Gilts'te Laparotomi ile Embriyo Transferi Ameliyatı

Özet

Bu protokol, klonlanmış domuz embriyolarını solungaçlar halinde laparotomi yoluyla transfer etmek için kullanılan cerrahi tekniğin uygulanmasını açıklar.

Özet

Bu protokol, biyomedikal araştırmalar için genetiği değiştirilmiş domuzların üretiminde yaygın olarak kullanılan bir yöntem olan klonlanmış domuz embriyolarının yumurta kanalına aktarılması için cerrahi tekniği göstermeyi amaçlamaktadır. Somatik hücre nükleer transferi (SCNT) ile üretilen klonlanmış embriyoların 2. günde 4 hücreye kadar olan aşamalarda yumurta kanalına transferi için dokuz solungaça hormonal senkronizasyon ve laparotomi uygulandı. Gebelik tanısı transplantasyon ameliyatından 30 gün sonra ultrason muayenesi ile konuldu. Ameliyat edilen dokuz yaldızdan altısı ultrason muayenesinde hamilelik belirtileri gösterdi. Bununla birlikte, ekografi ile değerlendirildiği gibi fetal gelişimde herhangi bir ilerleme olmadığından, biyolojik materyalin toplanması ve üreme sisteminin değerlendirilmesi için solungaçlara 60. günde nekropsi yapıldı. Rahim boynuzlarında, yumurtalıklarda ve yumurta kanallarında yapışıklıklar gözlendi. Ötenazi yapılan solungaçların ikisinin uterus lümeninden, gebelik yaşları 12 ila 20 gün arasında değişen bir ve dört embriyonik yapı elde edildi. Muhtemelen transfer edilen embriyoların sayısı ve kalitesi de dahil olmak üzere çeşitli faktörlerden etkilenen klonlanmış domuz embriyolarının transferinin düşük verimlilik oranına atfedilen canlı domuz yavrularının olmamasına rağmen, sunulan cerrahi tekniğin hızlı ve güvenli olduğu kanıtlanmıştır.

Giriş

Domuzlar, insanlara anatomik, fizyolojik ve genetik benzerlikleri nedeniyle biyomedikal araştırmalar için mükemmel bir deneysel modeldir¹. Bu hayvanlar, insanlara nakledildiğinde düşük reddedilme riskini destekleyen organlar, hücreler veya dokular üretmek amacıyla ksenotransplantasyon ile ilgili araştırmalarda sıklıkla kullanılmıştır. Ksenotransplantasyon araştırması, insan nakli için organ arzını artırmayı ve böylece hastaların bekleme listesini azaltmayı amaçlamaktadır².

Ksenotransplantasyon için domuz üretimi, genetik olarak düzenlenmiş domuz hücrelerinden klonların üretimi de dahil olmak üzere birkaç adımı içerir. Genetiği değiştirilmiş klonlanmış embriyoların in vitro üretiminden sonra, embriyolar, uterus fizyolojisini yeni conceptus^3'ün alımı ve gebeliği için hazırlamak için senkronize bir kızgınlık döngüsü ile bir dişi domuzun üreme sistemine aktarılır.

Domuzlarda embriyo transferi non-invaziv veya invaziv yöntemlerle yapılabilir⁴. Non-invaziv yöntemler arasında herhangi bir cerrahi müdahale gerektirmeyen transservikal transfer yer almaktadır. Bununla birlikte, bu yöntem daha sonraki gelişim aşamalarında (yani morula veya blastosist aşamaları) embriyoların transferi ile sınırlıdır ve kateter yerleştirme yerinin veya embriyo birikiminin kesin olarak belirlenmesine izin vermez⁵. Laparoskopi ve laparotomi, invaziv embriyo transferi yöntemleri olarak kabul edilir. Laparoskopi daha az invazivdir ancak spesifik ve maliyetli ekipman gerektirir ve üreme yapılarını manipüle etmedeki zorluk ve kullanılan kateter tipi gibi çeşitli faktörlere bağlı olarak etkinliği önemli ölçüde değişir (%20'den azdan %80'in üzerine kadar) ^4,6. Bu nedenle, laparoskopi ile transfer, laparotomi ile cerrahi transfer yöntemlerine kıyasla hala daha az verimlidir⁴.

