Bu çalışma Ellison Tıp Vakfı (SDP, fon tarafından desteklenen <a href="http://www.ellisonfoundation.org/index.jsp" target="_blank">http://www.ellisonfoundation.org/index.jsp</a> ), NIH K01AG031917 (NJL, <a href="http://www.nih.gov" target="_blank">http://www.nih.gov/</a> ), NIH 5T32GM007315-35 (JR) ve NIH R01AG030593 (SDP). Bu çalışma P30-AG-013283 (Yaşlanma Ulusal Enstitüsü tarafından finanse Yaşlanma Biyolojisi Mükemmellik Nathan Şok Merkezi Drosophila Yaşlanma Çekirdek (DAC) kaynak kullanm <a href="http://www.nih.gov" target="_blank">http://www.nih.gov/</a> ). Yazarlar eleştirel okuma için yararlı tartışmalar ve özellikle Brian Chung Pletcher Laboratuvar teşekkür etmek istiyorum. Biz veri toplama konusunda yardım almak için Nick Asher ve Kathryn Borowicz kabul etmek istiyorum.

Biz 4 ° C&#39;de protokol görünür deneysel gıdalar, maya salçası ve üzüm agar plaklarına depolamak ve küf ve kuruluk larva ve ergin hem de standart ortam koşulları set in değil sürece 1-2 ay içinde bunları kullanmanızı tavsiye Bir 12:12 hr ışık karanlık döngüsü ve% 60 bağıl nem ile 25 ° C&#39;de bir inkübatör sinekler bakım gerektirmesi sahneye. 1. Deneysel Yiyecek Hazırlama <ol><li> Larva gelişmesi için, BT gibi bu protokolde kısaltılmış bir modifiye Caltech Orta 5, kullanın. </li><li> Biz (10 şeker (sakaroz) ve antibiyotik, anti-fungal maddeler ile takviye kaynatılmış olan bir% 2 agar baz, özel olarak maya (liyofilize bütün bira mayası) oluşur Drosophila ergin (SY) için bir diyet, tavsiye ve dağıtılmış ml başına flakon) 6. Gıda sağlamlaştırmak ve depolamadan önce 12-24 saat boyunca buharlaşmasına izin verilmelidir. Besin ortamı substan Çünküpişirme proseslerinde tially etkisi uzun ömürlü, tutarlılık bir deney içinde ve deneyler arasındaki karşılaştırma için hem de önemlidir. </li><li> Bir farmakolojik madde yetişkin gıda ilave edilecek ise, bu ilaç tek başına araç içeren katmanlar alma kontrolü şişeleri ile gıda yüzey üzerinde gıda ve katmanlı bir küçük ölçekli (2 ml), içine karıştırılabilir. </li></ol> 2. Canlı Maya Yapıştır hazırlanması Aktif kuru maya 3 gr su ile 5-6 ml birleştirin ve iyice karıştırın. Maya hamur kıvamı yumuşak fıstık ezmesi gibi olmalıdır. 3. Bir Üzüm Agar Plaka Hazırlanması <ol><li> 1.000 ml&#39;lik şişede distile su 500 ml üzüm agar premix bir paket ekleyin ve üzüm agar karışımı eritmek için paket üzerindeki yönergeleri izleyin. </li><li> Kabarcığı oluşumuna kaçınarak dikkatlice 100 mm Petri kapları içine karışımı kalın bir tabaka dökün. Premix bir paket yaklaşık 14 gra üretirpe agar plakaları. </li><li> Ortam soğutmak ve 15 dakika için kapaklı ile oda sıcaklığında katılaşmaya izin verin. Tabaklar 4 tutulabilir ° C, plastik şal sarılmış, ya da hemen kullanılabilir. </li></ol> 4. Senkronize Yumurta Toplama Bu