Cette méthode fournit un substitut comportemental préclinique pour la photophobie, qui est une plainte principale des patients migraineux. Le principal avantage de cette technique est que la détection est automatique donc très pratique. En outre, l’aversion à la lumière et l’anxiété peuvent être distinguées en effectuant ces tests.
Le premier jour, allumez l’appareil de dosage clair/foncé. Réglez l’intensité lumineuse sur 27 000 lux. Placez l’insert sombre dans la chambre claire/sombre.
Ouvrez le logiciel de suivi et configurez un nouveau protocole. Dans le nouveau paramètre de protocole, définissez la durée sur 30 minutes. Dans le nouveau paramètre d’analyse, définissez les bacs de données par durée sur 300 secondes.
Dans le nouveau paramètre de zone, choisissez des zones prédéfinies. Choisissez deux, puis horizontalement. Vérifiez si la chambre est divisée en deux zones de taille égale horizontalement pour l’enregistrement.
Avant le test, habituez les souris dans la salle de test pendant une heure, en gardant la lumière de la pièce allumée afin de ne pas perturber le rythme circadien des souris. Assurez-vous que tout l’équipement pour le test clair/foncé est allumé, ce qui permet aux souris de s’acclimater complètement à l’environnement de la salle de test. Sélectionnez Acquérir des données, entrez les ID de souris et démarrez le protocole.
Tirez le tiroir à l’extérieur de la cabine d’atténuation du son pour accéder à la chambre de lumière / obscurité et à l’insert sombre. Placez doucement une souris dans la zone lumineuse de la chambre et poussez le tiroir à l’intérieur de la cabine. Assurez-vous que le logiciel détecte immédiatement la souris et commence à enregistrer l’activité.
Attendez que l’enregistrement s’arrête automatiquement après 30 minutes. Remettez la souris dans sa cage d’origine. Nettoyez la chambre et insérez l’insert foncé à l’aide de lingettes jetables germicides à odeur d’alcool pour éradiquer les signaux olfactifs laissés par la souris précédente.
Le quatrième jour, répétez toutes les étapes qui ont été effectuées le premier jour. Le septième jour, répétez les étapes effectuées le premier jour, mais seulement jusqu’à l’accoutumance des souris. Après l’accoutumance, administrer les souris avec CGRP intrapéritonéal.
Ensuite, retournez les souris dans leurs cages d’origine. Après 30 minutes, reprenez le protocole et exécutez la souris dans la chambre claire/sombre comme mentionné précédemment. Nettoyez la chambre et l’insert sombre comme décrit précédemment.
Le jour 10, répétez toutes les étapes effectuées le premier jour. Allumez l’appareil et réglez l’intensité lumineuse à 27 000 lux. Ouvrez le logiciel de suivi et configurez un nouveau protocole comme démontré précédemment.
Dans les nouveaux paramètres de zone, choisissez-en un suivi du centre. Définissez la périphérie sur 3,97 centimètres et le centre sur 19,05 par 19,05 centimètres. Habituez les souris à la salle de test comme démontré précédemment.
Administrer les souris avec CGRP intrapéritonéal. Retournez les souris dans leurs cages d’origine. Après 30 minutes, démarrez le protocole.
Tirez le tiroir coulissant à l’extérieur de la cabine d’atténuation du son et placez doucement une souris au milieu de la chambre de champ ouverte. Poussez le tiroir à l’intérieur de la cabine. Suivez le comportement de la souris pendant 30 minutes, puis ramenez les souris dans leurs cages d’origine.
Nettoyez l’appareil comme démontré précédemment. Les résultats ont révélé que l’injection intrapéritonéale de CGRP réduisait significativement la durée du temps passé dans la zone claire dans le test lumière/obscurité chez les souris NOIRES CD1 et C57 6J, mais n’affectait pas le temps passé au centre dans le test en plein champ chez les souris CD1 et C57 noires 6J. Le traitement par CGRP a également augmenté la durée pendant laquelle les souris se reposaient dans la zone sombre, mais pas dans la zone claire chez les souris NOIRES CD1 et C57 6J.
La stimulation optique des neurones dans les noyaux thalamiques postérieurs a entraîné une diminution correspondante de la durée que les souris ont passée dans la zone de lumière dans le test clair/foncé chez les souris injectées de channelrhodopsine-2 par rapport aux souris injectées par le virus témoin. Une augmentation du temps de repos dans la zone sombre mais pas dans la zone claire a également été observée dans le cas des souris injectées de channelrhodopsine-2, par rapport aux souris injectées par le virus témoin. Il est important de se rappeler que lorsque vous mettez la souris dans la chambre claire / sombre, la souris doit être manipulée doucement pour éviter autant de stress que possible.
Cette technique ouvrira la voie à l’exploration des mécanismes sous-jacents à la migraine et à d’autres troubles liés à la photophobie, et testera l’efficacité préclinique pour des thérapies potentielles.