Dişi domuzlarda laparotomi yoluyla embriyo transferi ameliyatı nispeten basit ve hızlı bir işlemdir ve tipik olarak yaklaşık 30 dakika sürer. Ancak inhalasyon anestezi aparatı ile donatılmış bir cerrahi merkezde ve uzman bir ekiple yapılmalıdır. Ticari domuz türleri (Landrace, Large White veya bunların melezleri gibi) için, hayvanların hatırı sayılır ağırlığı (yaklaşık 130-150 kg) nedeniyle yaldızları kaldırmak için vinçler ve geniş, sağlam bir ameliyat masası gibi özel ekipmanlar gereklidir.

Ameliyatın başarılı olması için embriyoların önceden gelişim aşamaları açısından değerlendirilmesi gerekir. 4 hücreye kadar olan embriyoların rahim tüpüne transfer edilmesi önerilir. Morula ve blastosist gibi 4 hücrenin ötesindeki aşamalardaki embriyolar rahim boynuzuna^{transfer edilmelidir 7,8}.

Dünya çapındaki araştırma grupları, genetiği değiştirilmiş klonlanmış domuz embriyolarının üretimini ve cerrahi transferini gerçekleştiriyor olsa da, bu prosedürü videolar aracılığıyla gösteren iyi tanımlanmış protokoller hala yoktur. Bu yaklaşım, gebeliğin başarısı için çok önemlidir, çünkü teknik, tubal ostiumun lokalizasyonunu ve embriyoları içeren pipetin yerleştirilmesini içeren, embriyoların yumurta kanalının tam konumuna hassas bir şekilde yerleştirilmesini gerektirir. Bu teknik, tüm prosedürün açıklayıcı videoları ile daha iyi anlaşılabilir. Bu nedenle, bu makale, ksenotransplantasyon veya diğer ilgili amaçlar için kullanılacak genetiği değiştirilmiş domuzların gelecekteki üretimi için önemli bir ön koşul olan klonlanmış embriyoların solungaçların yumurta kanalına aktarılması için laparotomi ameliyatını göstermeyi amaçlamaktadır.

Protokol

Bu çalışma, São Paulo Üniversitesi Veterinerlik ve Hayvan Bilimleri Fakültesi Araştırmalarında Hayvan Kullanımı Etik Kurulu, 6088030523 numaralı protokol tarafından onaylanmıştır. Brezilya'nın São Paulo eyaleti, Itu şehrinde bulunan Água Branca çekirdek domuz çiftliğinden dokuz yedi aylık yaldız, ikinci kızgınlık tespitinden hemen sonra^{kullanıldı 9}. Çalışmada kullanılan reaktiflerin ve ekipmanların detayları Malzeme Tablosunda listelenmiştir.

