שיטה זו מספקת פונדקאית התנהגותית פרה-קלינית לפוטופוביה, שהיא תלונה ראשית של חולי מיגרנה. היתרון העיקרי של טכניקה זו הוא כי הזיהוי הוא אוטומטי ולכן נוח מאוד. כמו כן, סלידה קלה וחרדה ניתן להבחין על ידי ביצוע בדיקות אלה.
ביום הראשון, הפעל את מנגנון הבדיקה האור/כהה. הגדר את עוצמת האור ל-27,000 לוקס. מכניסים את התווסף הכהה לתא בהיר/כהה.
פתח את תוכנת המעקב והגדר פרוטוקול חדש. בהגדרת הפרוטוקול החדשה, הגדר את משך הזמן ל- 30 דקות. בהגדרת הניתוח החדשה, הגדר סלי נתונים לפי משך זמן ל- 300 שניות.
בהגדרת האזור החדשה, בחר אזורים מוגדרים מראש. בחר שניים ולאחר מכן אופקי. בדוק אם התא מחולק לשני אזורים בגודל שווה אופקית להקלטה.
לפני הבדיקה, להרגיל את העכברים לחדר הבדיקות במשך שעה אחת, שמירה על אור החדר על מנת לא להפריע העכברים השעון הביולוגי. ודא שכל הציוד לבדיקה הקלה/אור מופעל ומאפשר לעכברים להסתגל באופן מלא לסביבת חדר הבדיקות. בחר לרכוש נתונים, הזן את מזהי העכבר והפעל את הפרוטוקול.
משוך את המגירה מחוץ לתא ההחלשה של הצליל כדי לגשת לתא הבהיר/כהה ולהכנסה הכהה. מניחים בעדינות עכבר באזור האור של התא ולדחוף את המגירה בתוך התא. ודא שהתוכנה מזהה את העכבר באופן מיידי ומתחילה להקליט פעילות.
המתן להפסקת ההקלטה באופן אוטומטי לאחר 30 דקות. תחזיר את העכבר לכלוב הביתי שלו. נקו את התא והכניסו את החדר הכהה באמצעות מגבונים חד פעמיים ריח אלכוהולי ריח כדי לחסל את כל רמזי הריח שהותיר העכבר הקודם.
ביום הרביעי, חזור על כל השלבים שבוצעו ביום הראשון. ביום השביעי, חזור על השלבים שבוצעו ביום הראשון, אך רק עד להרגלת העכברים. לאחר ההרגל, לנהל את העכברים עם CGRP intraperitoneal.
ואז להחזיר עכברים לכלובי הבית שלהם. לאחר 30 דקות, לחדש את הפרוטוקול ולהפעיל את העכבר בתא אור / כהה כאמור קודם לכן. נקה את התא והכנס כהה כפי שתואר קודם לכן.
ביום 10, חזור על כל השלבים שבוצעו ביום הראשון. הפעל את המנגנון והגדר את עוצמת האור ל-27,000 לוקס. פתח את תוכנת המעקב והגדר פרוטוקול חדש כפי שהוכח בעבר.
בהגדרות האזור החדשות, בחר אחת ואחריה מרכז. הגדר את הפריפריה כ-3.97 ס"מ ואת המרכז כ-19.05 על 19.05 ס"מ. להרגיל את העכברים לחדר הבדיקות כפי שהוכח בעבר.
לנהל את העכברים עם CGRP intraperitoneal. החזירו את העכברים לכלובי הבית שלהם. לאחר 30 דקות, הפעל את הפרוטוקול.
משוך את מגירת הנשלף מחוץ לתא להחלשת הצליל והנח את העכבר בעדינות באמצע תא השדה הפתוח. לדחוף את המגירה בתוך התא. עקוב אחר התנהגות העכבר במשך 30 דקות, ולאחר מכן להחזיר עכברים לכלובי הבית שלהם.
נקו את המנגנון כפי שהוכח בעבר. התוצאות הראו כי הזרקה תוך-קוגניטיבית של CGRP הפחיתה באופן משמעותי את משך הזמן שהוקדש לאזור האור בבדיקה האור/כהה בעכברים שחורים CD1 ו- C57 שחורים 6J, אך לא השפיעה על הזמן שעכברים בילו במרכז בבדיקת השדה הפתוח בעכברים שחורים CD1 ו- C57 שחורים 6J. הטיפול ב- CGRP גם הגדיל את כמות הזמן שעכברים נחו באזור החשוך, אך לא באזור האור הן בעכברים שחורים CD1 והן בעכברים שחורים מסוג C57.
הגירוי האופטי של נוירונים בגרעין התלמי האחורי, הוביל לירידה מקבילה במשך הזמן שעכברים בילו באזור האור בבדיקת האור/הכהה בעכברים מוזרקים של channelrhodopsin-2 בהשוואה לעכברים מוזרקים של וירוס שליטה. עלייה בזמן המנוחה באזור החשוך אך לא באזור האור נצפתה גם במקרה של עכברים מוזרקים channelrhodopsin-2, בהשוואה לווירוס השליטה מוזרק עכברים. חשוב לזכור כי כאשר מכניסים את העכבר לתא האור / הכהה, העכבר צריך להיות מטופל בעדינות כדי למנוע מתח רב ככל האפשר.
טכניקה זו תסלול את הדרך לחקור מנגנונים העומדים בבסיס מיגרנה והפרעות אחרות הקשורות לפוטופוביה, ולבדוק את היעילות הפרה-קלינית לטיפולים פוטנציאליים.
