啮齿类动物胎盘的体外灌注

这些技术的成功应用将允许对药理学试验进行动力学评估，或通过形态上完好无损的胎盘通过异种生物污染物。啮齿动物胎盘灌注技术允许更高的药理学或毒理学研究，因为多个化合物可以评估使用单个大坝的组织。展示这项技术的将是珍妮·德埃里科，一个来自我实验室的高级研究生。

在开始手术之前，用加热的生理盐溶液或PSS轻轻填充所有腔室、针头、玻璃微管、油管和储液罐，必要时小心地用细尖转移移液器去除任何气泡。将所有三个路止不经过的卡子都转向关闭位置，以将液体固定到移液器内。在准备子宫管的两个玻璃微管和指定用于脐带的两根钝尖针上各系一根领带。

然后固定连接，以防止在腔室移动过程中丢失。在确认在麻醉妊娠日20只雌性怀孕大鼠对头趾捏没有反应后，从腹部抬起一个子宫角，将角从动物外部长路展开。使用编织的丝绸缝合线将子宫动脉系在角的阴道和卵巢末端，包括用子宫角缝合内的卵巢。

使用手术剪刀，在卵巢领带的近端和阴道领带的端侧做切口。将子宫角转移到一个解剖盘中，里面衬着硅橡胶，里面装满了冷PSS。与卵巢侧左侧和阴道侧右侧，轻轻地推动解剖针通过子宫角到硅橡胶稳定子宫。

选择角中央的母胎盘胎儿单元。使用精细钳子和剪刀，从胎盘的胎儿表面取出羊膜，注意避免脐带。解开脐带并系开脐带，分离胎儿幼崽。

识别脐动脉和静脉后，轻轻分离和收缩脐带血管。然后切下比脐动脉略短的脐静脉，以便于识别。用手术剪刀把子宫动脉和静脉开水。

保持子宫动脉解剖血流的正确方向，将动盘单元放入经过改造的隔离容器室，在解剖显微镜下充满热氧PSS。在每只手使用一对细钳，可以将子宫动脉的近端和端部伸到玻璃微管上。用先前放置的无菌尼龙缝合线将动脉紧密固定。

将脐动脉固定到 23 量表钝针上。然后将脐静脉固定到 25 表钝针上，并回填所有止损和管，以防止气泡。请记住检查所有止泡、管子和管子有无气泡，因为系统中的空气泡会导致细胞窘迫，并消除胎盘内的逆流。

根据图连接所有管道。将小称重船放在母体子宫动脉的解剖下和胎儿脐静脉的针刺下，以捕获手术过程中将产生的污水。准备污水的收集板，供以后分析。

打开止答器，让液体通过油管流向胎盘，并打开近位泵、压力控制和压力监测器。缓慢地将压力升高到压力监测仪上读取的 80 毫米汞。慢慢打开止血管，允许液体流向子宫动脉。

在整个实验中重新加注所有储液罐以保持液体体积。组织平衡30分钟后，让血管适应新的流体流动，通过从两艘称重船收集10分钟的污水建立基线灌注。测量通过子宫动脉和脐静脉出现的液体体积。

在基线采集期结束时，将实验治疗引入子宫动脉。然后每10分钟从远大子宫动脉和胎儿脐静脉流出的样本收集一次，输液后共180分钟。测量液体样品中的污染物。

用埃文斯蓝色染料灌注以测试系统，并可视化适当的液体和胎盘屏障功能，以防止污染物转移到胎儿隔间，显示染料达到并注入本系统内的胎盘组织。经过仔细的调查，很明显，埃文斯蓝色染料没有进入胎儿脐静脉，这是预料之中的，因为埃文斯蓝色染料必然是白素。在这个具有代表性的实验中，在聚苯乙烯输液后10分钟内，减少了输液到胎儿的隔间。

聚苯乙烯转移到胎儿隔间，然后达到20分钟的峰值，并持续了90分钟。在排盘过程中要记住的最重要的事情是慢慢走。移液器和组织非常细腻，很容易破裂或撕裂。

通过权衡污水，这种方法可用于研究养托生理以及材料易位。