1. Hayvan hazırlama

1. Cerrahi işlemden önce hayvanları 12 saat aç bırakın ve su erişimini 4 saat kısıtlayın.
2. 40 mm x 12 mm'lik bir iğne kullanarak, aynı 50 mL şırıngada 10 mg / kg ketamin ve 0.2 mg / kg midazolam hazırlayın. İlaç uygulamasını kolaylaştırmak, hayvandan güvenli bir mesafeyi korumak ve serbestçe hareket etmesine izin vermek için şırıngayı bir IV uygulama setine takın.
3. Anestezik öncesi ilacı, dış kulak kanalına kaudal olan trapezius kasına intramüsküler enjeksiyon yoluyla uygulayın.
4. Kulak damarını 20 G'lik bir kateter ile kanüle edin ve 10 mL / kg / s oranında% 0.9 NaCl çözeltisi ile intraoperatif sıvı tedavisi için bir makrodrip uygulama setine bağlayın.
5. İntravenöz olarak 4 mg / kg propofol ile anestezi indükleyin (kurumsal olarak onaylanmış protokolleri izleyerek).
6. Bir laringoskop ve bir manşet¹⁰ ile 9 numara orotrakeal tüp kullanarak hayvanın orotrakeal entübasyonunu gerçekleştirin.
7. % 1.5 ila% 2 izofluran inhalasyonu ile anesteziyi koruyun. Ek olarak, dakikada 100 ila 120 atış arasında tutulması gereken kalp atış hızı, %99 ile %100 arasında tutulması gereken oksijen satürasyonu, kas gevşemesi, hareket yokluğu ve reflekslerin değerlendirilmesi gibi fizyolojik parametreleri değerlendirerek anesteziyi izleyin.
   NOT: Vücut ısısı da 37.5-38.5 °C arasında kalacak şekilde izlenmeli ve kontrol edilmelidir. Gerektiğinde, parametrelerin kontrolünü sağlamak için izoflurana ek olarak propofol kullanılabilir. Fentanil hidroklorür, her 20 dakikada bir 0.02 mg / kg'lık bir dozda analjezik olarak uygulanmalıdır. Tüm parametreler her 5 dakikada bir kaydedilmelidir.
8. Perioperatif analjezi tek doz 0.002 mg / kg fentanil intravenöz ve 4 mg / kg tramadol hidroklorür ile intramüsküler olarak gluteal veya trapezius kasına uygulayın.
9. Kalp atış hızının intraoperatif izlenmesi için kardiyak elektrotları torasik bölgeye yerleştirin. Her 5 dakikada bir kalp atış hızını, rektal sıcaklığı ve oksijen doygunluğunu kaydedin.

