Для просмотра этого контента требуется подписка на Jove Войдите в систему или начните бесплатную пробную версию.

В этой статье

  • Резюме
  • Аннотация
  • Введение
  • протокол
  • Результаты
  • Обсуждение
  • Раскрытие информации
  • Благодарности
  • Материалы
  • Ссылки
  • Перепечатки и разрешения

Резюме

В этом протоколе описывается применение хирургической техники, используемой для переноса клонированных эмбрионов свиней с помощью лапаротомии у свинок.

Аннотация

Этот протокол направлен на демонстрацию хирургической техники переноса клонированных эмбрионов свиньи в яйцевод, метода, широко используемого в производстве генетически модифицированных свиней для биомедицинских исследований. Девяти свинкам была проведена гормональная синхронизация и лапаротомия для переноса клонированных эмбрионов, полученных путем переноса ядра соматических клеток (SCNT) на стадии до 4 клеток на 2-й день в яйцевод. Гестационная диагностика проводилась с помощью ультразвукового исследования через 30 дней после операции. У шести из девяти оперированных свинок при ультразвуковом исследовании были обнаружены признаки беременности. Однако, поскольку не было никакого прогресса в развитии плода, оцененного с помощью эхографии, свинкам было проведено вскрытие через 60 дней для сбора биологического материала и оценки репродуктивной системы. Спайки наблюдались в рогах матки, яичниках и яйцеводах. Из просвета матки двух усыпленных свинок были получены одна и четыре эмбриональные структуры с гестационным возрастом от 12 до 20 дней. Несмотря на отсутствие живых поросят, вероятно, объясняющееся низкой эффективностью переноса клонированных эмбрионов свиней, на которую влияют различные факторы, в том числе количество и качество переносимых эмбрионов, представленная хирургическая методика оказалась быстрой и безопасной.

Введение

Свиньи являются отличной экспериментальной моделью для биомедицинских исследований из-за их анатомического, физиологического и генетического сходствас человеком. Эти животные часто использовались в исследованиях, связанных с ксенотрансплантацией, с целью получения органов, клеток или тканей, которые способствуют низкому риску отторжения при трансплантации человеку. Исследования в области ксенотрансплантации направлены на увеличение поставок органов для трансплантации человеку, тем самым сокращая лист ожидания пациентов2.

Производство свин....

протокол

Данное исследование было одобрено Этическим комитетом по использованию животных в научных исследованиях Колледжа ветеринарной медицины и зоотехнии Университета Сан-Паулу, протокол No 6088030523. Девять семимесячных свинок из свинофермы Água Branca, расположенной в городе Иту, штат Сан-Паулу, Бразилия, были использованы сразу после обнаружения второй течки9. Подробная информация о реагентах и оборудовании, использованном в исследовании, приведена в Таблице материалов.

1. Подготовка животных

  1. Голодайте животных в течение 12 часов и ограничьте ....

Результаты

Целью данной статьи является демонстрация лапаротомической операции по переносу клонированных эмбрионов в яйцевод свинок. Все животные оставались в адекватной анестезиологической плоскости, без каких-либо интраоперационных инцидентов и осложнений во время восста.......

Обсуждение

Описанный хирургический метод ранее был выполнен другими исследовательскими группами, работающими с производством клонированных свиней или генетически модифицированных клонированных свиней, с сообщениями о рождении после внедрения этой методики 15,16,1.......

Раскрытие информации

Ни один из авторов не раскрывает какой-либо конфликт интересов

Благодарности

Мы хотели бы поблагодарить Ветеринарную больницу для лошадей и Ветеринарную больницу жвачных животных Колледжа ветеринарной медицины Университета Сан-Паулу (FMVZ/USP), Сан-Паулу, Бразилия, FAPESP (грант 2022/11459-3, Исследовательский фонд Сан-Паулу), EMS Pharma, CNPq (грант 405254/2022-9) и свиноферму Água Branca, Иту, Сан-Паулу, Бразилия.

....