protokolde kullanılan tüm ortam, örneğin maya, üzüm agar plakaları, CT ve% 10 SY gıda, oda sıcaklığında olmalıdır. <ol><li> Bir üzüm agar plaka üzerine yapıştırın maya 2-3 cm çapında katman aç ve bir kenara koyun. </li><li> Sinekler uyutmak aşağı örgü tarafı ile CO 2 pad üzerinde büyük bir yumurta toplama kafesi yerleştirin. Azot tabanlı anestezi yüksek kalitede sonuçlar 7 üretebilir Bazı laboratuvarlar tarafından kullanılan CO 2 alternatif vardır. </li><li> Bir huni kullanarak, yumurta toplama kafes içine sinek 150-200 çiftleri aktarın. </li><li> Kafesin açık ucunu kapak ve bir uç kapağı ile güvenli üzüm agar plağına yerleştirin. </li><li> Sinekler uyanana kadar yan kafesi yatırın.Sonra, gecede inkübatör, aşağı kafes, üzüm agar plaka tarafında tutun. </li><li> Ertesi gün, yeni mayalı üzüm plaka ile üzüm plaka takas. Sadece plaka yüzeyine maya macun yaklaşık 1 cm çaplı koydu. 1. gün üzüm plaka atın. </li><li> Embriyoların 16-22 saat boyunca üzüm agar plaka yüzeyinde toplamasına izin ver. Bu işlem tamamlandıktan sonra, üzüm agar toplamak ve üst sinekler atın. </li><li> 1x Fosfat ile üzüm agar plakaları yüzey yıkayın salin (PBS) ile tamponlu. Yumurta yavaşça bir pamuklu çubukla kazınarak mobilize edilebilir. Çizik, hasar vermemeye özen veya plaka yüzeyinden agar ince parçalar kazıyın. Bir huni yardımıyla, bir 15 ml konik tüp içine yıkanmış yumurta dökün. </li><li> Yumurta tüpün dibine yerleşmeye ve herhangi bir yumurta kaybetmemek için dikkatli olmak, süpernatant kapalı getireyim. Kalan hacmi 2-3 ml civarında olmalıdır. </li><li> Tüp PBS 8-10 ml ekleyin ve yukarıda adım 2-3 mor tekrarlayınsüpernatant netleşene kadar e kat iyice yumurtaları yıkayın. Rezidüel maya kurtulmak bu adımda anahtarıdır. </li><li> Kalan hacmi 2 ml kadar yıkama sonra tüm süpernatant süzün. Geniş çaplı pipet kullanarak BT şişeler içine tablet yumurta 32 ul. Pipet ucu Yumurta aspire hiçbir sıvı çok az olan, kompakt olmalıdır. Bu yumurta yerleşim derinliklerine pipet ucu takarak ve hızlı aspire pistonu serbest bırakarak sağlanabilir. </li><li> Sıra numaralı seribaşı CT sinek gelişim boyunca inkübatörde geri biberonlar. </li></ol> 5. Yaş eşlemeli Yetişkin Koleksiyonu Flies <ol><li> Yetişkinler genellikle gün 9 ileriye eclose olacaktır. Inkübatör gecede geri ilk gün ve yerde şişeleri üzerinde ortaya sinekler atın. Bu uygulama erken emergents için yanlışlıkla seçim önlemek ve senkronize sinekler maksimum sayıda toplanmasını sağlayacak. </li><li> 16-22 saat sonra, gün-yaşlı yetişkin int uçar aktarmako% 10 SY gıda şişeleri. Gerekirse, diğer bir grup ertesi gün toplanır. </li><li> Dönüş inkübatör içine geri uçar ve sinekler iki gün boyunca cinsel olgunluk ve arkadaşı ulaşmanızı sağlar. Yetişkinliğin ilk günü olarak% 10 SY şişe transfer günü kaydedin. </li></ol> 