2. Cerrahi prosedür

1. Yaldızı sırt yaslanacak şekilde ameliyat masasına yerleştirin.
2. Cerrahi alanın kontaminasyonunu en aza indirmek için hayvanın bacaklarını prosedürel eldivenlerle örtün.
3. Cerrahi bir kesme makinesi kullanarak sondan bir önceki meme bezi çifti arasında ventral kaudal abdominal epilasyon işlemi gerçekleştirin.
4. Klorheksidin emdirilmiş antiseptik bir fırça ile preoperatif cilt antisepsisi yapın, göbek skar bölgesinden son meme bezi çiftine kadar dairesel hareketler yapın. Klorheksidini temiz, nemli bir kompres ile çıkarın.
5. Cerrahın ve asistanın cerrahi antisepsi yaptığından ve ameliyat için steril cerrahi önlük ve eldiven giydiğinden emin olun.
   NOT: Hayvan, ameliyat bölgesinden ayrı bir hazırlık alanında ameliyat için hazırlanmalıdır.
6. Ameliyat masasını, Malzeme Tablosunda listelenen uygun ve önceden sterilize edilmiş aletlerle hazırlayın.
7. Steril gazlı bez ve klorheksidin antiseptik kullanarak, bölgeyi kılçık şeklinde temizleyerek, kesi bölgesinden başlayarak ve yanal olarak genişleyerek son cerrahi alan antisepsisini gerçekleştirin.
8. Bu işlemi klorheksidin antiseptik ile üç kez tekrarlayın ve ardından işlemi alkolik klorheksidin ile tekrarlayın.
9. Hayvanı steril bir cerrahi örtü ile tamamen örtün ve makas kullanarak, örtü fenestratize edilmemişse, cerrahi örtüde yaklaşık 10 x 20 cm² dikdörtgen bir açıklık oluşturun.
10. Cerrahi örtüyü sondan bir önceki kasık meme bezi çiftinin üzerine yerleştirin. Cerrahi örtüyü hayvanın derisine sabitlemek için 4 Backhaus kelepçesi yerleştirin.
11. Cildi bir neşter ile kesin ve yaklaşık 10 cm uzunluğunda bir kesi oluşturun.
12. Hemostatik forseps ve/veya emilebilir sütür boyutu 2 ile deri altı damarların hemostazını elde edin.
13. Deri altı dokusunu parmaklarınızla veya ince uçlu makas yardımıyla inceleyin, karın kaslarındaki linea alba'ya ulaşmak için kesiyi derinleştirin.
    NOT: Linea alba'yı daha sert ve lifli bir alan olarak hissetmek için karnın orta hattını palpe edin; Rectus abdominis kaslarının ayrılmasını gözlemleyin ve linea alba'yı doğru bir şekilde tanımlamak için diseksiyon sırasında doku kıvamındaki değişikliği not edin¹¹.
14. Allis forseps ile kas sistemini kavrayın ve bir neşter ile linea alba'da bir kesi yapmak için kaldırın.
15. Yapışıklıkların varlığını değerlendirmek için işaret parmağını insizyona sokun. Diğer organlara ve alttaki yapılara zarar vermemek için kesiği linea alba kaudal ve kraniyal olarak künt/künt veya ince/künt makasla dikkatlice uzatın.
16. Rahim boynuzlarını ve/veya yumurtalıkları bulmak ve dışlamak için cerrahın bir elinin karın boşluğuna sokulabilmesi için yeterli uzunlukta bir kesi yapın. İşlem sonunda karın boşluğuna girişi ve kas sisteminin tek bir tabaka halinde dikilmesini kolaylaştırmak için bir Gosset ekartörü kullanılabilir.
17. Rahim boynuzlarından biri yumurtalıklardan önce bulunuyorsa, rahim boynuzunun ucuna ve ipsilateral yumurtalığa ulaşana kadar nazikçe takip edin. Bu prosedür sırasında, rahim içinde gebeliği tehlikeye atabilecek sıvı varlığını değerlendirin.
18. Yumurtalığı bulduktan sonra, yavaşça çekin ve dikkatlice açığa çıkarın. Yaldızın senkronizasyonunun beklendiği gibi olup olmadığını değerlendirmek için yumurtlama öncesi foliküller, hemorajik corpora lutea, siklik corpora lutea ve corpus albicans'ın varlığını değerlendirin.
19. Yumurtalığı kaplayan uterus tüpünün fimbriyalarını nazikçe çıkarın, mukozasını temizleyin ve uterus tüpünün ostiumunu bulun.
    NOT: Cerrah fimbriaların ostiumunu tanımlamakta zorlanırsa, embriyoları içeren Tomcat kateterini yerleştirmek için kan damarlarını delmekten kaçınarak yuvarlak gövdeli bir dikiş iğnesi ile yumurta kanalının ampullası üzerinde bir cep yapılabilir.
20. Embriyoları içeren bir Tomcat kateterini, uterus tüpünün ampulla bölgesine ulaşana kadar fimbriaların ostiumuna dikkatlice yerleştirin.
21. Embriyo içeren sıvıyı uterus tüpüne itmek için Tomcat kateterine 1 mL'lik bir şırınga takın. Yumurtalığı fimbriae ile örtün ve karın boşluğuna geri koyun.
22. Kontralateral uterus boynuzunu ve yumurtalığı bulun ve 2.17-2.21 adımlarını tekrarlayın.
23. Karın boşluğu içindeki yapıları yeniden konumlandırın ve abdominorafiye başlamadan önce yapışmaları önlemek için 1 L salin solüsyonu veya ısıtılmış Ringer laktat solüsyonu (39 °C) ekleyin.
24. Karın kaslarını emilebilir sütür ile 2 numara "X" dikişte (Sultan) dikişsiz dikişle dikin.
25. Emilebilir sütür boyutu 2 kullanılarak sürekli bir yatak sütürü ile cilt altı dokusuna yaklaştırın.
26. Cildi 2 numara naylon sütürle kesintili basit dikişler, cerrahi zımbalar veya etil-siyanoakrilat yapıştırıcı ile kapatın. Bu prosedürde yapıştırıcı kullanımını tercih ettik.
27. Cerrahi yarayı hidrojen peroksit içine batırılmış gazlı bezle temizleyin ve cerrahi yapıştırıcının cerrahi yara üzerine sabitlenmesini arttırmak için bir kompres ile kurulayın. Rifamisin veya Pearson merhemi uygulayın, gazlı bezle örtün ve son olarak cerrahi yapıştırıcı uygulayın.
    NOT: Yara 5 gün boyunca pansuman ile kapalı kalmalıdır.

