אנו מספקים פרוטוקול להקים דימום פונטין מסיבי בחולדה. מודל זה קל להקמה, ניתן לחזרה ומוצלח מאוד. הזרקה מזוקקת של שיטת עכברוש אוטולוגי יכול לשמש כדי להפוך דימום בכל אחד מאזורי המוח.
אנשים שרוצים לנסות טכניקות אלה צריכים ללמוד כיצד להשתמש במסגרת סטראוטקסית, ולהכיר את האנטומיה פונטין. התחל על ידי הנחת וילון כירורגי על העכבר. לעשות חתך עם אזמל לאורך קו האמצע המסומן.
השתמש ספוגית כותנה כדי להסיר כל דם פוטנציאלי. ואז למקם חתיכת מלקחיים על כל צד של דש הקרקפת כדי לחשוף את הגולגולת. טובלים ספוגית כותנה ב-0.9% מלוחים ומסירים בעדינות את רקמות החיבור מעצם הגולגולת.
השתמש בעט סמן כדי לסמן את הנקודה המרכזית של הברגמה כנקודת המקור. בצע גולגולת באמצעות מקדחה מיקרו, ממשיך בזהירות. לאחר שתסיים להסיר את מקדחת המיקרו מהמסגרת הסטראוטקסית.
שים מזרק המילטון 100 מיקרו לתוך מחזיק סטריאוטאקסי. הפעל את מתג משאבת ההזרקה. לחץ על לחצן השאיפה המהירה.
ואז לשאוף פתרון הפרין ל 100 microliters ולנקז אותו לחלוטין. החל chlorhexidine ו 75% אלכוהול כירורגי לשפשף את כל הסיפור מהשורש כדי להטות לפחות שלוש פעמים כדי לחטא את העור, לרכך את החרמנות ולהגדיל את וריד הזנב כדי להגדיל את שיעור ההצלחה של הזרקה. חבר דיקור קרקפת למזרק מיליליטר אחד, ולאחר מכן הכנס את דיקור הקרקפת לתוך וריד זנב לרוחב שלושה סנטימטרים מקצה הזנב ולקחת 150 מיקרוליטרים של דם.
הסר את דיקור הקרקפת מהמזרק מיליליטר אחד והעבר את הדם לצינור. עובד במהירות כדי למנוע קרישת דם. תחליף כפפות כירורגיות.
בחר את מצב הנסיגה. הגדר את עוצמת הקול ל- 100 מיקרוליטר והגדר את המהירות ל- 200 מיקרוליטר לדקה. לחץ על כפתור הריצה, ושואף 100 מיקרוליטרים של דם לתוך מזרק המילטון.
עבור למצב החדרה והגדר את המהירות למיקרוליטר אחד לדקה. לקדם את המזרק עד הקצה מגיע 9.2 מילימטרים מתחת לפני השטח של המוח ולהזריק את הראשון 10 microliters של דם. לחץ על כפתור ההפעלה.
לעצור את הזריקה ולהשאיר את המזרק בעמדה במשך 20 דקות כדי למנוע דם לזרום לתוך החלל התת-קרקעי. לסגת המזרק עד הקצה מגיע תשעה מילימטרים מתחת לפני השטח של המוח, ולאחר מכן להפעיל מחדש את הזריקה באותה מהירות של מיקרוליטר אחד לדקה עד הדם שיורית הוזרקו לחלוטין. השאירו את המזרק בעמדה במשך 10 דקות, כדי למנוע זרימת דם בחזרה.
הסר את המזרק מהמוח לאט. ואז להשתמש מלט העצם כדי לכסות את החור craniotomy. כאשר המלט מתייבש לתפור את הפצע עם חוט תפר פוליאמיד ארבע אפס.
לאחר תפירה שלושה או ארבעה תפרים לקשור 2 קשרים כירורגיים סטנדרטיים אחד. שימו לב לחולדה כל 15 דקות עד שהיא מתאוששת לחלוטין מהרדמה, ואז החזירו אותה לכלוב המקורי עם כרית חימום מתחת. ספקו לחולדה גישה חופשית למזון ומים.
בסך הכל 25 בעלי חיים שימשו לשליטה 30 מיקרוליטר, 60 מיקרוליטר, ו 100 זריקות דם מיקרוליטר. בדיקות התנהגותיות נערכו בימים 1, 3, 7 ו-14 לאחר הניתוח. דימום פונטין גרם לגירעונות נוירולוגיים כמו רפלקס קרנית מופחת וחיובים.
הזרקה של 100 מיקרוליטרים של דם גם גרמה מיוטוניה. סריקת MRI בוצעה 24 שעות לאחר הניתוח. בקבוצות הזרקת הדם, דימום זוהה כחפת hypointense עם ISO לליבה hyperintense מעט בחלק בזילר של הבריכות.
נפח הדימום גדל עם נפח ההזרקה. החולדות הוקרבו 24 שעות ו-14 ימים לאחר הניתוח. ושני חלקים בעובי מילימטר נעשו.
דימום זוהה סביב אתר ההזרקה והתחלק בבסיס הבריכות. הייתה בצקת קלה סביב הדימום בקבוצת הזרקת הדם 100 מיקרוליטר. חלק מהחולדות הוקרבו שלושה ימים לאחר הניתוח וחלקי פרפין נעשו עבור מכתים HE.
התוצאות הראו כי בקבוצות הזרקת הדם תאים דלקתיים מועשרים באזור דימום para המוגלובין נשאר הכיל עם תאי דם אדומים שלמים. בעת ניסיון פרוטוקול זה הקפד לזכור את מיקום ההזרקה. שיטה זו יכולה לשמש כדי לגרום לדימום בכל אזור מוחי ספציפי.
