Vasküler manşet yerleştirmemiz laminer kan akışına izin verir ve alıcılara bol miktarda kan dönüşü sağlamak için donör pulmoner arter için daha büyük bir manşet kullanırız. Bu protokolde kullanılan bu modifikasyonlar, türbülanslı kan akışı ve trombüs oluşumu olasılığını azaltır ve hayatta kalma oranlarının artmasına neden olur. Bu yöntem, iskemi reperfüzyon hasarı ve greft reddi gibi transplantasyon sonrası immün yanıtları incelemek için değerli bilgiler sağlar.
Ek olarak, tekniğimiz nakil sonrası izlemeyi veya yeniden nakli kolaylaştırır. Bu prosedürü gösteren, laboratuvarımızda bu tekniği geliştiren uzman bir mikrocerrah olan Dr. Wen Jun Li olacaktır. Elektrikli tıraş bıçağı kullanarak saçları göğüs ve karından tıraş ederek cerrahi bölgeyi hazırlayın.
100 birim heparini intravenöz olarak erkekler için penis damarına veya erkekler ve kadınlar için dış juguler ven içine uygulayın. Fareleri, ön ayakları tepede olacak şekilde sırtüstü bir pozisyona yerleştirin. Ön ayakları ve arka bacakları cerrahi bantla sabitleyin ve cildi% 0.75 iyot ve% 70 etanol ile dezenfekte edin.
Medyan laparosteronotomi için göbek kısmından sternal açıya kadar bir kesi yapın, ardından her kostal sınır boyunca bilateral bir torakotomi yapın. Mediastenin tam olarak maruz kalması için ön göğüs duvarını boynun üzerine katlayın. Timüsü tüketin ve intratorasik inferior vena kavayı açığa çıkarın.
Retrograd perfüzyon için, intratorasik inferior vena kavaya 1.5 mililitre dört santigrat derece salin enjekte edin ve iğne greftin üzerine üstün bir şekilde yönlendirildi. Superior vena kava'yı 8-0 kullanarak bağlayın ipek dikiş ve distal bölün. İnferior vena kava yoluyla 1.5 mililitre dört santigrat derece salin enjekte ederek retrograd perfüzyonu tekrarlayın.
İnferior vena kavayı 8-0 kullanarak bağlayın ipek dikiş ve distal bölün. Greft hasadı için aort arkı ve pulmoner arter gövdesini disekte edin ve her ikisini de distal olarak transekte edin. Kalbin arka yüzeyindeki pulmoner damarları 6-0 ipek sütür kullanarak bağlayın ve distal olarak bölün.
Donör kalbi göğüs boşluğundan çıkararak greft hazırlığı yapın. Eksize edilen kalbi bir ila iki dakika boyunca dört santigrat derece heparinize salin ile doldurulmuş plastik bir kaba koyun. Grefti manşet yerleştirilmesi için buzla doldurulmuş steril bir plastik şişeye aktarın.
Donör manşet için pulmoner arterin üzerine bir milimetre uzunluğunda 20 gauge anjiyokateter manşet yerleştirin. İnce forseps kullanarak, arterin kenarlarını manşetin üzerine yavaşça geri katlayın. Katlanmış kabı 10-0 naylon bir bağ kullanarak manşete sabitleyin.
Donör kalbini heparinize salin veya başka bir koruma solüsyonunda dört santigrat derecede saklayın. Elektrikli tıraş bıçağı kullanarak saçları servikal bölgeden tıraş ederek cerrahi bölgeyi hazırlayın. Kornea kurumasını önlemek için gözlere steril ilaçsız oftalmik merhem uygulayın.
Hayvanı vücuda bitişik ön ayaklarla sırtüstü bir pozisyona yerleştirin ve kafa hafifçe sola döndü. Ön ayakları ve arka bacakları cerrahi bantla sabitleyin. Cildi% 0.75 iyot ve% 70 etanol ile dezenfekte edin.
