우리의 혈관 커프 배치는 층류 혈류를 허용하고 기증자 폐동맥에 더 큰 커프를 사용하여 수혜자에게 충분한 혈액을 반환합니다. 이 프로토콜에 사용 된 이러한 변형은 난류 혈류 및 혈전 형성의 가능성을 줄이고 생존율을 향상시킵니다. 이 방법은 허혈 재관류 손상 및 이식 거부와 같은 이식 후 면역 반응을 연구하는 데 귀중한 통찰력을 제공합니다.
또한, 우리의 기술은 이식 후 모니터링 또는 재 이식을보다 쉽게 가능하게합니다. 이 절차를 시연하는 것은이 기술을 개발 한 우리 실험실의 전문 미세 외과 의사 인 Dr.Wen Jun Li가 될 것입니다. 전기 면도기를 사용하여 가슴과 복부에서 머리카락을 면도하여 수술 부위를 준비하십시오.
100 단위의 헤파린을 남성의 경우 음경 정맥 또는 남성과 여성의 경우 외부 경정맥에 정맥 내 투여하십시오. 앞다리가 머리 위로 향하는 앙와위 자세로 마우스를 놓습니다. 수술 용 테이프로 앞다리와 뒷다리를 고정하고 0.75 % 요오드와 70 % 에탄올로 피부를 소독하십시오.
배꼽에서 흉골 각도까지 정중 개복술에 대한 절개를 수행 한 다음 각 늑골 가장자리를 따라 양측 개흉술을 시행합니다. 종격동의 완전한 노출을 위해 목 위로 전방 흉벽을 접습니다. 흉선을 절제하고 흉부 내 하대 정맥을 노출시킵니다.
역행 관류의 경우 바늘이 이식편쪽으로 우세하게 향하도록 흉부 내 하대 정맥에 섭씨 4 도의 식염수 1.5 밀리리터를 주입합니다. 8-0을 사용하여 상대 정맥을 결찰하십시오. 실크 봉합사와 원위부로 나뉩니다. 하대 정맥을 통해 섭씨 4도 식염수 1.5 밀리리터를 추가로 주입하여 역행 관류를 반복하십시오.
8-0을 사용하여 하대 정맥을 라이게이션 실크 봉합사와 원위부로 나뉩니다. 이식 적출을 위해 대동맥궁과 폐동맥 줄기를 해부하고 둘 다 원위로 횡단합니다. 6-0 실크 봉합사를 사용하여 심장의 뒤쪽 표면에있는 폐정맥을 결찰하고 원위로 나눕니다.
흉강에서 기증자 심장을 제거하여 이식 준비를 수행하십시오. 절제된 심장을 섭씨 4도의 헤파린화된 식염수로 채워진 플라스틱 용기에 1-2분 동안 두십시오. 커프 배치를 위해 얼음으로 채워진 멸균 플라스틱 플라스크에 이식편을 옮깁니다.
기증자 커프를 위해 폐동맥 위에 1mm 길이의 20게이지 혈관카테터 커프를 놓습니다. 가는 집게를 사용하여 동맥 가장자리를 커프 위로 부드럽게 접습니다. 10-0 나일론 넥타이를 사용하여 접힌 용기를 커프에 고정합니다.
기증자 심장을 헤파린 화 된 식염수 또는 섭씨 4 도의 다른 보존 용액에 보관하십시오. 전기 면도기를 사용하여 자궁 경부에서 머리카락을 면도하여 수술 부위를 준비하십시오. 각막 건조를 방지하기 위해 멸균되지 않은 비 약용 안과 연고를 눈에 바르십시오.
앞다리가 몸에 인접하고 머리가 약간 왼쪽으로 향하는 앙와위 자세로 동물을 놓습니다. 수술 용 테이프로 앞다리와 뒷다리를 고정하십시오. 0.75 % 요오드와 70 % 에탄올로 피부를 소독하십시오.