6. Sinekler Sıralama ve Ömür Deneme Kurulumu <ol><li> Bir fırça kullanarak iki gruba daha sonra anestezi pad üzerinde sinekler küçük gruplar, sıralama erkek ve kadın uyuştur. CO 2 kullanılması durumunda, uzun ömürlü deney bütünlüğünü tehlikeye atabilir olası uzun süreli sağlık sorunları önlemek için maruziyeti en aza indirmek için önemlidir. </li><li> Bireysel şişeleri içine aynı cinsiyet 30 sinekler yerleştirin. Nüfus ve sağlıklı nesillerinde hiçbir dengeleyici kromozom varsayarsak, her bir şişe ile her iki cinste 3-4 şişeleri etrafında üretmek gerekir. Bireysel şişeleri içine sinekler Aliquoting toplam, sinekler sadece bir maksimum anestezi maruz, böylece, 3-4 dk daha fazla almalı9-10 dk. </li><li> 8-10 flakon her cinsiyet ve deneysel tedavi için çoğaltır kalmayana kadar tekrarlayın 6,1-6,2 adımları. </li></ol> 7. Ömür Deney Takip Excel Kurma <ol><li> Biz inkübatör şişeyi konumla ilişkili yanlılığı önlemek ve deneyci için flakon kimliğini gizlemek için deneysel koşul tarafından flakon pozisyonu yerine gruplama şişeleri randomizing öneririz. Bunu yapmak için, ilk olarak bir elektronik tablo programında her flakon bir randomize sayısal kimliği atamak, daha sonra kimlik numarasıyla kasetlere şişeleri düzenleyin. Eğer dLife deneme yönetimi yazılımı kullanıyorsanız, her flakon için kimlik numarası oluşturmak için deneme kurulumu öğretici izleyin. </li><li> Eğer bir RFID okuyucu veya dLife ile birlikte barkod okuyucu kullanıyorsanız (İsteğe bağlı) her flakon bir RFID veya barkod etiket eklemek ve dLife yılında flakon en sayısal kimliği ile etiket ilişkilendirmek. Bir okuyucu ile tarandığında programı her flakon tanıyacaktırve bir tablo içinde doğru konumda verileri kaydetmek için bir yol. DLife ile birlikte bir etiket okuyucu kullanımı önemli ölçüde veri toplama zamanı ve kayıt hatası azaltır. </li></ol> 8. Ömür Deney Bakımı Taze yiyecek içeren şişe her transfer için oda sıcaklığında olmalıdır. <ol><li> Deney süresince, yeni şişeleri üzerine transferi sinekler taze gıda içeren her 2 gün (genç kadın) veya haftada 3 kez (erkek veya kadın yaşı&gt; 3 hafta). Bu adım, genç kadınlar için beslenme ortamının larvaların varlığı mani olmamasına sağlayacaktır. Bu transfer, özellikle eski sinekler (Pletcher, kişisel gözlemler), akut mortalite kısal, anestezi olmadan tamamlanmış olmalıdır. </li><li> Her flakon transferi sırasında, yaş kaydetmek eski flakon ölü sinekler saymak ve yeni flakon taşınan ölü sinekler. Ayrıca bu bilgileri kaydetmekBir tablo içinde iki sütun (dLife veya kendi tablo ya da). Bu yapılan sinekler çift sayılmaz olmasını sağlayacaktır. Ölümlerin toplam sayısı (ölü + taşınan) gerektiği önceki transfer taşınan sineklerin en azından eşit sayıda. Yeni ölümlerin sayısını belirlemek için toplam ölüm sayısının