我们的血管袖带位置允许层流血流，我们为供体肺动脉使用更大的袖带，以确保充足的血液返回给受体。该方案中使用的这些修改降低了血流湍流和血栓形成的可能性，从而提高了生存率。该方法为研究移植后的免疫反应（如缺血再灌注损伤和移植排斥反应）提供了有价值的见解。
此外，我们的技术可以更容易地进行移植后监测或再移植。演示这一程序的将是李文军博士，他是我们实验室的显微外科医生，他开发了这项技术。通过使用电动剃须刀从胸部和腹部剃除头发来准备手术区域。
男性静脉注射 100 单位肝素至静脉或男性和女性颈外静脉。将小鼠置于仰卧位，前肢在头顶。用手术胶带固定前肢和后肢，并用0.75%碘和70%乙醇消毒皮肤。
从脐部到胸骨角进行正中剖腹胸切开术，然后沿每个肋缘进行双侧开胸术。将前胸壁折叠在颈部，以充分暴露纵隔。切除胸腺并露出胸内下腔静脉。
对于逆行灌注，将 1.5 毫升 4 摄氏度盐水注入胸内下腔静脉，针头朝向移植物。使用8-0连接上腔静脉丝缝合并远端分叉。通过下腔静脉再注射 1.5 毫升 4 摄氏度盐水来重复逆行灌注。
使用8-0结扎下腔静脉丝缝合并远端分叉。解剖主动脉弓和肺动脉干以进行移植物采集，并在远端横断。使用6-0丝线结扎心脏后表面的肺静脉，并在远端分开。
通过从胸腔中取出供体心脏来进行移植准备。将切除的心脏放入装有四摄氏度肝素盐水的塑料容器中一到两分钟。将移植物转移到装满冰块的无菌塑料烧瓶上，用于袖带放置。
将一毫米长的 20 号血管导管袖带放在供体袖带的肺动脉上。使用细镊子，将动脉边缘轻轻折叠回袖带上。使用10-0尼龙领带将折叠的容器固定在袖口上。
将供体心脏储存在肝素化盐水或其他四摄氏度的保存溶液中。通过使用电动剃须刀从颈部区域剃毛来准备手术区域。将无菌非药物眼药膏涂抹在眼睛上，以防止角膜干燥。
将动物置于仰卧位，前肢与身体相邻，头部略微向左转动。用手术胶带固定前肢和后肢。用0.75%碘和70%乙醇消毒皮肤。
从下颌骨到胸骨做一个中线颈椎切口后，横断右胸锁乳突肌。切除下颌下腺的右叶，为移植物植入创造空间。使用6-0丝线在近端颈外静脉上打一个滑结。
使用 8-0 结扎远端颈外静脉和相邻分支丝绸缝合线。在静脉下缝合并用纱布覆盖。在颈外静脉前壁上做一个横向切口。
在袖带插入期间，将 10-0 尼龙缝合线穿过颈外静脉近端边缘和下层组织，以固定静脉。使用 8-0 结扎右颈总动脉远端丝线仅不如颈动脉分叉。使用6-0丝线在颈总动脉近端打一个滑结。
在缝合线之间远端横断动脉。然后将 0.6 毫升长的 24 号血管导管袖带放在受者的右颈总动脉上。使用细镊子，将动脉边缘轻轻折叠回袖带上。
使用10-0尼龙领带将折叠的容器固定在袖口上。将供体心脏置于右颈椎区域上方。在植入过程中每隔几分钟将冷盐水滴到心脏移植物上。
将 10-0 尼龙缝合线穿过供体主动脉的边缘，并通过下层组织的浅表咬合将移植物固定到位。用0.5毫升0.9%肝素化盐水冲洗供体主动脉。将受者的颈总动脉袖带插入供体主动脉。
用 8-0 固定吻合口真丝领带。移除主动脉锚缝线。用 0.5 毫升 0.9% 肝素化盐水冲洗受者的颈外静脉，使颈外静脉脱气。
通过将供体肺动脉袖带插入受者的颈外静脉并进行肺动脉吻合术，并用 8-0 固定真丝领带。移除颈外静脉锚缝线并横断颈外静脉的剩余后壁，以将移植物从下层组织中释放出来。确保移植物的方向正确，没有扭结或扭曲吻合口。
松开受者颈外静脉上的滑结，然后松开颈总动脉以启动心脏移植再灌注。该协议中演示的技术显示存活率约为97%，这可能归因于放置在供体肺动脉上的更大的20号袖带，以确保血液充分返回受体。此外，在目前的技术中，血流与袖带放置的对齐将血栓形成和吻合口湍流的风险降至最低。
平均受者手术时间约为37分钟，平均冷缺血时间为20分钟。对于生存研究，每天通过直接可视化和心跳数字触诊来评估心脏移植物。移植后早期进行活体双光子成像以评估白细胞运输。
在闭合皮肤之前检查移植物的位置和方向是否正确，以防止扭曲是很重要的。该方法可用于再移植模型，以鉴定介导同种免疫反应的移植移植物中的常驻免疫细胞。
