Quindi questo protocollo è la prima descrizione della CDS nei topi, permettendoci di imitare l'intervento chirurgico eseguito nella pratica clinica e di decifrare i meccanismi metabolici cellulari e molecolari in modo più prevedibile. Questa procedura richiede meno anastomosi rispetto al bypass gastrico, quindi l'operazione viene abbreviata e il tasso di sopravvivenza viene migliorato con benefici metabolici simili al bypass gastrico. Iniziare somministrando buprenorfina, amoxicillina, metoclopromide e ferro per via sottocutanea.
Dal processo xifoideo, radere i primi due terzi dell'addome del topo usando un rasoio elettrico e disinfettare l'addome del topo usando una soluzione di iodio povidone due volte. Quindi posizionare il mouse supino su un termoforo dedicato coperto da un sottopad pulito. Controllare la profondità dell'anestetizzazione utilizzando il test del pizzicamento della punta e coprire il mouse con un involucro di plastica sterilizzato.
Quindi, estendere l'addome del mouse fissando il nucleo inferiore e posizionando una siringa da un millilitro o equivalente dietro la schiena del mouse. Tagliare un'apertura delle dimensioni di una finestra come futuro sito di incisione in un impacco sterile e usarlo come campo operativo per coprire il mouse. Eseguire una laparotomia mediana con le forbici aprendo la pelle addominale dal processo xifoideo al centro dell'addome.
Quindi utilizzare le forbici per aprire la parete addominale lungo l'alba lineare tra i muscoli addominali. Utilizzando un batuffolo di cotone inumidito, mobilitare delicatamente il duodeno dalla cavità addominale per vedere i suoi lati anteriore e posteriore. Quindi localizzato il dotto biliare principale, che è immediatamente visibile al microscopio binoculare sul lato posteriore dell'omento minore e del duodeno.
Sotto il microscopio binoculare, visualizzare un'area approssimativamente dal dotto biliare principale tra le arterie del duodeno e penetrare in quest'area usando una pinza curva da un lato all'altro del duodeno. Successivamente, eseguire una negazione duodenale tra le arterie utilizzando una sutura non assorbibile 6.0. Utilizzare un batuffolo di cotone inumidito e un morsetto non traumatico per mobilitare lo stomaco dalla cavità addominale e separarlo dagli organi circostanti usando micro forbici.
Quindi separare l'omento maggiore, tagliare le arterie gastriche corte tra lo stomaco e la milza e il lipoma che collega lo stomaco alla parte inferiore dell'esofago. Utilizzando micro forbici, eseguire una gastrotomia di cinque millimetri aprendo il fondo e rimuovendo il cibo residuo utilizzando un batuffolo di cotone. Applicare clip chirurgiche lungo la maggiore curvatura dello stomaco per escludere circa l'80% dello stomaco e rimuovere lo stomaco escluso tagliandolo con micro forbici.
Ora, ancorare le clip chirurgiche a una certa impermeabilità eseguendo una sutura corrente dall'inizio alla fine della resezione dello stomaco. Sotto il microscopio binoculare, visualizzava l'ultima ansa ileale situata poco prima del cieco. Mobilitare delicatamente l'intestino tenue all'esterno della cavità addominale dall'ultima ansa ileale e smaltire l'intestino tenue in modo che l'ultima ansa ileale si trovi sul lato sinistro.
Utilizzando un cavo di sutura di dimensioni precedenti, misurare 10 centimetri dall'ultimo anello ileale. Per garantire che il futuro arto biliare arrivi al lato dell'anastomosi dal suo lato sinistro, fare un grande anello dell'intestino tenue attorno al lato della futura anastomosi. A questo punto, esegui un'enterotomia di quattro millimetri aprendo l'intestino tenue usando micro forbici.
Eseguire un'enterotomia di quattro millimetri sul duodeno immediatamente dopo il piloro tra lo stomaco e la legatura eseguita in precedenza. Quindi posizionare un impacco di collagene emostatico assorbibile per favorire l'omeostasi. Utilizzando una sutura 8.0 non assorbibile, eseguire un'anastomosi ilealanica duodenale da lato a lato partendo dal lato posteriore al lato anteriore e visualizzare l'intestino tenue nella cavità addominale come descritto nel manoscritto.
Reidratare il topo con 500 microlitri di soluzione salina a 37 gradi Celsius infondendolo nella cavità addominale usando una siringa da un millilitro. Ora usa una singola sutura da corsa 6.0 non assorbibile per chiudere lo strato nevrotico muscoloaponeurotico e chiudi la pelle addominale usando 6.0 suture separate non assorbibili. Dopo quattro settimane di allenamento intensivo, si osserva una progressiva diminuzione del tempo operativo, raggiungendo circa 60 minuti.
Anche la sopravvivenza post-operatoria a cinque giorni è migliorata con il tempo, raggiungendo il 77% durante la pratica regolare. Dal quarto giorno post-operatorio, i topi SADI-S hanno sperimentato una significativa perdita di peso rispetto ai topi Sham. Un aumento significativo dell'assunzione giornaliera di cibo è stato osservato nei topi SADI-S.
Tuttavia, dopo l'integrazione di ferro, non è stata osservata alcuna differenza significativa nella concentrazione di emoglobina tra i gruppi Sham e SADI-S. Quando si esegue l'anastomosi, è fondamentale disporre l'intestino in modo che la bile e il cibo non si oppongano l'un l'altro per evitare una sindrome dell'ansa afferente.