3. Ameliyat sonrası bakım

1. Luna ve ^ark.12 tarafından önerilen ölçeğe göre, hayvanları en az önümüzdeki 3 ardışık gün boyunca karakteristik klinik ağrı belirtileri açısından değerlendirin.
   NOT: Bu ölçek, duruş, etkileşim ve çevreye ilgi, aktivite, iştah ve etkilenen bölgeye dikkat gibi farklı seviyelerde ağrı yaşarken domuzlar tarafından sergilenen farklı davranışlara dayanmaktadır. Puan, değerlendirilen her parametre için sergilenen davranış türüne bağlı olarak 0 ile 3 arasında değişir. Değerlendirmenin sonunda, tüm puanların toplamı hayvanın yaşadığı ağrının yoğunluğunu yansıtır, burada 0 ağrıyı temsil etmez ve 18 çok yoğun ağrıyı^{temsil eder 12}.
2. Ağrıyı, enflamatuar süreçleri ve enfeksiyonu önlemek için postoperatif bakım olarak 3 gün boyunca günde bir kez intramüsküler olarak (gluteal veya servikal kasta) tek bir doz 15 mg / kg amoksisilin ve 0.4 mg / kg% 2 meloksikam uygulayın.
   NOT: Kullanılan ağrı ölçeğinde ağrı skoru 6'ya eşit veya daha büyükse (0'dan 18'e kadar puan), anti-enflamatuar ve antibiyotiğe ek olarak günde bir kez kas içine (gluteal veya servikal kasta) 5.000 mg / hayvan sodyum dipiron uygulayın. Alternatif olarak, yerel IACUC kılavuzlarında belirtildiği gibi analjezi gerçekleştirin.
3. Ameliyattan sonraki 6. günde, %2 alkolik klorheksidin solüsyonuna batırılmış gazlı bezle yara temizliği için cerrahi yapıştırıcıyı çıkarın ve 10. güne kadar topikal Pearson merhemi uygulayın, bu süre içinde dikiş çıkarılması veya kullanılıyorsa cerrahi zımbaların çıkarılması önerilir.

4. Gebeliğin ultrasonografik gebelik tanısı

1. Embriyo transferi ameliyatından 30 gün sonra ultrason cihazı (frekans aralığı 4.5 ila 8.5 MHz) ile transabdominal gebelik ultrasonografik değerlendirmesi yapın.
2. Proba ultrason jeli uygulayın ve mediale bakacak şekilde kasık karın bölgesinin yakınına yerleştirin.
   NOT: Rahim lümenindeki sıvı nedeniyle yuvarlatılmış yankısız embriyonik veziküllerin görselleştirilmesi gebeliği gösterir. Rahim içi sıvının görüntülenememesi veya embriyonik veziküllerin tanımlanması olmadan rahim içi sıvının varlığı, gebeliğin olmadığını düşündürür.

5. Hayvanların ötenazisi

NOT: Ultrasonografik incelemede gebelik yaşına karşılık gelen büyüklük ve görünümde fetüsler sunmayan solungaçlara ötenazi yapın.

