикого типа Bristol N2 могут быть получены от CGC, Университет Миннесоты, США или за счет пожертвования в лаборатории C. elegans . Для безопасности исследователей крайне важно использовать средства индивидуальной защиты. Несмотря на то, что концентрации таких реагентов, как гипохлорит и гидроксид натрия, низкие, важно носить рекомендованные СИЗ, как указано в рукописи, чтобы свести к минимуму любые потенциальные риски, связанные с этими химическими веществами.

1. Содержание гликогена

  1. Подг....

Результаты

Анализ содержания гликогена обеспечивает надежный и быстрый метод скрининга различных условий тестирования, таких как сравнительные исследования различных штаммов, которые могут влиять на синтез или деградацию гликогена. В этом исследовании черви L4 подвергались т?.......

Обсуждение

Таким образом, этот протокол обеспечивает качественную оценку содержания гликогена в отдельных червях C. elegans с использованием окрашивания по Люголю: прямой, надежный и быстрый анализ. Окрашивание по методу Люголя представляет собой безметочный и неинвазивный п?.......

Раскрытие информации

Авторам нечего раскрывать.

Благодарности

D.S.A выражает благодарность за финансирование от Conselho Nacional de Pesquisa e Desenvolvimento (CNPq/Brazil), номер гранта #301808/2018-0, #313117/2019-5, Fundação de Amparo à Pesquisa do Estado do Rio Grande do Sul (FAPERGS/Brazil), номер гранта, 21/2551-0001963-8, Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior (CAPES, Финансовый код 001 для N.S.J и A.C.S)

....

Материалы

NameCompanyCatalog NumberComments
1.5 mL microtubes Local suppliers-
37-degree incubatorKS 4000i 97014-816
50 mL conical tubeLocal suppliers-
6 cm Petri plates Local suppliers-
Agar bacteriologicalDinâmica Química Contemporânea Ltda.9002-18-0
C. elegans Bristol N2 (wild type)Caenorhabditis elegans Genetic Center (CGC, Minnesota, USA)-
CaCL2Dinâmica Química Contemporânea Ltda.10035-04-8
CholesterolSigma-Aldrich Brasil Ltda57-88-5
D-(+)-Glucose anhydrous Neon50-99-7
Distilled H2OLocal suppliers-
Erioglaucine disodium saltSigma-Aldrich Brasil Ltda3844-45-9
Escherichia coli OP50Caenorhabditis elegans Genetic Center (CGC, Minnesota, USA)-
Flow hoodMylabor
IncubatorPanasonic Healthcare company of North America, MIR-254-PA.-
KH2PO4Dinâmica Química Contemporânea Ltda.7778-77-0
Levamisole hydrochlorideRIPERCOL L 150F-
Lugol solutionSigma-Aldrich Brasil LtdaL6146
MgSO4SynthS1063-01-AH
MicrocentrifugeCentrifuge 5425R Eppendorf SE, Germany
Na2HPO4Dinâmica Química Contemporânea Ltda.7558-79-4
NaClDinâmica Química Contemporânea Ltda.7647-14-5
NystatinSigma-Aldrich Brasil LtdaN6261
Peptone bacteriologicalêxodo científica91079-38-8
StereomicroscopeLeica S8 Apo Stereomicroscope (São Paulo, Brazil)
Streptomycin SulfateEstreptomax-

Ссылки

  1. Thorp, H. H. ChatGPT is fun, but not an author. Science. 379 (6630), 313 (2023).
  2. Lemons, M. L. An inquiry-based approach to study the synapse: Student-driven experiments using C. elegans. J Undergrad N....

Перепечатки и разрешения

Запросить разрешение на использование текста или рисунков этого JoVE статьи

Запросить разрешение

Смотреть дополнительные статьи

Caenorhabditis elegans

This article has been published

Video Coming Soon

JoVE Logo

Исследования

Образование

О JoVE

Авторские права © 2025 MyJoVE Corporation. Все права защищены