마취된 동물을 수술 플랫폼에 놓는 것으로 시작합니다. 수술 중 각막 건조를 방지하기 위해 각 동물의 눈에 윤활 눈 연고를 바르십시오. 면도한 수술 부위를 포비돈, 요오드, 이소프로판올을 번갈아 3회 소독합니다.
그런 다음 종이 타월 롤이나 직경 1.5cm 튜브를 엉덩이 바로 아래에 놓습니다. 동물을 창호 드레이프로 드레이프하고 수술 접근을 위해 요추 위의 창호 중앙에 놓습니다. 동물의 마취 깊이를 확인하려면 각 발을 꼬집고 금단 반응이 없는지 관찰하십시오.
그런 다음 11번 메스 칼날을 사용하여 L2에서 L6 척추뼈까지 정중선을 따라 3cm 길이의 피부를 절개합니다. 이제 근육과 피부 사이에 멸균 된 곡선 수술 용 가위를 삽입하고 끝을 부드럽게 열어 아래 근육에서 피부를 분리합니다. L2에서 L5 척추의 가시돌기를 덮고 있는 근막을 제거합니다.
AAV9 벡터 25-35 마이크로리터를 멸균 마이크로 원심분리기 튜브의 캡에 피펫팅합니다. 캡에서 벡터의 전체 부피를 인슐린 주사기로 그립니다. 그런 다음 동물의 L5 및 L4 가시 돌기를 식별합니다.
주사기 바늘을 L5 가시돌기의 왼쪽에 놓고 돌기의 꼬리 끝부분에 맞춥니다. 주사 바늘을 L5 라미나 위로 약 8mm 앞으로 전진시킨 다음 뼈와 접촉할 때까지 L4 라미나 아래로 요추 수조로 이동합니다. 주사기 플런저를 약 5초 동안 천천히 누릅니다.
그런 다음 삽입 부위에서 바늘을 천천히 빼냅니다. 4-0 봉합사 또는 수술용 스테이플을 사용하여 상처의 한쪽 끝 부분을 절개 부위를 봉합하기 시작합니다. 염료 주입의 성공 여부를 평가하기 위해, 동물을 안락사시킨 후, 가시돌기의 양쪽에서 척추와 평행한 근육을 4cm 길이로 절개한다.
척추 집게나 가위를 사용하여 가시돌기 사이의 근육을 섬세하게 제거합니다. Rongeur를 사용하여 L6에서 하부 흉추까지의 가시 돌기를 추출합니다. 룽게르의 아래쪽 끝부분을 L5 라미나 아래에 삽입하고 척수 위에 있는 뼈를 여러 번 물어 체계적으로 제거합니다.