1. 40 mm x 12 mm'lik bir iğne kullanarak, intravenöz uygulama setine bağlı aynı 50 mL şırıngada 15 mg / kg ketamin ve 2 mg / kg midazolam çekin ve preanestezik ilaç olarak dış kulak kanalına kaudal servikal bölgedeki trapezius kasına intramüsküler olarak uygulayın.
2. Auriküler veni 20 G'lik bir kateter ile kanüle edin ve bradikardi oluşana kadar bir bolusta intravenöz olarak 4 mg / kg propofol ile anestezi uygulayın (kurumsal olarak onaylanmış protokolleri izleyerek).
3. Daha sonra, intravenöz olarak 10 ila 20 mL% 19.1 potasyum klorür uygulayın. Kardiyak bölgeye bir stetoskop yerleştirerek solunum hareketlerinin yokluğunu, soluk mukoza zarlarını, kornea refleks kaybını ve kalp atışlarının yokluğunu gözlemleyerek kardiyopulmoner arresti onaylayın.
4. Nekropsiye edilmiş dişilerden¹³ her türlü intrauterin içeriği (embriyonik doku, sıvı veya mukoza salgıları) toplayın ve olası patojenleri tespit etmek için mikrobiyolojik analiz ve ayrıca klonların genotipik karakterizasyonu için (gerekirse) iletin. Corpora lutea, yumurtalık kistleri, anormal sekresyonlar ve uterus, yumurtalıklar ve yumurta kanallarında yapışıklıkların oluşumunu görsel olarak kontrol edin¹⁴.

Sonuçlar

Bu makale, klonlanmış embriyoların solungaç kanalına transfer edilmesi için yapılan laparotomi cerrahisini göstermeyi amaçlamaktadır. Tüm hayvanlar, anestezi iyileşmesi sırasında herhangi bir intraoperatif olay veya komplikasyon olmaksızın yeterli bir anestezi düzleminde kaldı. Ameliyat bittikten sonra yaldızların ayağa kalkması ortalama 2-3 saat sürdü.

Tüm cerrahi işlemler ortalama 44 dk sürdü. Dokuz yaldız ameliyat edildi, yaldı...

Tartışmalar

Tarif edilen cerrahi yöntem daha önce klonlanmış domuzların veya genetiği değiştirilmiş klonlanmış domuzların üretimi ile çalışan diğer araştırma grupları tarafından gerçekleştirilmiştir ve bu tekniğin uygulanmasından sonraki doğum raporları 15,16,17,18,19,20. Çe?...