Alt mandibuladan sternuma orta hat servikal insizyon yaptıktan sonra, sağ sternokleidomastoid kası transekte edin. Greft implantasyonu için alan yaratmak üzere inframandibuler bezin sağ lobunu tüketin. 6-0 ipek sütür kullanarak proksimal dış juguler ven üzerine bir kayma düğümü bağlayın.
Distal dış juguler veni ve bitişik dalları 8-0 kullanarak bağlayın ipek dikiş. Damarın altına dikiş ve gazlı bezle örtün. Dış juguler venin ön duvarı boyunca enine bir kesi yapın.
Manşet yerleştirme sırasında damarı sabitlemek için proksimal dış juguler venin kenarından ve altta yatan dokudan 10-0 naylon bir sütür yerleştirin. Distal sağ ortak karotis arteri 8-0 kullanarak bağlayın ipek sütür, karotis bifurkasyonundan hemen daha düşüktür. 6-0 ipek sütür kullanarak proksimal ortak karotis arter üzerine bir kayma düğümü bağlayın.
Arteri dikişler arasında distal olarak transekte edin. Daha sonra alıcının sağ ortak karotis arterinin üzerine 0.6 mililitre uzunluğunda 24 gauge anjiyokateter manşet yerleştirin. İnce forseps kullanarak, arterin kenarlarını manşetin üzerine yavaşça geri katlayın.
Katlanmış kabı 10-0 naylon bir bağ kullanarak manşete sabitleyin. Donör kalbi sağ servikal bölgeden üstün tutun. İmplantasyon sırasında birkaç dakikada bir kalp greftine soğuk salin damlatın.
Grefti yerine sabitlemek için donör aortun kenarından ve altta yatan dokunun yüzeysel bir ısırığından 10-0 naylon bir sütür yerleştirin. Donör aortu 0.5 mililitre% 0.9 heparinize salin ile yıkayın. Alıcının ortak karotis arter manşetini donör aortuna yerleştirin.
Anastomozu 8-0 ile sabitleyin ipek kravat. Aort ankraj dikişini çıkarın. Alıcının dış juguler venini 0.5 mililitre% 0.9 heparinize salin ile yıkayarak dış juguler veni havalandırın.
Donör pulmoner arter manşetini alıcının dış juguler venine yerleştirerek pulmoner arter anastomozu yapın ve 8-0 ile sabitleyin ipek kravat. Dış juguler ven ankraj sütürünü çıkarın ve grefti altta yatan dokudan serbest bırakmak için dış juguler venin kalan arka duvarını transekte edin. Greftin anastomozun bükülmeden veya bükülmeden düzgün bir şekilde yönlendirildiğinden emin olun.
Alıcının dış juguler venindeki kaymaları serbest bırakın, ardından kalp grefti reperfüzyonunu başlatmak için ortak karotis arter takip edin. Bu protokolde gösterilen teknik, yaklaşık% 97'lik bir hayatta kalma oranı gösterdiBu, potansiyel olarak, alıcıya kan akışının bol miktarda geri dönüşünü sağlamak için donör pulmoner artere yerleştirilen daha büyük 20 gauge manşete bağlanabilir. Ek olarak, mevcut teknikte kan akışının manşet yerleştirilmesi ile hizalanması, tromboz ve anastomoz türbülansı riskini en aza indirir.
Ortalama alıcı ameliyat süresi yaklaşık 37 dakika olup, ortalama soğuk iskemi süresi 20 dakikadır. Sağkalım çalışmaları için, kalp greftleri günlük olarak kalp atışının doğrudan görselleştirilmesi ve dijital palpasyonu ile değerlendirildi. İntravital iki foton görüntüleme, lökosit kaçakçılığını değerlendirmek için transplantasyondan erken dönemde yapıldı.
Bükülmeyi önlemek için greftin cilt kapanmadan önce uygun şekilde konumlandırıldığını ve yönlendirildiğini kontrol etmek önemlidir. Bu yöntem, alloimmün yanıtlara aracılık eden nakledilen greftlerde yerleşik immün hücreleri tanımlamak için yeniden transplantasyon modellerinde kullanılabilir.