daha önce yapılan sinekler sayısını çıkarın. </li><li> Bu kaçış veya kaza sonucu ölüm yoluyla doğal ölüm öncesinde deney bırakılırsa bir sinek sağ sansürlü olarak kabul edilir. Bu şekilde çıkan deney hayvanları uçucu deney ayrıldığı o gün ayrı bir sütun içine girilmesi gerekir. Sansürlü sinekler (bkz. aşağıda) ölü olarak kaydedilmez. </li><li> Son kurtulan ölene kadar adımları 8,1-8,2 tekrarlamak için devam edin. Sinekler yaş olarak, bazı sinekleri sırt üstü yatmak ve kendi inactiveness nedeniyle ölü görünebilir unutmayın. Bu nedenle (ölü) yapılan sinekler sayarken, bacak hareketleri var olup olmadığını belirlemek için şişeleri tarafında dokunun. Eğer öyleyse, thesE sinekler hala hayatta. Sinekler eski flakon ama canlı olarak gıda takılıp kalması durumunda, onlar ölü olarak sayılmamalıdır ve daha fazla sinek çıkarmak için flakon dokunarak kurtarılmalıdır. Bu deneysel önyargı neden olabileceğinden Sansürleme gibi sinekler dikkatli kullanılmalıdır. </li></ol> 9. Veri Analizi <ol><li> Yaşayanlar eğrisi bireyin belirli bir yaş hayatta ve tipik bir Kaplan-Meier yaklaşım (Şekil 1) 8 kullanılarak hesaplanır olasılığını görüntüler. Sağ ve üstü örtülü veri yokluğunda, formül yaş x (S x) bu tür, yaş-spesifik hayatta kalma basitleştirilebilir yaş x (N x) bir sayım zaman başlangıcında canlı bireylerin sayısı bölünmesiyle belirlenir Deney sinekler sayısı (N 0) tarafından, S x = N x / N 0. 9.2) Sağkalım eğrileri veri sunumu en sık görülen formu vardır ve bunlarBir log-rank testi kullanılarak gruplar arasındaki eşitlik için test edilebilir. Makul çıkarsama bir grupta 50-100 bireyler olarak birkaç çizilebilir. Sağkalım Ancak, kümülatif bir ölçüsüdür ve bu nedenle böyle bir yaşamın bu erken yaşlanma ile ilgili olmayan ölümler, yaşlanma özgü tespit etkileri güçleştirmek ömrü boyunca hayatta kalma düşmesine neden olacaktır. </li><li> İkinci bir veri görselleştirme yöntemi her yaş aralığı yoluyla ölme riskini gösterir ve sağkalım verileri 9,10 daha nüanslı bir açıklama sunulur yaşa özgü mortalite fonksiyonudur. Mortalite önlemler bir yaş diğerine bağımsız ve tedaviler erişkin yaşamı boyunca ayarlanır özellikle ölüm eğrisinin şekli, yaşlanma dinamikleri hakkında çıkarım için yararlıdır. Yaşa özgü mortalite tahminleri Ancak, küçük örneklem büyüklüğü olan hassasiyet ve doğruluk hem de yoksundur ve genellikle güvenilir bir es için kohort başına bireylerin birden-çok yüzlerce gerektirir11 Nihaî. </li><li> Ömür farklılıkları tahmini için diğer yöntemler parametrik (örn. Gompertz) ve yarı-parametrik (örn. Cox regresyon) modellerini içermektedir. Bu modeller güçlü olabilir ancak çünkü ölüm eğrilerinin şekli ve yanlış çıkarımlar 11,12 yol açabilir tedavi etkileri, doğası hakkında yapılan varsayımların dikkatli uygulanmalıdır. </li></ol>