Malzemeler

Name	Company	Catalog Number	Comments
0.25 mL straw	generic	-	Surgical material
1 mL syringe	Descarpack	341001	Surgical material
10 mL syringe	Descarpack	324601	Surgical material
20 mL syringe	Descarpack	324801	Surgical material
3 mL syringe	Descarpack	324201	Surgical material
5 mL syringe	Descarpack	324401	Surgical material
60 mL syringe	Descarpack	323201	Surgical material
9 mm endotracheal tube	Rusch	112482-000090	Surgical material
Allis forceps	generic	-	Surgical instrument
Amox LA	JA Saúde Animal	MAPA registration: 8.781/2004	Pharmaceutical drug
Bakhaus forceps	generic	-	Surgical instrument
Catheter 20G	Descarpack	362401	Catheter for intravenous access
Cetamin	Agener União	MAPA registration: SP-000292-5.000011	Anesthetic
Conductive clinical gel	RMC	ANVISA registration: 80122200013	Surgical material
Dipyrone D-500	Zoetis	MAPA registration: SP0000728-46	Pharmaceutical drug
Disposable scalpel n. 22	Wiltex	ANVISA registration: 10150470565	Surgical instrument
Disposable sterile sponge-brush	Rioquimica	7.89778E+12	Surgical asepsis
Easy-Scan:Go	IMV	ESCG01	Ultrasound
Endozime AW Plus	Ruhof	34514	Detergent for surgical instruments
Fentanil (Fentanest)	Cristália	ANVISA registration: 1029800810159	Anesthetic
Gosset retractor	generic	-	Surgical instrument
Halstead-mosquito hemostatic forceps	generic	-	Surgical instrument
Healing ointment - Unguento Pearson	Pearson SA	MAPA registration: SP0000094-16	Pharmaceutical drug
hydrogen peroxide solution	Rioquimica	ANVISA registration: 218690015	Surgical material
Isofluorane	Biochimico	ANVISA registration: 100630222	Anesthetic
IV Drip set extensor	generic	-	Fluid therapy
IV Macro drip set	Descarpack	410301	Fluid therapy
Lactofur (ceftiofur)	Ourofino SA	MAPA registration: SP0000051-50	Pharmaceutical drug
Laringoscope	-	-	Surgical instrument
Maxicam 2%	Ourofino SA	MAPA registration: SP0000051-69	Pharmaceutical drug
Micropore adhesive 5 cm x 10 cm	generic	1530	Surgical material
Midazolam	Hipolabor	ANVISA registration: 1134301430035	Anesthetic
Multi-Way IV Infusion Set	Descarpack	413201	Fluid therapy
Needle 40 mm x 1.2 mm	Descarpack	353601	Sterile needle for applying medicines and anesthetics.
Needle 40 mm x 1.6 mm	Wiltex	ANVISA registration: 10150470664	Sterile needle for applying medicines and anesthetics.
Needle holder	generic	-	Surgical instrument
Nylon 2 suture trhead	Shalon Medical	N502CTI40	Surgical material
Ordinary pen	generic	-	Regular pen for taking notes
Physiological solution 0.9% 500 mL bag	JP Farma	MS:1.0491.0070	Fluid therapy
Polyglycolic acid 2 suture thread	Atramat	G4099-75H	Surgical material
Potassium chloride	Samtec	ANVISA registration: 1559200010139	Parenteral drug
Procedure gloves	Descarpack	122401	Personal Protective Equipment (PPE)
Propofol (Provive)	União Química	ANVISA registration: 1049714490057	Anesthetic
Ringer lactate solution 500 mL bag	JP Farma	MS:1.0491.0061	Fluid therapy
Riohex 0.5% clorexidine alcohol solution	Rioquimica	218690356	Surgical asepsis
Riohex 2% clorexidine solution with surfactant	Rioquimica	218690356	Surgical asepsis
Scalp 21 G	Descarpack	421201	Surgical material
Shoe covers	generic	-	Personal Protective Equipment (PPE)
Sterile compresses	Cremer	ANVISA registration: 10071150065	Surgical material
Sterile gauze pad	Procitex	ANVISA registration: 80245210083	Surgical material
Sterile surgical drapes 140 cm x 90 cm	Venkuri	7010003	Surgical material
Sterile surgical drapes 150 cm x 190 cm	PolarFix	F00208	Surgical material
Sterile surgical gloves	Mucambo	CA: 39.317	Personal Protective Equipment (PPE)
Stethoscope	generic	-	Surgical equipment
Surgical cap	Descarpack	93201	Personal Protective Equipment (PPE)
Surgical gown	Descarpack	231101	Personal Protective Equipment (PPE)
Surgical mask	Descarpack	110701	Personal Protective Equipment (PPE)
Surgical scissors blunt-blunt	generic	-	Surgical instrument
Surgical scissors sharp-sharp	generic	-	Surgical instrument
Surgical stapler	Tradevet	-	Surgical material
Tekbond super glue	Tek Bond	78072720030	Surgical material
Thermometer	generic	-	Surgical equipment
Three Way Stopcock	Solidor	374	Surgical material
Tramadol hydrocloride	Agener União	MAPA registration: SP-000292-5.000002	Anesthetic
Transparent film dressing	Skinupper	ANVISA registration: 82307460014	Surgical material
Waterproof adhesive 10 cm x 4.5 cm	generic	364828	Surgical material