Материалы

NameCompanyCatalog NumberComments
0.25 mL strawgeneric-Surgical material
1 mL syringeDescarpack341001Surgical material
10 mL syringeDescarpack324601Surgical material
20 mL syringeDescarpack324801Surgical material
3 mL syringeDescarpack324201Surgical material
5 mL syringeDescarpack324401Surgical material
60 mL syringeDescarpack323201Surgical material
9 mm endotracheal tubeRusch112482-000090Surgical material
Allis forcepsgeneric-Surgical instrument
Amox LAJA Saúde AnimalMAPA registration: 8.781/2004Pharmaceutical drug
Bakhaus forcepsgeneric-Surgical instrument
Catheter 20GDescarpack362401Catheter for intravenous access
CetaminAgener UniãoMAPA registration: SP-000292-5.000011 Anesthetic
Conductive clinical gelRMCANVISA registration: 80122200013Surgical material
Dipyrone D-500ZoetisMAPA registration: SP0000728-46Pharmaceutical drug
Disposable scalpel n. 22WiltexANVISA registration: 10150470565Surgical instrument
Disposable sterile sponge-brushRioquimica7.89778E+12Surgical asepsis
Easy-Scan:GoIMVESCG01Ultrasound
Endozime AW PlusRuhof34514Detergent for surgical instruments
Fentanil (Fentanest)CristáliaANVISA registration: 1029800810159Anesthetic
Gosset retractorgeneric-Surgical instrument
Halstead-mosquito hemostatic forcepsgeneric-Surgical instrument
Healing ointment - Unguento PearsonPearson SAMAPA registration: SP0000094-16Pharmaceutical drug
hydrogen peroxide solutionRioquimicaANVISA registration: 218690015Surgical material
IsofluoraneBiochimicoANVISA registration: 100630222Anesthetic
IV Drip set extensorgeneric-Fluid therapy
IV Macro drip setDescarpack410301Fluid therapy
Lactofur (ceftiofur)Ourofino SAMAPA registration: SP0000051-50Pharmaceutical drug
Laringoscope--Surgical instrument
Maxicam 2%Ourofino SAMAPA registration: SP0000051-69Pharmaceutical drug
Micropore adhesive 5 cm x 10 cm generic1530Surgical material
MidazolamHipolaborANVISA registration: 1134301430035Anesthetic
Multi-Way IV Infusion SetDescarpack413201Fluid therapy
Needle 40 mm x 1.2 mmDescarpack353601Sterile needle for applying medicines and anesthetics.
Needle 40 mm x 1.6 mmWiltexANVISA registration: 10150470664Sterile needle for applying medicines and anesthetics.
Needle holdergeneric-Surgical instrument
Nylon 2 suture trheadShalon MedicalN502CTI40Surgical material
Ordinary pengeneric-Regular pen for taking notes
Physiological solution 0.9% 500 mL bagJP FarmaMS:1.0491.0070Fluid therapy
Polyglycolic acid 2 suture threadAtramatG4099-75HSurgical material
Potassium chlorideSamtecANVISA registration: 1559200010139Parenteral drug
Procedure glovesDescarpack122401Personal Protective Equipment (PPE)
Propofol (Provive)União QuímicaANVISA registration: 1049714490057Anesthetic
Ringer lactate solution 500 mL bagJP FarmaMS:1.0491.0061Fluid therapy
Riohex 0.5% clorexidine alcohol solutionRioquimica218690356Surgical asepsis
Riohex 2% clorexidine solution with surfactantRioquimica218690356Surgical asepsis
Scalp 21 GDescarpack421201Surgical material
Shoe coversgeneric-Personal Protective Equipment (PPE)
Sterile compressesCremerANVISA registration: 10071150065Surgical material
Sterile gauze padProcitexANVISA registration: 80245210083Surgical material
Sterile surgical drapes 140 cm x 90 cm Venkuri7010003Surgical material
Sterile surgical drapes 150 cm x 190 cm PolarFixF00208Surgical material
Sterile surgical glovesMucamboCA: 39.317Personal Protective Equipment (PPE)
Stethoscopegeneric-Surgical equipment
Surgical capDescarpack93201Personal Protective Equipment (PPE)
Surgical gownDescarpack231101Personal Protective Equipment (PPE)
Surgical maskDescarpack110701Personal Protective Equipment (PPE)
Surgical scissors blunt-bluntgeneric-Surgical instrument
Surgical scissors sharp-sharpgeneric-Surgical instrument
Surgical staplerTradevet-Surgical material
Tekbond super glueTek Bond78072720030Surgical material
Thermometergeneric-Surgical equipment
Three Way StopcockSolidor374Surgical material
Tramadol hydroclorideAgener UniãoMAPA registration: SP-000292-5.000002Anesthetic
Transparent film dressingSkinupperANVISA registration: 82307460014Surgical material
Waterproof adhesive 10 cm x 4.5 cm generic364828Surgical material

Ссылки

Перепечатки и разрешения

Запросить разрешение на использование текста или рисунков этого JoVE статьи

Запросить разрешение

Смотреть дополнительные статьи

This article has been published

Video Coming Soon

JoVE Logo

Исследования

Образование

О JoVE

Авторские права © 2025 MyJoVE Corporation. Все права защищены