<ol>
	<li>Toivonen, J. M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=No+influence+of+Indy+on+lifespan+in+Drosophila+after+correction+for+genetic+and+cytoplasmic+background+effects.">No influence of Indy on lifespan in Drosophila after correction for genetic and cytoplasmic background effects.</a> PLoS Genet. 3, e95 (2007).</li><li>Spencer, C. C., Howell, C. E., Wright, A. R., Promislow, D. E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Testing+an+'aging+gene'+in+long-lived+drosophila+strains:+increased+longevity+depends+on+sex+and+genetic+background.">Testing an 'aging gene' in long-lived drosophila strains: increased longevity depends on sex and genetic background.</a> Aging Cell. 2, 123-130 (2003).</li><li>Burnett, C., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Absence+of+effects+of+Sir2+overexpression+on+lifespan+in+C.+elegans+and+Drosophila.">Absence of effects of Sir2 overexpression on lifespan in C. elegans and Drosophila.</a> Nature. 477, 482-485 (2011).</li><li>Bokov, A. F., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Does+reduced+IGF-1R+signaling+in+Igf1r+/-+mice+alter+aging?.">Does reduced IGF-1R signaling in Igf1r+/- mice alter aging?.</a> PLoS One. 6, e26891 (2011).</li><li>Lewis, E. B. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+new+standard+food+medium.">A new standard food medium.</a> Drosophila Information Service. 34, 117-118 (1960).</li><li>Skorupa, D. A., Dervisefendic, A., Zwiener, J., Pletcher, S. D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Dietary+composition+specifies+consumption,+obesity,+and+lifespan+in+Drosophila+melanogaster.">Dietary composition specifies consumption, obesity, and lifespan in Drosophila melanogaster.</a> Aging Cell. 7, 478-490 (2008).</li><li>Rera, M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Modulation+of+longevity+and+tissue+homeostasis+by+the+Drosophila+PGC-1+homolog.">Modulation of longevity and tissue homeostasis by the Drosophila PGC-1 homolog.</a> Cell Metab. 14, 623-634 (2011).</li><li>Kaplan, E. L., Meier, P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Nonparametric+Estimation+from+Incomplete+Observations.">Nonparametric Estimation from Incomplete Observations.</a> Journal of the American Statistical Association. 53, 457-481 (1958).</li><li>Pletcher, S. D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Mitigating+the+Tithonus+Error:+Genetic+Analysis+of+Mortality+Phenotypes.">Mitigating the Tithonus Error: Genetic Analysis of Mortality Phenotypes.</a> Sci. Aging Knowl. Environ. 2002, pe14 (2002).</li><li>Pletcher, S. D., Khazaeli, A. A., Curtsinger, J. W. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Why+do+life+spans+differ?+Partitioning+mean+longevity+differences+in+terms+of+age-specific+mortality+parameters.">Why do life spans differ? Partitioning mean longevity differences in terms of age-specific mortality parameters.</a> J. Gerontol. A Biol. Sci. Med. Sci. 55, 381-389 (2000).</li><li>Promislow, , Tatar, , Pletcher, , Carey, <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Below-threshold+mortality:+implications+for+studies+in+evolution,+ecology+and+demography.">Below-threshold mortality: implications for studies in evolution, ecology and demography.</a> Journal of Evolutionary Biology. 12, 314-328 (1999).</li><li>Pletcher, <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Model+fitting+and+hypothesis+testing+for+age-specific+mortality+data.">Model fitting and hypothesis testing for age-specific mortality data.</a> Journal of Evolutionary Biology. 12, 430-439 (1999).</li><li>Partridge, L., Gems, D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Benchmarks+for+ageing+studies.">Benchmarks for ageing studies.</a> Nature. 450, 165-167 (2007).</li><li>Roman, G., Endo, K., Zong, L., Davis, R. L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=P[Switch],+a+system+for+spatial+and+temporal+control+of+gene+expression+in+Drosophila+melanogaster.">P[Switch], a system for spatial and temporal control of gene expression in Drosophila melanogaster.