하악에서 흉골까지 정중선 자궁 경부 절개를 한 후 오른쪽 흉쇄 유돌근을 횡단합니다. 이식편 이식을위한 공간을 만들기 위해 자궁 경부의 우엽을 절제하십시오. 6-0 실크 봉합사를 사용하여 근위 외부 경정맥 위에 슬립 매듭을 묶습니다.
원위 외부 경정맥과 인접한 가지를 8-0을 사용하여 결찰 실크 봉합사. 정맥 아래에서 봉합하고 거즈로 덮으십시오. 외부 경정맥의 전벽을 가로 질러 가로 절개를하십시오.
근위 외부 경정맥의 가장자리와 밑에있는 조직을 통해 10-0 나일론 봉합사를 배치하여 커프 삽입 중에 정맥을 고정합니다. 8-0을 사용하여 원위 오른쪽 총 경동맥을 결찰하십시오. 경동맥 분기점보다 열등한 실크 봉합사. 6-0 실크 봉합사를 사용하여 근위 총 경동맥 위에 슬립 매듭을 묶습니다.
봉합사 사이의 말단으로 동맥을 횡단시킵니다. 그런 다음 0.6 밀리리터 길이의 24 게이지 혈관 카테터 커프를 수혜자의 오른쪽 총 경동맥 위에 놓습니다. 가는 집게를 사용하여 동맥 가장자리를 커프 위로 부드럽게 접습니다.
10-0 나일론 넥타이를 사용하여 접힌 용기를 커프에 고정합니다. 기증자 심장을 오른쪽 자궁 경부보다 우위에 놓습니다. 이식하는 동안 몇 분마다 심장 이식편에 차가운 식염수를 떨어 뜨립니다.
10-0 나일론 봉합사를 기증자 대동맥의 가장자리와 밑에있는 조직의 표면 물기를 통해 이식편을 제자리에 고정합니다. 기증자 대동맥을 0.5 밀리리터의 0.9 % 헤파린 화 식염수로 플러시하십시오. 수혜자의 총 경동맥 커프를 기증자 대동맥에 삽입하십시오.
8-0으로 문합 확보 실크 넥타이. 대동맥 앵커 봉합사를 제거하십시오. 0.5 밀리리터의 0.9 % 헤파린 화 된 식염수로 수혜자의 외부 경정맥을 플러싱하여 외부 경정맥을 공기를 제거하십시오.
기증자 폐동맥 커프를 수혜자의 외부 경정맥에 삽입하여 폐동맥 문합을 수행하고 8-0으로 고정합니다. 실크 넥타이. 외부 경정맥 앵커 봉합사를 제거하고 외부 경정맥의 나머지 후벽을 횡단하여 기본 조직에서 이식편을 제거합니다. 문합이 꼬이거나 비틀리지 않고 이식편이 적절하게 방향이 지정되었는지 확인하십시오.
수혜자의 외부 경정맥에 있는 슬립매듭을 풀고 총경동맥을 풀어 심장 이식편 재관류를 시작합니다. 이 프로토콜에서 입증 된 기술은 약 97 %이것은 잠재적으로 기증자 폐동맥에 배치 된 더 큰 20 게이지 커프가 수혜자에게 혈류를 충분히 되돌려 놓았 기 때문일 수 있습니다. 또한, 본 기술에서 커프 배치와 혈류의 정렬은 혈전증 및 문합 난류의 위험을 최소화합니다.
평균 수용자 수술 시간은 약 37분이었고 평균 저온 허혈 시간은 20분이었다. 생존 연구를 위해 심장 이식편은 심장 박동의 직접 시각화 및 디지털 촉진에 의해 매일 평가되었습니다. 생체 내 이광자 영상은 백혈구 트래피킹을 평가하기 위해 이식 후 초기에 수행되었습니다.
뒤틀림을 방지하기 위해 피부를 닫기 전에 이식편이 적절하게 배치되고 방향이 지정되었는지 확인하는 것이 중요합니다. 이 방법은 동종 면역 반응을 매개하는 이식 된 이식편에서 상주 면역 세포를 확인하기 위해 재 이식 모델에서 사용될 수 있습니다.