</a> Proceedings of the National Academy of Sciences of the United States of America. 98, 12602-12607 (2001).</li><li>Ford, D., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Alteration+of+Drosophila+life+span+using+conditional,+tissue-specific+expression+of+transgenes+triggered+by+doxycyline+or+RU486/Mifepristone.">Alteration of Drosophila life span using conditional, tissue-specific expression of transgenes triggered by doxycyline or RU486/Mifepristone.</a> Exp. Gerontol. 42, 483-497 (2007).</li><li>Priest, N. K., Mackowiak, B., Promislow, D. E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+role+of+parental+age+effects+on+the+evolution+of+aging.">The role of parental age effects on the evolution of aging.</a> Evolution. 56, 927-935 (2002).</li><li>Smith, E. M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Feeding+Drosophila+a+biotin-deficient+diet+for+multiple+generations+increases+stress+resistance+and+lifespan+and+alters+gene+expression+and+histone+biotinylation+patterns.">Feeding Drosophila a biotin-deficient diet for multiple generations increases stress resistance and lifespan and alters gene expression and histone biotinylation patterns.</a> J. Nutr. 137, 2006-2012 (2007).</li><li>Sorensen, J. G., Loeschcke, V. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Larval+crowding+in+Drosophila+melanogaster+induces+Hsp70+expression,+and+leads+to+increased+adult+longevity+and+adult+thermal+stress+resistance.">Larval crowding in Drosophila melanogaster induces Hsp70 expression, and leads to increased adult longevity and adult thermal stress resistance.</a> J. Insect Physiol. 47, 1301-1307 (2001).</li><li>Bass, T. M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Optimization+of+dietary+restriction+protocols+in+Drosophila.">Optimization of dietary restriction protocols in Drosophila.</a> J. Gerontol. A Biol. Sci. Med. Sci. 62, 1071-1081 (2007).</li><li>Miquel, J., Lundgren, P. R., Bensch, K. G., Atlan, H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Effects+of+temperature+on+the+life+span,+vitality+and+fine+structure+of+Drosophila+melanogaster.">Effects of temperature on the life span, vitality and fine structure of Drosophila melanogaster.</a> Mechanisms of Ageing and Development. 5, 347-370 (1976).</li><li>Pittendrigh, C. S., Minis, D. H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Circadian+systems:+longevity+as+a+function+of+circadian+resonance+in+Drosophila+melanogaster.">Circadian systems: longevity as a function of circadian resonance in Drosophila melanogaster.</a> Proceedings of the National Academy of Sciences of the United States of America. 69, 1537-1539 (1972).</li><li>Joshi, A., Mueller, L. D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Adult+crowding+effects+on+longevity+in+Drosophila+melanogaster:+Increase+in+age-dependent+mortality.">Adult crowding effects on longevity in Drosophila melanogaster: Increase in age-dependent mortality.</a> Current Science. 72, 255-260 (1997).</li><li>Ja, W. W., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Prandiology+of+Drosophila+and+the+CAFE+assay.">Prandiology of Drosophila and the CAFE assay.</a> Proceedings of the National Academy of Sciences of the United States of America. 104, 8253-8256 (2007).</li><li>Lee, K. P., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Lifespan+and+reproduction+in+Drosophila:+New+insights+from+nutritional+geometry.">Lifespan and reproduction in Drosophila: New insights from nutritional geometry.</a> Proceedings of the National Academy of Sciences of the United States of America. 105, 2498-2503 (2008).</li><li>Gargano, J. W., Martin, I., Bhandari, P., Grotewiel, M. S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Rapid+iterative+negative+geotaxis+(RING):+a+new+method+for+assessing+age-related+locomotor+decline+in+Drosophila.">Rapid iterative negative geotaxis (RING): a new method for assessing age-related locomotor decline in Drosophila.</a> Experimental gerontology. 40, 386-395 (2005).</li></ol>

Çıkar çatışması ilan etti.

Burada sunulan protokol genetik, farmakolojik ve çevresel müdahalelerin değerlendirilmesi için uyarlanabilir Drosophila yetişkin uzun ömürlü tekrarlanabilir ölçümler üretmek için bir yöntem açıklanır. Protokol Crucial yönleri dikkatle, larval gelişim ortamı kontrol yetişkin stresi en aza indirerek ve deney grupları ve kontrol grubu arasında önyargı minimize içerir. Biz de dLife ömrü deneme yönetimi yazılımı kullanımı sunuyoruz. Sadece her flakon bir barkod veya RFID etiketi tak...

<table border="1"><tbody><tr><td> Reaktif Adı </td><td> Şirket </td><td> Katalog numarası </td><td> Yorumlar (isteğe bağlı) </td></tr><tr><td> Aktif Kuru Maya </td><td> Fleishmann Mayası </td><td> 2192 </td><td></td></tr><tr><td> Üzüm Agar Toz Premiks </td><td> Genesee Bilimsel </td><td> 47-102 </td><td></td></tr><tr><td> Büyük Embriyo Koleksiyonu Kafesleri </td><td> Genesee Bilimsel </td><td> 59-101 </td><td></td></tr><tr><td> Büyük Yedek End Caps </td><td> Genesee Bilimsel </td><td> 59-103 </td><td></td></tr><tr><td> 6 oz Meydanı Bottom Şişeler, polipropilen </td><td> Genesee Bilimsel </td><td> 32-130 </td><td></td></tr><tr><td> Stok Şişeler için Flugs Kilitler </td><td> Genesee Bilimsel </td><td> 49-100 </td><td></td></tr><tr><td> DrosophilaFlakon, Geniş, Polistiren </td><td> Genesee Bilimsel </td><td> 32-117 </td><td></td></tr><tr><td> Geniş Yedirme Flugs Kilitler </td><td> Genesee Bilimsel </td><td> 49-101 </td><td></td></tr><tr><td> Geniş Orifisli Aardvark Pipet İpuçları, 200 ul </td><td> Denville Bilimsel </td><td> P1105-CP </td><td></td></tr><tr><td> Flystuff Flypad, Standart Boyut </td><td> Genesee Bilimsel </td><td> 59-114 </td><td></td></tr><tr><td> BD Falcon 15 ml Konik Santrifüj Tüpleri </td><td> Fisher Scientific </td><td> 14-959-70C </td><td></td></tr><tr><td> Açık Kapaklar ile Fisherbrand Petri Yemekleri, Ridge Yükseltilmiş; 100 OD x 15 mm H; </td><td> Fisher Scientific </td><td> 08-757-12 </td><td></td></tr><tr><td> Kimax * Colorware şişeler 1000 ml sarı </td><td> Fisher Scientific </td><td> 10-200-47 </td><td></td></tr><tr><td> 10x PBS pH 7.4 </td><td> Içindevitrogen </td><td> 70011044 </td><td></td></tr><tr><td> GELIDIUM Agar </td><td> Mooragar </td><td> n / a </td><td></td></tr><tr><td> Bira mayası </td><td> MP Biomedicals </td><td> 0290331280 </td><td></td></tr><tr><td> Toz şeker </td><td> Kroger </td><td> n / a </td><td></td></tr><tr><td> Tegosept </td><td> Genesee Bilimsel </td><td> 20-266 </td><td> Gıda Koruyucu Fly </td></tr><tr><td> Propionik asit,% 99 </td><td> Acros Organics </td><td> 149300025 </td><td> Gıda Koruyucu Fly </td></tr><tr><td> Kanamisin Sülfat </td><td> ISC BioExpress </td><td> 0408-10G </td><td></td></tr><tr><td> Tetrasiklin HCl </td><td> VWR </td><td> 80058-724 </td><td></td></tr></tbody></table>

measurement of lifespan in drosophila melanogaster

Yaşlanma, fiziksel performansa yol açan ve onu muayene edildiği hemen hemen bütün organizmalarda sürekli fizyolojik bozulma sonuçları, hastalık riskinin arttığı bir olgudur. Bireysel yaşlanma genellikle yaştaki bireylerin büyük kohortlarında gözlem ömrü tarafından laboratuvarda ölçülür yaşa bağlı mortalite, bir artış olarak nüfus düzeyinde tezahür. Ölçüde ölçmek için aramaya Deneyler basit modeli organizmalarda genetik veya çevresel manipülasyonlar etkisini ömrü ömrünü uzatmak ve memelilerde yaşla ilişkili hastalığı önlemek için takson genelinde ve ilham verici yeni stratejiler için muhafaza edilmektedir yaşlanma yönlerini anlamak için son derece başarılı olmuş hangi . Sirke sineği, Drosophila melanogaster, nispeten kısa ömürlü, uygun hayvancılık ve basit genetik nedeniyle yaşlanma mekanizmaları incelemek için cazip bir model organizmadır.Ancak, yaş-spesifik sağkalım ve ölüm gibi yaşlanma demografik önlemler, deneysel tasarım ve ortamda bile küçük varyasyonlar için olağanüstü duyarlıdır ve yaşlanma deneyler süresince sıkı laboratuvar uygulamalarının bakım gereklidir. Birlikte genetik arka plan dikkatli kontrolü uygulamaya ihtiyacı olan bu hususlar, sağlam ölçümler üretmek için gereklidir. Nitekim, maya uzun ömürlü deneyler, solucanlar, sinekler ve çevresel veya genetik eserler 1-4 kadar takip edilmiştir farelerin çıkarım çevreleyen birçok önemli tartışmalar vardır. Bu protokol, biz laboratuvar şişeleri kullanarak Drosophila da uzun ömürlü ölçüm uzun yıllar boyunca optimize edilmiş prosedürleri bir dizi tanımlamak. Biz de bizim laboratuvar tarafından geliştirilen ve indirme (yüklenememektedir dLife yazılımın kullanımı, tarif <a href="http://sitemaker.umich.edu/pletcherlab/software">http://sitemaker.umich.edu/ple</a>tcherlab / yazılım). dLife throughput hızlandırır ve anında işleme ve veri toplama basitleştirilmesi ve veri analizi standartlaştırarak, birleşmeyle Optimum deneysel tasarım tarafından iyi uygulamaları teşvik etmektedir. Biz de tasarım, koleksiyon ve ömrü verileri yorumlamada birçok potansiyel tuzaklar tartışacağız, ve biz bu tehlikeleri önlemek için adımları sağlar.

Protokolü basitleştirilmiş bir şeması önemli adımları özetlenen Şekil 1&#39;de sunulmuştur. Protokolünün senkronizasyon kısım yaş grubundaki yetişkin sinek gerektiren çeşitli deneyleri için de kullanılabilir. Yabani tip sinekler tipik hayatta kalma eğrileri dLife deney yönetim yazılımı (Şekil 2b, c) kullanılarak, Şekil 2a&#39;da gösterilmektedir. Erişkin erkeklerde genellikle hem nüfusları 25 ° C&#39;de% 10 ...

Watch this Scientific Journal Video about Measurement of Lifespan in Drosophila melanogaster at JoVE.com

Measurement of Lifespan in Drosophila melanogaster

Drosophila melanogaster uzun ömürlü düzenleme moleküler temelini keşfetmek için güçlü bir model organizmadır. Bu protokol bir tekrarlanabilir, uzun ömürlü yanı sıra potansiyel tuzaklar nüfus tabanlı ölçme ve bunlardan kaçınmanın yolları üreten katılan adımları görüşecek.

In ömrü ölçümü<em&gt; Drosophila melanogaster</em

Aging is a phenomenon that results in steady physiological deterioration in nearly all organisms in which it has been examined, leading to reduced ...

measurement-of-lifespan-in-drosophila-melanogaster

Research

JoVE Journal

Biology

Measurement of Lifespan in Drosophila melanogaster

33.8K Görüntüleme.  University of Michigan. Drosophila melanogaster uzun ömürlü düzenleme moleküler temelini keşfetmek için güçlü bir model organizmadır. Bu protokol bir tekrarlanabilir, uzun ömürlü yanı sıra potansiyel tuzaklar nüfus tabanlı ölçme ve bunlardan kaçınmanın yolları üreten katılan adımları görüşecek.